目的 富集水牛角Bubali Cornu中含巯基肽类成分(thiols-rich peptide fractions,SHPF)并探讨其抗氧化、抗炎活性。方法 通过巯基亲和树脂Thiopropyl Sepharose 6B从水牛角提取Proteomics Tools液中富集得到SHPF，并采用Ellman法测定游离巯基(-SH)含量；应用单因素实验法优选富集工艺；基于Nano LC-MS/MS技术鉴定SHPF。体外通过H2O2诱导小鼠脑微血管内皮细胞bEnd3氧化损伤，采用细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒检测SHPF抗氧化活性；通过脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症损伤，E7080纯度采用实时荧光定量PCR法测定炎症因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的分泌。结果 优化SHPF富集工艺为上样量10μmol游离-SH、吸附时间1 h、洗脱剂为含β-巯基乙醇(β-mercaptoethanol,β-Me)洗脱剂。从水牛角富集液中共鉴定到704条肽段，其中154条含半胱氨酸(cysteine,Cys)肽段，占总肽段的21.9%，主要来源于角蛋白和角蛋白相关蛋白。体外细胞实验结果表明，SHPF能够提高氧化损伤bEnd3细胞的存活率，同时降低其LDH的泄露，并减少炎症损伤RAW264.7细胞炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的分泌。结论 C59分子量采用优选富集工艺能明显提高SHPF的富集效率，SHPF具有良好抗氧化和抗炎活性，为水牛角“清热解毒”功效物质基础的研究提供了研究思路和方向。