破骨细胞对休眠肺腺癌细胞的激活作用及其分子机制探讨

目的:探讨破骨细胞对休眠肺腺癌(lung adenocarcinomanative immune response, LUAD)细胞H1975的激活作用及其潜在的分子机制。方法:用血清剥夺的方式建立肺腺癌细胞的休眠模型，检测休眠肺腺癌细胞的增殖与凋亡，以及衰老(β-半乳糖苷酶)和休眠相关标志物的蛋白表达；分离培养人外周血单个核细胞，用M-CSF和h-RANKL因子诱导人外周血单个核细胞分化为成熟的破骨细胞，TARP染色鉴定破骨细胞，收集破骨细胞的培养上清；破骨细胞培养上清与休眠肺腺癌细胞共培养，流式细胞术检测肺腺癌细胞周期、增殖情况，Transwell小室检测细胞迁移能力，Western blot检测休眠相关以及AMPK信号通路相关蛋白的BMN 673 IC50表达。结果:体外血清剥夺可以诱导肺腺癌细胞系H1975进入休眠状态，其细胞周期停滞在G_0-G_1期，增殖停滞，休眠相关标志物Nanog、NR2F1、p27、p21表达上调；建立体外人外周血单个核细胞诱导分化的破骨细胞培养体系；破骨细胞的培养上清具有促进休眠肺腺癌细胞周期恢复、细胞增殖以及细胞迁移的作用；GSK1349572核磁同时，休眠相关蛋白表达的下调，其作用与AMPK信号通路的AMPK去磷酸化和mTOR磷酸化有关。结论:破骨细胞具有促进休眠肺腺癌细胞激活的作用，其分子机制与AMPK信号通路有关。