目的:本实验旨在研究猫棒束孢菌丝粉(Isaria felina mycelium powder,IFMP)对2型糖尿STING抑制剂病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)肾损害的改善作用,并从抗氧化应激和改善胰岛素抵抗的角度探讨其可能的作用机制。方法:第一部分:将70只昆明小鼠随机分为正常对照组(10只),2型糖尿病造模组(60只)。正常对照组小鼠饲喂普通饲料,造模组小鼠饲喂高脂高糖饲料。4 w后2型糖尿病造模小鼠腹腔注射链脲佐菌素140 mg·kg~(-1)(STZ溶于0.1 mol·L~(-1),pH=4.2-4.5的柠檬酸/柠檬酸钠缓冲液中),正常组小鼠(NC)注射柠檬酸/柠檬酸钠缓冲液,2 w后选取空腹血糖值(FBG)≥11.1 mol·L~(-1)的小鼠将其随机分为4组,分别为2型MK-4827细胞培养糖尿病模型对照组(MC),二甲双胍阳性对照组(MET,250mg·kg~(-1))、猫棒束孢低剂量组(IFMP-L,200 mg·kg~(-1))、猫棒束孢高剂量组(IFMP-H,400 mg·kg~(-1)),每组各8只,连续灌胃6 w,每周监测小鼠进食量、饮水量、体重及空腹血糖值。摘眼球取血,分离血清,用全自动血生化分析仪检测血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)和血尿酸(UA)水平;解剖小鼠,分离肝肾组织,计算脏器系数,生化试剂盒检测小鼠肾脏超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平;HE染色观察各组小鼠的肾脏组织形态学改变,马松染色观察肾脏纤维化程度;采用酶联免疫吸附法(Elisa)检测血清游离脂肪酸(FFA)、血清胰岛素(INS)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量、肾脏nephrin和CD2AP蛋白水平;免疫组织化学染色法检测肾脏IRS-1/PI3K/Akt/Bad信号通路分子蛋白水平。第二部分:培养Hep G2细胞,采用MTT法测定不同浓度IFMP和胰岛素对Hep G2细胞增殖的影响,用含10~(-8)mol·L~(-1)胰岛素的高糖DMEM培养基诱导Hep G2细胞48 h,建立Hep G2细胞胰岛素抵抗模型。用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖消耗量,用生化试剂盒测定MDA和SOD的含量;用Elisa试剂盒测定IRS-1、PI3K和Akt的含量。结果:第一部分:与NC组相比,MC组的小鼠出现了明显的多饮多食多尿症状,体重显著降低(P<0.01),FBG、肝脏系数和肾脏系数显著升高(P<0.01);血清中的TC、TG、FFA、BUN、Scr、TNF-α和INS含量显著升高(P<0.01),肾脏组织SOD活力显著降低(P<0.01),MDA含量显著升高(P<0.01),CD2AP和nephrin的含量显著降低(P<0.01)。HE染色可见肾脏多处坏死,大量炎性细胞聚集;马松染色可见肾组织胶原纤维沉积增加,肾纤维化严重。IRS-1、PI3K、Akt和p-Akt蛋白表达均显著降低(P<0.01),Bad蛋白表达显著上升(P<0.01)。与MC组相比,各给药组的多饮多食多尿症状有不同程度的缓解,小鼠体重呈增加趋势。MET组和IFMP-H组小鼠的FBG在给药第5 w时均显著降低(P<0.05)。MET组和IFMP-H组的TC、TG、FFA含量均显著降低(P<0.01),IFMP-L组的TC、FFA含量均显著降低(P<0.01);IFMP-L组和IFMP-H组BUN、Scr均显著降低(P<0.01);MET组、IFMP-L组和IFMP-H组的INS含量和HOMA-IR均显著降低(P<0.01);MET组和IFMP-H组TNF-α的含量显著降低(P<0.01,P<0.05)。肾脏组织中,MET组和IFMP-H组MDA的含量显著降低(P<0.05,P<0.01),CD2AP和nephrin的含量均显著升高(P<0.01),IFMP-L组MDA的含量显著降低(P<0.05)。HE染色可见给药后肾脏坏死区域减少,炎性细胞浸润减轻;马松染色可见胶原纤维沉积变少,肾纤维化程度有所缓解。IFMP组的IRS-1蛋白表达水平显著升高(P<0.01),MET组和IFMP-H组的PI3K、Akt和p-Akt蛋白表达均显著升高(P<0.01),MET组和IFMP-H组的Bad蛋白表达显著降低(P<0.01)。第二部分:培养Hep G2细胞,IFMP在浓度为5μg·m L~(-1)和10μg·m L~(-1)时对细胞生长无显著促进作用,选用胰岛素浓度为10~(-8)mol·L~(-1),培养48 h建立胰岛素抵抗模型。与正常组比较,模型组Hep G2细胞葡萄糖消耗量显著下降(P<0.01),SOD含量显著下降(P<0.01),MDA含量显著上升(P<0.01),IRS-1、PI3K、Akt的含量显著下降(P<0.05)。经IFMP处理后的葡萄糖消耗量量显著上升(P<0.01),SOD含量显著提高(P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.01),IRS-1、PI3K、Akt的含量显著升高(P<0.01、P<0.05、P<0.01)。结论:1、IFMP能够显著改善T2DM小鼠的糖脂代谢和氧化应激反应,缓解肾脏损害,保护肾脏结构,抑制足细胞的凋亡,其可能是通过IRBar code medication administrationS-1/PI3K/Akt/Bad通路发挥作用。2、IFMP能改善胰岛素抵抗Hep G2细胞模型的糖代谢和氧化应激水平,并通过调控IRS-1/PI3K/Akt信号通路起到改善胰岛素抵抗的作用。