目的:初步探索TLR9通路在缺氧诱导TAMs浸润和肝癌进展中的作用,研究结果将为深入探究肝癌微环境中缺氧与TAMs相互作用的分子机制提供新的见解。方法:通过Western blot、qRT-PCR、IHC和公共数据库等分析缺氧标志分子HIF-1α和M2型TAMs标志物CD163在肝癌组织样本中的表达及其相关性,并分析其与肝癌患者预后的关系。构建原位肝癌小鼠模型,采用HE、qRT-PCR、IHC等实验分析小鼠组织中缺氧对TAMs浸润和肝癌进展的影响。采用Western blot、IF、FCM等实验方法分析肝癌细胞缺氧对TAMs M2型极化和募集Against medical advice的影响。通过Western blot、FCM等实验探讨缺氧通过TLR9通路诱导TAMs M2型极化的作用机制。结果:1、Western blot、qRT-PCR、IHC等实验结果发现肝癌患者肿瘤组织中HIF-1α和M2型TAMAdavosertibs在HCC组织中浸润显著增加。公共数据库分析发现,在肝癌组织中HIF-1α与CD163的表达呈显著正相关,并与肝癌患者预后较差相关;2、构建原位肝癌小鼠模型结果表明,缺氧促进TAMs浸润和肝癌进展。3、qRT-PCR、Western blot、IF和FCM实验结果发现肝癌细胞缺氧促使TAMs向M2型极化,同时采用迁移实验证实了肝癌细胞缺氧促进TAMs募集;4、Weste点击此处rn blot实验结果发现肝癌细胞缺氧条件培养基孵育巨噬细胞后,明显增加了TLR9及其下游相关分子的磷酸化水平;使用TLR9干涉片段或拮抗剂(ODN INH-18)能够显著抑制缺氧条件培养基介导的TAMs M2型极化。结论:缺氧通过激活TLR9通路促进TAMs的浸润和肝癌进展。