研究目的:急性肾损伤(AKI)是常见且危重的临床急症,缺血再灌注损伤(IRI)是AKI的常见病因之一,有大约半数以上患者会逐渐进展至慢性肾脏病(CKD)。随着该病发病率与死亡率的上升,找到该病的有效治疗药物已迫在眉睫。研究发现肾脏病患者的氧化应激增强、肠道菌群失调。肾衰泄浊汤已投入临床使用多年,前期研究已经证实肾衰泄浊汤可cancer epigenetics显著改善CKD患者肾功能、抑制氧化应激和改善肠道菌群结构。本课题组从氧化应激和肠道菌群入手,进一步探讨肾衰泄浊汤对AKI大鼠肾功能、肾组织和肠道组织病理、氧化应激、肠道菌群以及肾损伤相关蛋白的通路调控机制,为肾衰泄浊汤科学防治AKI提供实验依据。方法:选取24只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,肾衰泄浊汤低、中、高剂量组及大黄素组。除假手术组外,其余各组均采用微动脉夹夹闭双侧肾蒂45min以建立大鼠急性肾缺血再灌注模型。模型组和假手术组用生理盐水灌胃,其余组均分别用相应剂量灌胃给药15d。ELISA检测各组大鼠尿液中24h尿蛋白总量、血肌酐(Cre)和尿素氮(BUN)水平;PCR检测肾衰泄浊汤中剂量组粪便中大肠杆菌、脆弱拟杆菌和粪肠球菌分布;HE染色检测肾组织和小肠组织病理损伤情况;免疫组化法检测肾脏组织中巨噬细胞抑制凋亡蛋白(AIM)、肾损伤分子-1(KIM-1)表达;ELISA检测尿液中KIM-1、血清D-乳酸水平和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)含量;Western blot检测肾组织内AIM、KIM-1、磷酸化氨基末端蛋白激酶(p-JNK)、丝裂原活化蛋白激酶(p-p38)蛋白的表达水平。结果:1.各组大鼠肾功能结果:与假手术组相比模型组和大黄素组中BUN、Cre和尿蛋白含量均显著升高(P<0.05);与模型组相比,肾衰泄浊汤低剂量组CVP-16体外re和1d与14d的尿蛋白含量显著降低(P<0.05),肾衰泄浊汤组中高剂量组BUN、Cre和尿蛋白含量显著降低(P<0.05),大黄素组在1d和7d的尿蛋白含量显著降低(P<0.05),大黄素组的BUN、Cre和14d的尿蛋白无显著差异。2.各组大鼠肾组织病理学损伤结果:模型组肾小管排列松散,组织水肿,肾小球结构损伤;肾衰泄浊汤组高剂量和大黄素组肾小管排列紧密,肾小球结构较好,水肿减轻。3.各组大鼠肾小管损伤相关蛋白结果:ELISA检测发现,与假手术组相比,模型组尿NGAL含量在7d和14d显著升高(P<0.05),KIM-1含量在1d、7d和14d均显著升高(P<0.05);与模型组相比,给药组尿NGAL和KIM-1含量下降,其中肾衰泄浊汤中剂量组最为显著(P<0.05)。WB检测发现与假手术组相比,模型组肾组织中AIM和KIM-1蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组相比,肾衰泄浊汤中高剂量组和大黄素组AIM和KIM-1蛋白的表达均显著降低(P<0.05)。免疫组化检测发现,与假手术组相比,模型组中AIM和KIM-1表达升高;与模型组相比,给药组AIM和KIM-1表达降低,其中,肾衰泄浊汤高剂量组和大黄素组中,AIM和KIM-1蛋白表达最少。4.各组大鼠肠道组织病理学损伤结果:模型组肠腺结构损伤、小肠肌层、环状肌组织水肿;肾衰泄浊汤低、中、高剂量组肠腺排列整齐,环状肌组织水肿减轻;大黄素组肠腺排列整齐。5.肾衰泄浊汤中剂量组大鼠肠道菌群结构、肠粘膜通透性结果:PCR检测发现,与第1d相比,肾衰泄浊汤中剂量组在第14d的有害菌大肠杆菌菌落显著减少(P<0.05);与第1d相比,有益菌脆弱拟杆菌和粪肠杆菌菌落在第14d显著增多(P<0.05)。ELISA检测发现,与假手术组相比,模型组血清D-乳酸含量显著升高(P<0.05);与模型组相比,肾衰泄浊汤低中高剂量组和大黄素组血清D-乳酸含量均显著降低(P<0.05)。6.Western Blot法测定肾组织p-p38、p-JNK蛋白表达结果:与假手术组相比,模型组中的p-p38和p-JNK蛋白均显著上调(P<0.05);与模型组相比,肾衰泄浊汤低中高剂量组和大黄素组的p-p38和p-JNK蛋白均显著下调(P<0.05),其中肾衰泄浊汤中剂量组和大黄素组对下调p-p38蛋白效果较好,肾衰泄selleck合成浊汤中高剂量组对下调p-JNK蛋白效果较好。结论:1.肾衰泄浊汤可改善AKI大鼠的肾功能。2.肾衰泄浊汤可改善AKI大鼠肾脏病理损伤。3.肾衰泄浊汤可通过下调NGAL、AIM和KIM-1蛋白以缓解AKI。4.肾衰泄浊汤改善AKI大鼠的肠道病理损伤。5.肾衰泄浊汤改善AKI大鼠肠道菌群结构,降低肠黏膜通透性。6.肾衰泄浊汤可调节p-p38、p-JNK蛋白的表达,抑制氧化应激。