目的:结合实际生产以及现所存在问题,优选出最佳桑黄饮片生产工艺,为桑黄饮片生产工艺提供依据,提高产率,降低生产成本,为桑黄饮片提供质量保障。从桑黄多糖的提取方法、粗多糖的纯化分离、均一多糖的理化性质、结构表征方面来研究桑黄多糖类成分,初步探究桑黄多糖抗炎活性,为桑黄多糖活性成分及桑黄药用资源综合开发利用提供理论基础。方法:1.采用单Infected aneurysm因素实验设计法,以润制温度、润制时间为考察因素,以桑黄饮片多糖、总酚、麦角甾醇以及饮片颜色为评价指标,通过综合评分法,优选桑黄饮片最佳生产工艺。2.采用水提醇沉-除蛋白-冷冻干燥得到的瓦尼桑黄粗多糖(SHP),依次经DEAE-52纤维素离子交换、葡聚糖凝胶Sephadex G-100柱色谱进行分离纯化,得到均一多糖。凝胶色谱-示差-多角度激光光散射(GPC-RI-MALS)测定其绝对分子量;离子色谱(IC)测定其单糖组成;甲基化分析、核Cobimetinib分子量磁共振波谱、红外光谱(FT-IR)、扫描电子显微镜(SEM)对桑黄均一多糖结构进行分析。3.采用CCK-8法检测桑黄均一多糖对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞活力影响;利用ELISA试剂盒测定桑黄均一多糖对LPS诱导的RAW264.7细胞一氧化氮(NO)及炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)释放量的影响。结果:1.桑黄饮片最佳生产工艺:原药材,除去杂质,洗净,40℃润软,切厚片,40℃干燥,筛去碎屑。2.经水提醇沉-除蛋白-冷冻干燥后得到桑黄粗多糖(SHP)9.538 g,采用DEAE-52纤维素离子交换柱分离纯化得到SHP-W、SHP-1及SHP-2三个多糖组分。进一步采用葡聚糖凝胶层析Sephadex G-100柱纯化得到SHP-W-1、SHP-1-1及SHP-2-1三个均一多糖组分。通过凝胶色谱-示差-多角度激光光散射(GPC-RI-MALS)、单糖组成、甲基化分析、红外光谱(FT-IR)、核磁共振波谱(NMR)及扫描电子显微镜(SEM)对SHP-W-1、SHP-1-1及SHP-2-1结构进行初步分析。SHP-W-1的重均分子量(Mw)、数均分子量(Mn)和均分子量(Mz)分别为16.075 k Da、15.506 k Da和16.478 k Da,多分散系数(Mw/Mn)为1.037,SHP-W-1由岩藻糖、阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和核糖组成,Swww.selleck.cn/products/SB-431542HP-W-1有17种糖苷键。SHP-1-1的重均分子量(Mw)、数均分子量(Mn)和均分子量(Mz)分别为333.599 k Da、43.427k Da和3516.544 k Da,多分散系数(Mw/Mn)为7.682;SHP-1-1由岩藻糖、阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、甘露糖醛酸组成;SHP-1-1有25种糖苷键。SHP-2-1的重均分子量(Mw)、数均分子量(Mn)和均分子量(Mz)分别为563.032 k Da、59.641 k Da和4205.062 k Da,多分散性(Mw/Mn)为9.44;SHP-2-1由岩藻糖、阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、甘露糖醛酸组成;SHP-2-1有23种糖苷键。SHP-W-1、SHP-1-1和SHP-2-1都是一种球形分子。3.CCK-8法检测结果显示SHP-W-1在10～150μg/m L范围内呈现剂量依赖性,SHP-1-1和SHP-2-1在10～100μg/m L范围内呈现剂量依赖性。随着浓度的增加,对细胞增殖活性的作用越明显,三种多糖均能降低LPS诱导RAW264.7巨噬细胞中NO的含量,抑制TNF-α、IL-6及IL-1β的分泌,表明表现出良好的抗炎活性。结论:本研究考察了桑黄饮片产业化生产最佳工艺,并通过水提醇沉、除蛋白透析等方法得到了桑黄粗多糖;在此基础上对粗多糖进行了进一步分离纯化和结构表征,初步探究其体外抗炎活性。本研究为桑黄多糖活性成分及桑黄药用资源综合开发利用提供理论基础。