将口蹄疫病毒（FMDV) VP1全长、VP1 B细胞表位（135～160、198～213aa）和T细LXH254 molecular weight胞表位（20Gefitinib-based PROTAC 3～40aa）组合为不同长度分别插入脑心肌炎病毒（EMCV），构建嵌合FMDV VP1重组EMCV。通过融合PCR及酶切的方法，将RNA biology外源片段插入EMCV L蛋白第5、6位aa之间，得到重组质粒pWSK-EMCV-FMDV VP1、pWSK-EMCV-FMDV VP1(TB）和pWSK-EMCV-FMDV VP1(2TB），将其转染至BSR T7/5细胞拯救重组病毒EMCV/RvBD_2W-VP1、EMCV/RvBD_2W-VP1 (TB）和EMCV/RvBD_2W-VP1 (2TB），并在BHK-21细胞传代分析重组病毒的生物学特性。结果显示，PCR扩增得到1 344 bp、909 bp和1 155 bp的外源基因融合片段，表明成功构建了3种重组质粒；3株重组病毒EMCV/RvBD_2W-VP1、EMCV/RvBD_2W-VP1 (TB）和EMCV/RvBD_2W-VP1 (2TB）在BHK-21细胞传至F5代，病毒滴度分别为1×10~(7.85)TCID_(50)/mL、1×10~(8.06)TCID_(50)/mL、1×10~(7.76)TCID_(50)/mL；通过RT-PCR、IFA等方法对F5代重组病毒进行鉴定，显示重组病毒EMCV/RvBD_2W-VP1 (TB）可以稳定遗传，且病毒复制水平与亲本病毒相一致，而其他2株重组病毒在传代过程中缺失。结果表明，本研究构建了3个重组EMCV质粒，转染细胞后携带FMDV VP1抗原表位的重组病毒稳定遗传，为后续以EMCV为骨架构建活载体疫苗奠定了理论基础。