基于启动子甲基化探讨温胆汤通过多信号通路干预肥胖的作用机制研究(英文)

目的:通过筛选出启动子区甲基化变化可能影响到的目标基因,构建出温胆汤基于启动子甲基化的多信号通路网络,以此探讨温胆汤的可能作用机制。方法:采用Agena Mass Array系统检测肥胖大鼠腹腔脂肪组织Itgad、Col8a1、Adra2b、Jund、Rab2a、Wnt8b、Fzd9、B4galt7、Pik3cd、Creb1、Stard8和Mmp1基因启动子区各位点的甲基化程度;采用western Blot方法检测上述基因的蛋白表达情况;获得启动子区甲基化程度改变与蛋白表达一致的基因作为目标基因。通过生物信息学方法对目标基因进行信号通路的富集分GDC-0068半抑制浓度析,构建有关的多信号通路网络;另外,选择通路网络中的部分节点基因和末端效应基因进行RT-PCR分析,探讨温胆汤对多信号通路的可能影响。结果:获得启动子区甲基化程度改变与蛋白表达一致的基因4个,即Adra2b、Creb1、Itgad和Pik3cd,其中Adra2b、Creb1和Pik3cd基因表达上升,而Itgad基因表达下降。通过对信号通路的富集分析,纳入了Creb1和Pik3cd两个基因,并获得与肥胖有关的信号通路6个(TNF信号通路、AMPK信号通路、cAMP信号通路、PI3K/Akt信号通路等),从而构建了基于启动子甲基化的多信号通路网络;基于肥胖与慢性selleckchem BLZ945炎症的关系,选择了多信号通路网络中的部分通路节点基因AKT、mTORC1、UIk1和末端效应分子IL-1β、IL-6、CXCL2作为研究对象。温胆汤对这些基因的表达均有调整至正常表达的作用,其中对通路节点基因AKT、mTORC1的表达有下降作用,对Uchronic antibody-mediated rejectionIk1表达有上调作用,对末端效应分子IL-1β、IL-6、CXCL2均具有下调作用。结论:温胆汤对Creb1和Pik3cd等基因启动子甲基化的调控可能参与了多信号通路网络的调控,是其发挥干预肥胖的作用机制之一。温胆汤通过多通路基因调控减轻肥胖的作用机制复杂,信号通路基因启动子甲基化的改变在温胆汤作用机制中扮演何种角色还需要深入探讨。