低温缺氧-复氧心肌成纤维细胞源性外泌体对心肌细胞损伤的机制研究

背景 低温缺氧-复氧大鼠心肌成纤维细胞对H9c2心肌细胞具有损伤作用,但其调控机制尚不明确。目的 观察低温缺氧-复氧大鼠心肌成纤维细胞(rat cardiac fibroblasts,RCF)分泌的外泌体对H9c2心肌细胞损伤及其缝隙链接蛋白43(Connexin 43,Cx43)的影响。方法 分别提取并鉴定常氧(95%空气+5%CO_2,37℃条件下培养5 h)和低温缺氧-复氧(95%N2+5%CO_2,4℃条件下培养1 h后,95%空气+5%CO_2,37℃条件下培养4 h)条件下RCF培养液中的外泌体,常氧和低温缺氧-复氧条件下提取的外泌体分别标记为N-exo和I/R-exo。采用随机数字表法将体外培养的大鼠H9c2心肌细胞分为三组:C组(常规条件下培养12 h);N组(与N-exo共孵育12 h);I/R组(此网站与I/R-exo共孵育12 h),共孵育结束后,收集心肌细胞,流式细胞术测定H9c2心肌细胞的凋亡率;Western blot测定心肌细胞Cx43和磷酸化Cx43(p-Cx43)的表达;划痕实验检测心肌细胞的迁移能力。结果 C组和N组心肌细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05),C组和N组心肌细胞凋亡率均低于I/R组(P<0.001);相较于C组,I/R组Cx43及磷酸化缝隙连接蛋白43(P-Cx43)表达下调、细胞迁移能力降低(P<0.01),N组Cx43及P-Cx43表达上调、细胞迁移能力升高Tissue biomagnification(P<0.01)。结论 低温缺氧-复氧心肌成纤维selleck MLN8237细胞释放的外泌体可增加心肌细胞的凋亡率,降低心肌细胞迁移能力,下调心肌细胞Cx43及P-Cx43的表达。