双酶作用体系下呕吐毒素的高效降解

目的 挖掘呕吐毒素(deoxynivalenol, DON)降解酶,应用双酶体系实现呕吐毒素的高效降解。方法 利用生物信息学技术从国家生3-MA IC50物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information, NCBI)数据库筛选潜在DON降解酶AKR18A2,在大肠杆菌EscherichiacoliBL21(DE3)中进行重组和异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,经镍亲和层析纯化并鉴定AKR18A2的酶学性质,构建德沃斯氏菌(Devosiasp.)来源的DON降解酶QDDH和AKR18A2双酶作用体系,实现DON的高效降解。结果 来自鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas sp.)的呕吐毒素降解酶(AKR18A2)由343个氨基酸组成。该酶属于醛酮还原酶超家族,45℃和pH7.0为最适反应条件。AKR18A2可在24h内降解15.42%DON,而双酶(QDDH和AKR18A2)协同作用4h后对DON的降解率Pexidartinib作用可提高至98.02%。结论 本研究鉴定了一种新型DON降解酶AKR18Atethered membranes2,并首次创新建立双酶联用体系进一步实现DON的高效降解。