RAF信号通路

花青素还原酶(anthocyanidin reductase, ANR)是黄酮合成途径中的关键酶,该酶的催化活性对花青素含量有重要的调控作用。本研究根据忍冬转录组数据,设计特异性引物,克隆忍冬和红白忍冬ANR基因的CDS、gDNA及启动子序列。结果表明,从忍冬和红白忍冬克隆得LjANR和rLjANR的CDS序列均为1 002 bp, gDNA序列分别为2 017和2 026 bp,启动子序列分别为1 170和1 164 bp。LjANR和rLjANR均含有6个外显子和5个内含子,外显子长度一致,内含子差异较大,二者启动子序列中均含有大量光响应、激素应答、非生物胁迫应答元件。生物信息学分析发现, LjANR和rLjANR均编码333个氨基酸,均为稳定的疏水性蛋白,无跨膜结构,无信号肽,二级结构主要由α-螺旋和无规卷曲组成。序列比对及系统进化分析表明, LjANR和rLjANR蛋白与猕猴桃、茶树、油茶聚为一类,亲缘关系较近。qRT-PCR分析发现, LjANR和rLjANR均在花蕾中表达量最高,根中selleckchem表达量最低,不同花期的表达量变化模式相似, S1和S2期表达量较高,然后表达量逐渐下降,至S4期达到最低,之后在S5期有一个缓慢的上升后表达量再次下降,两个品种中ANR基因的表达量在根、S2、S5期差异显著,茎、花蕾、S1、S3、S6期差异极显著。将LjANR基因构建到原核表达载体pEModeling human anti-HIV immune responseT-32a上进行诱导表达,在59 kD处成功表达出目的蛋白。该研究为进一步研究ANR基因的功能奠定了基础Tamoxifen体外,同时也为忍冬新品种的选育提供理论指导。

噪音是广泛存在的环境刺激。在现代集约化饲养模式下,除湿机、换气风扇、清粪冲水系统、饲喂系统、人畜交互等产生的噪音对动物具有危害性。噪音通过诱导细胞凋亡、氧化损伤等方式介导神经炎症积累,并导致动物消极情绪的产生和异常行为的表达。作为环境应激源,噪音一方面由于其自身物理特性而难以消除,一方面又具备了引发细胞死亡、神经递质平衡紊乱的潜在风险。在生命发展的早期,神经发育水平较低,但发育能力强,这使得新生儿的神经系统保持高度可塑性,即更容易被外部环境塑造。此时脑神经发育、免疫功能相对薄弱,外界刺激造成脑损伤的风险也会相应提高。因此,生命早期是面对外界环境刺激的关键时期。通过诱导噪音应激,对断奶仔猪杏仁核、下丘脑、海马的神经发育情况进行评估,以探究:1)噪音带来的负面影响是否体现在细胞凋亡、炎症积累、氧化应激等方面;2)这些改变将如何影响神经的发育发展,与神经递质代谢水平、行为模式间将如何相互作用。仔猪具有与人类婴儿相似的解剖结构和生理状态,因此本研究可以在比较医学领域为听觉刺激介导神经炎症和情绪反应提供一些理论论据。本研究选择72头仔猪,随机分为对照组(空白对照),噪音组(实验组)和音乐组(积极对照),安置在3个独立的等空间房间内(房间规格:3×3.8m),每个房间内有4个圈栏,每圈栏饲养6头仔猪,公母各半,养殖密度为0.36m~2/头。仔猪入圈适应新环境,5天后正式试验。对照组,噪音组及音乐组的天花板中央各有一个左右声道的扬声器,房间内各处可接收到的声音响度相同,对照组为空白对照,不播放任何声音,其平均环境背景声音响度低于40d B,噪声组播放录制自原猪舍的背景音(风机等机械噪音,响度为80-85d B),音乐组播放莫扎特K.448曲目,声音响度设置为60-70d B。实验过程中采用数字声音分贝仪(AS804,中国香港智能传感器有限公司)进行声音响度的测量,每日上午10点至下午4点连续6小时循环播放声音,持续28天,采集行为录像。试验结束后,在每圈内随机选择一头仔猪处死,采集血清、杏仁核、下丘脑、海马组织。1)噪音导致的行为表达差异。对噪音组、音乐组和对照组仔猪的行为活动进行观察,评估状态性行为(站立、趴卧),事件性行为(玩耍、摇尾、圈栏接触、拱地、拱腹、拱耳、拱尾、攻击行为)的发生情况。试验结果表明,噪音组仔猪表现出更高的唤醒性,但与音乐组相比表达更多的攻击行为、圈栏接触和拱耳行为;音乐组仔猪较噪音组表达更多的积极情绪相关行为,如摇尾行为。这表明噪音组仔猪处在高唤醒-负效价的焦虑情绪状态。2)噪音诱导消极情绪和危害神经发育的生理表现。酶联免疫吸附实验(ELISA)结果显示,噪音组仔猪杏仁核、下丘脑、海马组织中IL-6、IL12、8-OHd G的含量显著高于对照组(P<0.05),而IL-10含量低于对照组(P<0.05);血清ACTH、NE含量高于对照组(P<0.05)。这表明噪音导致了仔猪的应激和炎症反应。生化试剂盒结果显示,噪音组仔猪血清中CAT、SOD活性低于对照组(P<0.05),以上结果与相关基因簇的相对表达量变化趋势相符。透射电镜观察显示,噪音组仔猪的杏仁核的神经元细胞内胞质着色变深,染色质聚集,发生了细胞死亡现象,而对照组和音乐组超微结构未见明显改变。在噪音组仔猪杏仁核组织的病理切片中,视野内可见多处出血点,炎性细胞发生浸润,围绕神经元出现卫星现象,局部有噬神经元发生。3)噪音影响神经发育的分子机制。对仔猪杏仁核、下丘脑、海马的促炎因子(IL-6、IL-8、IL-12、IL-1β、TNF-α)、抗炎因子(IL-4、IL-10、TGF)、神经营养因子(BDNF)、凋亡(Bax、Caspase3、Caspase9、Bcl2)、抗氧化(Nrf2、HO-1、Hepatic stellate cellSOD、CAT)、DNA损伤(P53、STAT3、CHK2、Md M2、CDK2、ATM、ATR)、NF-κB炎症信号通路基因(NF-κB、TLR4、MYD88、IκBα)等相关基因簇的m RNA相对表达量进行检测。与对照组相比,噪音组仔猪杏仁核、下丘脑、海马组织IL-6、IL-8、IL-12、IL-1β、TNF-α、Bax、Caspase3、Caspase9、STAT3、MDM2、CDK2、NF-κB、TLR4、MYD88、IκBα的表达上调,IL-4、TGF-β、Bcl2、Nrf2、HO-1、SOD、CAT、P53、ATM、CHK2、BDNF的表达下调。音乐组仔猪杏仁核、下丘脑、海马中IL-6、Bax、Caspase3、Caspase9、NF-κB、TLR4等基因的表达低于噪音组,IL-4、IL-10、TGF-β、Bcl2、Nrf2、HO-1、SOD、CAT、STAT3、CHK2、BDNF的表达高于噪音组。Western Blot结果显GNE-140示,噪音组仔猪杏仁核组织中Bax、Caspase3、Caspase9的相对表达量显著高于对照组,Bcl2显著低于对照组。这表明凋亡通路被激活,这种现象也不同程度的表现在下丘脑和海马组织中。研究结果说明,噪音危害仔猪脑神经发育涉及细胞凋亡、神经炎症、氧化损伤及DNA损伤等过程,而音乐在对脑产生的刺激中与噪音发挥了相反的作用。4)噪音对神经递质代谢平衡的影响。本研究通过靶向代谢组检测对杏仁核神经递质代谢情况进行了评估。结果表明,噪音和音乐刺激均对去甲肾上腺素、γ-氨基丁酸,多巴胺,组胺,谷氨酸,甘氨酸,牛磺酸,组氨酸产生不同程度的分泌和代谢影响。其中,与对照组相比,噪音组BMS-354825作用仔猪杏仁核中去甲肾上腺素、γ-氨基丁酸、组胺、谷氨酸、甘氨酸、牛磺酸和组氨酸的水平显著上调,多巴胺水平下调(P<0.05);同时,音乐也能够显著提升去甲肾上腺素、多巴胺、牛磺酸的含量,并降低组胺的含量(P<0.05)。噪音组γ-氨基丁酸含量的异常上调伴随攻击行为的表达增加,表明了神经递质平衡紊乱是噪音诱导仔猪焦虑情绪、危害神经发育的途径之一,而音乐则可能通过提高牛磺酸含量的方式改善仔猪认知发展。本研究表明,噪音造成的长期慢性应激使仔猪产生一种焦虑情绪,进而表现了更多攻击行为和异常表达的中性行为。音乐可以作为一种环境富集条件,在某种程度上改善仔猪福利。

目的 对2型糖尿病(T2DM)患者糖尿病肾脏病(DKD)的危险因素进行分析。方法 回顾性分析2020年5月至2022年2月在安徽医科大学附属省立医院内分泌科住院的248例T2DM患Natural biomaterials者的临床资料，根据尿白蛋白/肌酐比(UACR)或估算肾小球滤过率(eGFR)结果，分为单纯T2DM组(T2DM组，68例)、T2DM合并DKD组(DKD组，180例),收集各组年龄、糖尿病病程、身高、体重、体重指数(BMI)、高血压病史、吸烟史、T2DM治疗方式，抽取患者清晨空腹静脉血，检测血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)和血脂等，比较2组一般资料和实验室指标，对2组临床资料进行单因素分析，并对其中差异有统计学意义的因素进行赋值和多因素logistic回归分析。结果 (1)组间与T2DM组比较，DKD组年龄、糖尿病病程、高血压病史、吸烟史、HbA1c、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、是否使用胰岛素控制血糖存在差异，差异有统计学意义(P值均<0.05)。(2)单因素分析结果显示，DKD发生受患者年龄、糖尿病病程、高血压病史、吸烟史、HbA1c、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、使用胰岛selleckchem素控制血糖等因素影响(P值均<0.05)。(3)多因素非条件logistic回归分析结果显示，高龄(≥50岁)、糖尿病病程长(≥10年)、有高血压病史、吸烟史、HbA1c(≥8.5%)、尿素氮(≥7.14 mmol/L)、T2DM患者使用胰岛素控制血糖均为T2DM住院患者发生DKD的危险确认细节因素(OR>1.00,P值均<0.05);HDL-C(≥1 mmol/L)则为影响T2DM患者发生DKD的保护因素(OR<1.00,P<0.05)。结论 HDL-C为T2DM住院患者发生DKD的保护因素；长病程、较高的HbA1c和LDL-C、高血压病史、吸烟和胰岛素治疗是DKD的危险因素。

目的 分析糖尿病肾病(DN)合并上尿路感染患者PINK1/Parkin mRNA与尿微量白蛋白(mAlb)的关系。方法 选择2019年10月-2020年9月邢台市人民医院收治的DN合并上尿路感染患者73例作为研究组，选择同期医院收治的DN未合并上尿路感染患者141例作为对照组；依据糖尿病肾脏疾病肾小管间质和血管损害病理评分(RPS)将73例DN合并上尿路感染患者按照肾小管间质及血管受损程度分为轻度组(n=15)、中度组(n=28)和重度组(n=30);通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测上述患者外周血PINK1 mRNA及Parkin mRNA表达量，免疫比浊法检测mAlb,比较上述不同分组患者各指标。结果 研究组患者PINK1 mRNA、Parkin mRNA及mAlb均高于对照组(P<0.05);重度组患者PINK1 mRNA、Parkin mRNA、mAlb和RPS评分均较轻、中度组升高，中度组较轻度组升高(P<0.05);经受试者工作特征(ROC)曲Colforsin配制线分析，PINK1 mRNA、Parkin mRNA及二者预测DN患者合并上尿路感染患者肾功能损伤均有较高效能，其中二者联合诊断效能较高，其约登指数为0.678,曲线下面积(AUC)为0.853; PINK1 mRNA、Parkin mRNA与multi-biosignal measurement systemmAlb水平呈正相关(r=0.668、0.559,P均<0.05),与RPS评分也呈正相关(r=0.612、0.478,P均<0.05); PINK1mRNA、Parkin mRNA及二者联合指导DN合并上尿路感染肾功能损伤轻中度与重度的区分均有较高效能，三者联合诊断时效能最高。结论 DN患者合并上尿路感染时PINK1/Parkin通路被激活，外周血单个核细胞的PINK1 mRNA、Parkin mRNA表达量异常升高，且与mAlb及肾功能损伤程度呈正相关，二者联合诊断DN合selleck NMR并上尿路感染患者肾功能损伤的程度具有较高效能。

目的评估全身免疫炎症指数（systemic immune inflammatoBiofuel combustionry index,SII）对胆道支架联合 ~(125)I粒子植入治疗肝外胆管癌（extrahepatic cholangiocarcinoma, ECCA）患者预后的判断价值。方法 纳入2018年8月至2021年8月徐州医科大学附属医院介入科收治MK-1775体内的接受胆道支架联合 ~(125)I粒子条植入的无法切除的ECCA患者128例，术前3 d内行外周血常规检查，并依此计算SII。采用受试者工作特征曲线（ROC）计算SII最佳临界值，根据该临界值将患者分为高SII组和低SII组。利用Cox回归模型分析影响患者预后的独立因素，绘制Kaplan-Meier曲线分析患者1年生存率。结果 SII最佳临界值为1 050，敏感度为66.0%，特异度为69.3%,ROC曲线下面积为0.676。高SII组ECCA患者1年生存率明显低于低SII组患者（P<0.05）。单因素Cox回归分析显示，血管侵犯、T分期、辅助化疗、CA19-9、术前SII是影响ECCA预后的重要因素，多因素Cox回归分析显示T分期、CA19-9、术前SII是患者预后的独立危险因素，辅助化Cobimetinib采购疗是保护性因素。KM曲线显示高SII组患者术后1年的生存率明显低于低SII组。结论 术前SII对行胆道支架联合 ~(125)I粒子植入治疗ECCA患者的预后评估具有重要价值。

对早期肾功能损伤标志物在高血压肾功能损伤诊断中的价值和准确性进行分析和评估。本研究选择2019年6月—2020年10月在医院内进行高血压肾功能损伤疾病治疗的患者作为观Dolutegravir配制察组(n=70),同时选择在医院中进行了体检的健康者作为研究当中的对照组(n=70),对2个组别当中研究人员实施高selleck NMR血压肾功能损伤诊断,对2组中研究人员的肾功能相关指标和肾功能损伤标志物的相关性进行对比分析。对照组研究对象的CysC、β2-MG、BUN水平以及UmALB水平均比观察组更低,组别数据进行对比之后具有意义(P<0.05);对照组的Scr水平低于观察组,但组别间数peptide antibiotics据对比后不具有意义(P>0.05)。高血压肾功能损伤患者的Scr、CysC、β2-MG、BUN水平以及UmALB水平和肾损害呈现负相关的关系,组别数据进行对比之后具有意义(P<0.05)。在诊断高血压肾功能损伤患者期间,对其采取早期肾损伤标志物检查有较高的价值,和肾损害呈负相关。

目的:1.本研究旨在对2000年-2022年儿童紫癜性肾炎(HSPN)进行文献计量学分析,探讨儿童HSPN的研究现状和前沿趋势,梳理科学技术动态和方向。2.收集气阴两虚证HSPN患儿临床资料,统计分析加味参芪地黄汤治疗前后实验室指标和中医证候改善情况,评价加味参芪地黄汤临床疗效和对肾上腺皮质功能改善作用。3.网络药理学分析结合动物实验研究,探究加味参芪地黄汤治疗HSPN的作用机制。方法:1.筛选Web of Science Core Collection(Wo SCC)2000年-2022年儿童HSPN领域的文献。通过Cite Space5.8.R3和VOSviewer1.6.18对其年发表量、国家、机构、作者、期刊、关键词和参考文献等内容进行可视化分析。2.将自愿入组并签订知情同意书的气阴两虚证HSPN门诊患儿,采用随机数表方法将其均分为治疗组(加味参芪地黄汤)及对照组(肾炎康复片)。以4周为观察周期,统计两组患儿治疗前后24小时尿蛋白定量、尿红细胞计数、皮质醇及中医证候积分的变化,观察疗效。3.运用中药系统药理学分析平台(TCMSP)和中药分子机理生物信息学分析工具(BATLorlatinib临床试验MAN-TCM)获取加味参芪地黄汤的活性成分和有效靶点,基于Gene Card、OMIM、Drug Bank、TTD、Dis Ge NET等数据库获取HSPN的相关靶点,利用Cytoscape3.7.2软件构建“中药-活性成分-疾病共同靶点”网络,通过Metascape平台进行GO功能富集分析和与KEGG通路富集分析,并采用动物实验验证部分靶点。结果:1.文献计量学分析显示:儿童HSPN当前研究热点是“发病机制”和“治疗”。目前公认的发病机制是“四重打击”学说,半乳糖缺乏型Ig A1(Gd-Ig A1)是核心病理环节,KDIGO和欧洲共识建议根据HSPN病情采取分级治疗方案,更新的牛津分类法(MEST-C)有助于评价HSPN肾脏预后。2.本研究共纳入符合标准患儿64例,治疗过程中,剔除5例,失访脱落4例,最终治疗组27例,对照组28例。加味参芪地黄汤治疗genetic variability与肾炎康复片治疗四周,治疗组总有效率为81.5%,对照组为67.9%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组与对照组各项中医症状(血尿、气短声低、纳呆食少、口干咽燥、倦怠乏力、手足心热)较治疗前均有所好转(P<0.05),两组尿中泡沫差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组血尿、气短声低、口干咽燥症状较对照组明显改善(P<0.05),而纳呆食少、倦怠乏力、手足心热症状相比,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组与对照组患儿尿红细胞计数、24小时尿蛋白定量较治疗前均有所降低(P<0.01),组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。治疗组与对照组患儿皮质醇较治疗前有所升高(P<0.01),组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。3.网络药理学分析表明:经数据库分析,共获得加味参芪地黄汤活性成分93种,预测作用靶点228个,与HSPN共同靶点67个,核心靶点包括VEGFA、TGF-β1等;GO功能富集分析涉及凋亡信号通路、氧化应激反应、血管生成等过程;KEGG通路富集分析涉及VEGF信号通路、TGF-β信号通路等。加味参芪地黄汤可通过降低HSPN大鼠血清TGF-β1、VEGFA表达,抑制肾脏纤维化、炎症反应和免疫应答等生理过程,减轻肾脏病理损害,缓解HSPN病情。结论:1.虽然该领域文献数量有限,近几年来出版物涨幅明显,整体呈现上升趋势,说明越来越多学者关注儿童HSPN,“四重打击”学说和治疗方案仍是该领域目前的研究热点,Gd-Ig A1的作用机制和更新的牛津分类法可能是未来研究的重点。2.加味参芪地黄汤能缓解气阴两虚症状,清解余邪,促进皮质醇上升,改善肾上腺皮质功能。3.加味参芪地黄汤能够显著降低HSPN大鼠血清TGF-β1、VEGFA表达水平,减轻HSPN引起的肾脏病理损害,加味参芪地黄汤selleck Y-27632治疗HSPN是多成分、多靶点、多通路相互作用的结果。

目的 探讨脂氧素A4(LXA4)通过抑制TLR4/MyD88ethanomedicinal plants/NF-κB通路减缓脓毒症性急性肾损伤(SAKI)。方法将40只无特定病原体级雄性C57BL/6J小鼠随机分为SAKI组、SAKI+LXA4组、假手术组、假手术+LXA4组,每组10只selleckchem GSK1349572。采用盲肠结扎穿孔术进行SAKI造模,SAKI+LXA4组、假手术+LXA4组在术后30 min腹腔注射LXA4(40 ng/kg)。各组小鼠在造模术后24 h收集血清、尿液、肾组织。酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组小鼠血肌酐(Scr)、血尿素氮(Bun)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),尿液中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白(NGAL)及肾损伤分子1 (KIM-1);HE及PAS染色观察小鼠肾脏损伤情况;实时荧光定量PCR检测各组小鼠肾脏Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核因子-KB p65 (NF-κB p65) mRNA水平;免疫组化法、蛋白免疫印迹实验检测各组小鼠TLR4、MyD88、NF-KB p65、磷酸化NF-KB p65(p-NF-κB p65)的表达。结果 ELISA实验提示SAKI组Scr、Bun、IL-1β、IL-6、TW F-α、NGAL、KIM-1水平均高于SAKI+LXA4组(P <0.05),假手术组及假手术+LXA4组Scr、Bun、IL-1β、IL-6、TNF-α、NGAL、KIM-1无明显上升;HE及PAS染色提示SAKI组肾损伤程度明显高于SAKI+LXA4组(P <0.05),假手术组及假手术+LXA4组无明显肾损伤;实时荧光定量PCR提示SAKI组较SAKI+LXA4组TLR4、MyD88、NF-KB p65 mRNA升高(P<0.05),假手术组与假手术+LXA4组TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA均低于SAKI组及SAKI+LXA4组(P <0.05);免疫组化法、蛋白免疫印迹实验结果提示SAKI组较SAKI+LXA4组TLR4、MyD88、NF-κB p65、p-NF-κB p65表达升高(P<0.05),假手术组与假手术+LXA4组TLR4、MyD88、NF-κB p65、p-NF-κB p65表达均低于SAKI组及SAKI+LXA4组(P <0.05)。结论TLR4/MyD88/NF-KB通路在SAKI发生发展中Liproxstatin-1溶解度起重要作用,LXA4可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-KB信号通路减缓SAKI。

骨质疏松症(OP)是一种由于骨量降低、骨脆性增加而导致易发生骨折的疾病，可分为原发性和继发性两大类。原发性骨质疏松症是指没有明确的疾病或者药物影响，由于患者自身的代谢因素引起的骨质疏松症，被归属为“骨痿”“骨枯”“骨痹”的范围，根据发病的病因病机，可将其主要分为肝肾RepSox纯度阴虚、脾肾阳虚和气滞血瘀三种证型。Hedgetrophectoderm biopsyhog信号通路可直接调控成骨细胞和破骨细胞来维持两者功能的动态平衡，同时Hedgehog信号通路能抑制间充质干细胞成脂化，从而预防原发性骨质疏松症。本文总结了近几年来Hedgehog信号通路对骨质疏松影响的研究成果，并探讨了Shh和Ihh蛋白在原发性骨质疏松症患者血清中的表达，以期能够进一步完善Hedgehog信号通道AZD1152-HQPA与骨质疏松关系的研究，同时为临床上治疗骨质疏松提供更多依据。

目的：探讨农村地区老年高血压降压药使用效果及影响因素。方法：选择本地区2019年4月—2021年4月规律使用降压药物治疗老年高血压患者684例作为研究对象，根据降压药使用效果分为有效组及无效组，行单因素及多因素Lo获悉更多gistic回归明确影响因素。结果：684例老年高血压患者规范使用降压药后血压得到有效控制者为272例(39.77%)，以推荐药物及联合用药(双联、三联及以上genetic reversal)获有较高血压控制效果。经单因素及多因素Logiselleck产品stic回归分析显示，影响老年高血压患者降压药使用效果独立性风险因素为高血压分级(Ⅱ～Ⅲ级)、用药方案(单一)、饮酒(有)、吸烟(有)及务农劳动(无)。结论：本地区老年高血压患者降压药使用欠缺规范，血压控制效果有待提高，应侧重关注高血压分级高及用药方案单一患者，且强化日常行为，鼓励务农劳动有利于血压有效控制。