半抗原直接包被的四环素酶联免疫吸附分析法的建立

为建立更优的四环素（tetracycline,TC）酶联免疫吸附分析法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA），将TC与蛋白质偶联制备购买Z-VAD-FMK人工完全抗原免疫BALB/c小鼠，获得抗TC的单克隆抗体（monoclonal antibody,MAb）。采用酸性高锰酸钾羧化酶标板，将TC直接包被在酶标板上，并对ELISA反应体系条件进行优化，构建一种半抗原直接包被的TC ELISA检测方法。所制备的MAb特异性良好Medicine traditional，交叉反应率低。所构建的检测方法最低检测限Baf-A1分子式IC_(10)值为0.306 ng/mL，半数抑制率IC_(50)值为9.26 ng/mL，牛奶和水中加标回收率分别为96.46%～101.89%、96.84%～102.50%。与人工完全抗原包被的检测方法相比（IC_(10)值：0.624 ng/mL,IC_(50)值：28.24 ng/mL，牛奶和水中加标回收率分别为93.86%～105.12%、94.04%～105.56%），检测灵敏度有明显提高，并可用于实际样品中TC含量的检测，具备良好的应用前景。