联合敲减eIF4E和YB1基因对人宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响

目的 探究在宫颈癌HeLa和C33a细胞中联合敲减YB1和eIF4E基因对细胞增殖、侵袭和迁移行为的影响。方法 将细胞分组并转染(HeLa细胞系:mock空白对照组、NC组(sh-YB1组、Si-eIF4E组、共敲减shYB1+Si-eIF4E组;C33a细胞系:mock空白对照组EPZ-6438配制、NC组、shYB1组、Si-eIF4E组、shYB1+Si-eIF4E组),24 h后RT-qPCR检测转染效率,48 h后western blot检测蛋白表达情况,CCK-8法和平板细胞克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell法测细胞Antibiotic-siderophore complex侵袭迁移能力。结果 敲减YB1和eIF4E基因后mRNA和蛋白表达量明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞增殖实验结果表明,sh-YB1组、Si-eIF4E组及共敲减YB1+eIF4E组与mock组及NC组之间细胞吸光度差异有统计学意义(P<0.05)。敲减YB1和(或)eIF4E基因后,细胞吸光度下降明显(P<0.05),且sh-YB1+Si-eIF4E组吸光度较sh-YB1或Si-eIF4E均减小,差异有统计学意义(P<0.05)点击此处。平板细胞克隆形成实验表明,sh-YB1组、Si-eIF4E及共敲减YB1+eIF4E组克隆形成数量明显低于mock组及NC组(P<0.05)。HeLa细胞系、C33a细胞系中与mock组相比,sh-YB1组及Si-eIF4E组和共敲减YB1+eIF4E组平板细胞克隆形成率显著降低(P<0.05)。Transwell实验结果表明,sh-YB1组、Si-eIF4E组和共敲减YB1+eIF4E组相比于mock组及NC组之间穿过小室的细胞明显减少(P<0.05),且共敲减YB1+eIF4E组、sh-YB1组/Si-eIF4E组、mock组、NC组穿过小室的细胞数目依次增加,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 联合敲减YB1和eIF4E基因对宫颈癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力有抑制作用。