目的:总结胡镜清研究员以热结血脉理论为指导治疗冠心病心绞痛用药规律及核心处方;应用网络药理学探寻核心处方–金玄安脉方的潜在作用机制;动物实验验证金玄安脉方作用靶点与机制,探索有效的用药剂量。方法:1.基于数据挖掘技术总结胡镜清研究员治疗冠心病心绞痛用药规律。收集2018年至2023年就诊于胡镜清研究员门诊患者,符合冠心病心绞痛诊断,纳入医案通过古今医案云平台进行统计分析,通过药物频次、用药属性、关联分析、聚类分析、复杂网络分析等功能总结胡镜清研究员以热结血脉理论为指导治疗冠心病心绞痛用药规律及核心处方。2.基于网络药理学探讨核心处方-金玄安脉方对冠心病作用的潜在机制。JXAM八味中药成分以OB>30%、DL>0.18筛选活性化合物,利用分子靶标预测模型数据库支持向量>0.8和随机森林算法>0.7,应用Cytoscape软件构建药物成分-靶点网络,Genecards和OMIM数据库筛选冠心病靶点,将药物-疾病靶点网络拓扑分析,大于2倍Degree值为条件,得到核心网络靶点,DAVID数据库对核心网络靶点进行GO和KEGG富集分析。3.基于炎症及肠道菌群探讨金玄安脉方对肌缺血再灌注(Ischemia/reperfusion,I/R)大鼠调节作用。以I/R大鼠为模型,72只随机分为对照组12只与手术组60只,造模后随机分为I/R组,金玄安脉方低、中、高剂量组(JXAM-L/M/H),阳性药组(Positive),给药4周后取材检测。HE染色心肌、结肠组织,鲎试剂检测血清LPS,ELISA法检测炎症因子,Western-Blot检测蛋白表达,16s r DNA高通量测序肠道菌群,采用斯皮尔曼相关性进行炎症指标与菌群关联分析。结果:1.本研究共纳入216首处方,其中男性患者较多,男性占比69.91%,女性占比30.09%,老年患者较多,60岁及以上占比63.43%。高频应用中药前十位有金银花(69.44%)、丹参(67.59%寻找更多)、当归(59.72%)、甘草(48.61%)、玄参(47.69%)、桂枝(43.06%)、连翘(40.74%)、黄连(33.80%)、虎杖(32.87%)、茯苓(32.41%);四气以温、微寒多见,五味以甘、辛、苦为主,归经以肺、心、胃为主,用药功效以清热解毒为主;关联分析发现金银花、丹参、当归、玄参、甘草有较强内在联系;聚类分析可分为7类,第1类金银花、丹参,第2类连翘、虎杖、甘草、当归、玄参,第3类黄连、葛根,第4类法半夏、砂仁、檀香、枳壳、薤白、瓜蒌,第5类茯苓、白术、黄芪,第6类桂枝,第7类地黄、麦冬、五味子、党参、山茱萸、柴胡、桃仁、红花;复杂网络分析得到核心处方,以四妙勇安汤为基础加之连翘、虎杖、丹参、桂枝。2.数据库收集到金玄安脉方8味中药214种化合物和相应的3345靶点,复方药物中共有成分为S63845体内实验剂量β-谷甾醇、谷甾醇、槲皮素、山奈酚、木犀草素、豆甾醇、柳杉酚、丁子香萜、(+)-儿茶素,冠心病有3529靶点,利用Cytoscape软件绘制PPI网络,其中有交集为201个靶点,交集网络大于2倍Degree值为条件获得核心靶点,获取36个核心靶点,主要为白介素家族,MMP9,MMP2,MAPK3,MAPK8,NFKBIA,NOS3、PTGS2、MCP-1、ICAM1,AKT1、TP53、MYC、CCND1、VEGF、EGFR、EGF、ESR1等靶点;在生物学过程,主要有脂多糖反应、炎症反应等;KEGG富集通路主要有癌症途径、流体剪切应力与动脉粥样硬化、NF-κB信号通路等。3.心肌HE染色显示I/R组心肌纤维破坏,并且有炎性细胞浸润,心肌损明显,模型制备成功,JXAM-M组、JXAM-H组对心肌改善显著,JXAM-H组与Positive组改善程度相近;结肠HE染色显示I/R组黏膜破损、绒毛结构改变、炎性细胞浸润,JXAM-M组、JXAM-H组、Positive组改善较明显。测定血清LPS,组织匀浆TNF-α,IL-6,IL-1β,IL-17A,在I/R组表达明显升高,IL-17A表达仅在JXAM-H组具有统计学差异,其他检测指标在JXAM-M组、JXAM-H组、Positive组均显著下降。金玄安脉方抑制TRNA Immunoprecipitation (RIP)LR4/NF-κB通路呈现药物依赖趋势,药物剂量越高对炎性蛋白表达抑制越明显,JXAM中、高剂量组抑制作用更显著。16s r DNA高通量测序检测,I/R组物种多样性和均一性更高;与I/R组相比,除JXAM-L组略升高,其他三组下降趋近Control组。在物种门水平与属水平均有不同程度改变。根据差异菌群与炎症因子的相关性分析显示,在JXAM-M组和JXAM-H组中富集Bacilli,Lactobacillaceae,Lactobacillales,Lactobacillus,Actinobacteria与血清LPS呈负相关,在I/R组中富集Prevotellaceae＿Ga6A1＿group,s＿uncultured＿bacterium＿g＿Prevotellaceae＿Ga6A1＿group与LPS、TLR4、IL-1β呈正相关;JXAM-M组中富集Actinobacteria与TNF-α呈负相关,在JXAM-L组富集g＿Alloprevotella,s＿uncultured＿bacterium＿g＿Alloprevotella与TNF-α、IL-6呈正相关。结论:1.胡镜清研究员以热结血脉理论为指导治疗冠心病心绞痛用药规律,高频应用中药有27味,四气以温、微寒、平为主,五味以甘、辛、苦为主,归经以肺、心、胃为主,基于复杂网络分析得到核心处方,以四妙勇安汤为基础加之连翘、虎杖清热泻火,丹参、桂枝活血通脉,全方体现了清血脉之热,通心脉之瘀的治疗核心。2.金玄安脉方多种药物成分可能发挥治疗冠心病的作用,如β-谷甾醇、槲皮素、山奈酚、木犀草素、柳杉酚等活性成分,可通过白介素、MMPs、MAPK、NFKBIA、NOS3、MCP-1、ICAM-1等靶点,影响LPS反应和NF-κB等炎症信号通路。3.金玄安脉方保护心肌,维持肠道黏膜屏障,降低肠道通透性,抑制TLR4/NF-κB信号通路,减少肠道炎性表达,降低LPS和TNF-α,IL-6,IL-1β,IL-17A炎性因子水平,可能减少细菌和炎性因子进一步入血影响心脏,并且调节肠道菌群,可能通过调控Prevotellaceae＿Ga6A1＿group、Actinobacteria、Alloprevotella等炎性相关菌群减少炎症反应。金玄安脉方中、高剂量组作用更显著。