研究目的表观遗传调控通过构建基因特异性染色质状态,介导基因特异性表达调控,参与决定细胞特异性功能状态。PRDM家族成员含有一个保守的PR结构域,以及重复数量不等的C2H2锌指蛋白结构域(PRDM11除外)。PRDM2因具有组蛋白甲基转移酶活性的PR结构域,参与调控组蛋白H3的N端第9位赖氨酸(H3K9)的甲基化。PRDM2在肿瘤中的调控作用研究较多,但在天然免疫中的作用还不清楚。本文旨在探讨PRDM2对IL-1β分泌的调控作用,并初步揭示PRDM2发挥作用的表观调控机制。研究方法引进并成功繁育巨噬细此网站胞特异性敲除PRDM2的小鼠,构建脓毒症CLP和腹腔注射LPS模型,检测小鼠血清炎性细胞因子分泌、统计小鼠临床评分、观测小鼠生存率变化、进行小鼠肺切片HE染色。收取小鼠腹腔巨噬细胞,LPS刺激后ELISA检测D-Lin-MC3-DMA采购上清中炎性细胞因子浓度,q PCR检测其转录,并进行统计学分析。WB检测信号通路关键分子表达变化。通过转录组测序构建了LPS刺激的PRDM2缺失和对照巨噬细胞的基因表达谱。分析信号通路富集结果,对差异表达基因进行进一步筛选。利用ROS的荧光探针检测巨噬细胞中总ROS的水平。在RAW264.7巨噬细胞系中干扰PRDM2或者敲除PRDM2的表达,使用q PCR及ELISA对炎性细胞因子转录及表达进行检测。在RAW264.7细胞的Prdm2基Autoimmune vasculopathy因C端插入3x Myc标签序列,通过Cut-tag技术检测PRDM2在全基因范围内的结合区域,分析结合峰信号强度及结合的基因表达调控区域。实验结果1.在小鼠腹腔巨噬细胞中干扰PRDM2的表达后,PRDM2敲减能够显著抑制促炎细胞因子IL-1β的m RNA水平。2.腹腔巨噬细胞特异性缺失PRDM2能够显著缓解小鼠全身性炎症反应和肺组织损伤,降低血清中炎性细胞因子的水平和模型小鼠的死亡率。3.PRDM2通过抑制Nrros的转录,增加ROS的产生来促进巨噬细胞的促炎功能。4.敲除PRDM2能够显著抑制巨噬细胞中LPS刺激诱导的HIF-1α的蛋白水平,但不影响HIF-1α的m RNA水平。5.PRDM2能够通过抑制Nrros的表达,促进ROS的产生从而促进LPS诱导的HIF-1α蛋白水平的增加,上调IL-1β表达。实验结论本研究初步阐明了表观调控分子PRDM2的促炎作用,其能够通过H3K9me1选择性抑制Nrros的转录水平,增加炎症诱导的ROS-HIF-1α轴的活化水平,从而促进感染诱导的促炎细胞因子IL-1β的表达。该研究初步揭示了天然免疫精确平衡调控的新机制,可能为临床治疗炎症相关疾病提供了新的靶点。