背景:卵巢癌(ovarian cancer,OC)是全球第三大常见的妇科恶性肿瘤,其中上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)是最常见的类型,约占卵巢癌的80%。截止目前,全球约有31万余EOC确诊病例,死于EOC的患者超过20万。在我国,EOC的发病率在过去10年间增长了30%。目前通过手术、放化疗等医疗手段在早期EOC的治疗上取得了一定进展,但对于晚期EOC,因其存在易复发、转移和严重耐药等问题导致晚期EOC患者的5年生存率仅为20%~30%。因此,通过对上皮性卵巢癌FIGO分期、病理分级、肿瘤微环境等影响EOC患者预后的因素进行全面探讨,从而寻找EOC的预后标志物及潜在的治疗靶点对于改善EOC患者的生存率是非常有必要的。驱动蛋白家族(Kinesin Family,KIF)成员基因是近些年肿瘤基因治疗研究的热点。驱动蛋白家族成员26B(KIF26B)是Kinesin-11家族成员,它具有多向分化的潜能,即间充质特性。其位于染色体上1q44,由2108个氨基酸编码组成,分子量大小约223.8k Da。既往研究中已证实KIF26B与乳腺癌、喉腺癌和非小细胞肺癌等肿瘤的增殖、复发、转移、耐药及预后不良有关。但目前关于KIF26B在EOC中的研究国内外均尚未见相关报道。目的:(1)明确KIF26B在EOC组织中的表达水平,并探讨其表达差异与EOC临床病理特征及预后的关系。(2)探讨KIF26B的表达情况与EOC肿瘤微环境免疫细胞浸润及预后的关系,旨在为改善晚期EOC患者的预后和靶向治疗提供新的思路。方法:第一部分:从TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据库中下载并整理得到EOC转录组样本数据315例。将315例EOC转录组样本以KIF26B表达中位数作为临界值将样本分为KIF26B高表达组(n=1IACS-010759价格58)和低表达组(n=157)进行研究。(1selleck Regorafenib)利用公共数据库研究KIF26B在EOC中的表达情况并结合临床资料分析其临床意义。卡方检验分析KIF26B表达水平与EOC临床病理特征(年龄、FIGO分期、病理分级)的关系。(2)运用Kaplan-Meier plotter绘制生存分析曲线,分析KIF26B表达水平与EOC患者预后的关系。单因素和多因素COX比例风险回归模型分析并确定影响EOC预后的独立危险因子。(3)京都基因与基因组百科全书(KEGG)、基因本体论(GO)、基因集富集分析(GSEA)探索KIF26B在EOC发生发展中潜在的信号机制。(4)利用反卷积算法(CIBERSORT)分析KIF26B基因表达水平与EOC肿瘤微环境免疫细胞浸润并通过K-M分析免疫细胞含量与EOC预后的关系。第二部分:回顾性收集我院病理科2017年3月~2018年2月间上皮性卵巢肿瘤手术切除标本的存档蜡块65例(上皮性卵巢癌50例,良性上皮性肿瘤15例)和15例来源于因其它疾病而切除的正常卵巢组织存档蜡块,经病理证实无异常。50例上皮性卵巢癌包含浆液性卵巢癌20例,黏液性卵巢癌17例,子宫内膜样癌8例,其它上皮性卵巢癌5例。此外还包括肿瘤患者的临床病例资料,纳入样本所有EOC患者术前均未接受过化疗、放疗、激素及免疫治疗。术中及术后严格按照诊疗规范进行操作,FIGO分期III,IV期EOC实施满意的卵巢癌细胞减灭术,所有需要化疗的患者术后根据诊疗规范统一使用铂类及紫杉醇类药物进行了正规化疗。将接受靶向治疗及合并严重内外科疾病患者纳入了排除标准。随访时间截止到2023年3月。(1)通过免疫组化染色测定KIF26B在不同卵巢组织中的表达差异。(2)根据临床病历资料及随访资料分析KIF26B与临床病理特征(年龄、FIGO分期、病理分级)的关系。预后分析使用Kaplan-Meier法,log-rank法检验比较差异性。使用SPSS22.0及Graphpad Prism8.0.2软件统计分析。结果:第一部分(1)GEPIA数据库分析发现KIF26B在多数恶性肿瘤和与其对应的正常组织中表达具有差异(P<0.05)。GEPIA和HPA数据库分析发现KIF26B在EOC中的表达量高于正常卵巢组织(P<0.05)。(2)临床病理特征分析发现KIF26B表达与ECO患者的FIGO分期(χ~2=9.562,P<0.05)有关而与EOC患者年龄(χ~2=1,P=0.910)、病理分级(χ~2=0.14,P=0.890)无关。其中与上皮性卵巢癌FIGO分期Ⅱ期相比,KIF26B在FIGO分期Ⅲ、Ⅳ期高表达(P<0.05)。(3)生存分析显示KIF26B高表达组总体生存率和无进展生存期显著低于KIF26B低表达组(P<0.05)。其1年、3年和5年ROC曲线的AUC值分别为0.766、0.671和0.742。COX比例风险回归分析示KIF26B(HR=1.26,95%CI:1.06~1.49,P<0.05)、年龄(HR=1.02,95%CI:1.01-1.04,P<0bio-based inks.05)、FIGO分期(HR=1.20,95%CI:1.04-1.39,P<0.05)可作为评估EOC患者预后的独立风险因素。(4)富集分析示KIF26B与PI3K-Akt信号通路、间充质细胞分化、血管生成因子(VEGF)、粘着斑、上调TGFB1等促进肿瘤复发转移的信号通路相关。(5)肿瘤微环境免疫浸润细胞含量分析提示,与KIF26B低表达组相比,KIF26B高表达组CD4记忆T细胞、记忆性B细胞,滤泡辅助性T细胞、NK细胞和树突状细胞的浸润数量较多(P<0.05)。相关性分析示KIF26B表达与巨噬细胞(r=0.348,P<0.01)、树突状细胞(r=0.268,P<0.01)、中性粒细胞(r=0.266,P<0.01)、CD4+T细胞(r=0.215,P<0.01)、CD8+T细胞(r=0.195,P<0.01)呈正相关;而与B细胞(r=-0.12,P<0.05)呈负相关。免疫生存分析显示在EOC中高组成比的活化肥大细胞较低表达组显示更差的预后(P=0.033)。反之,高组成比的T细胞、记忆B细胞、滤泡辅助性T细胞、活化的CD4记忆T细胞较低表达组则表明较好的预后(P<0.05)。第二部分(1)EOC石蜡样本免疫组化提示KIF26B蛋白主要表达在癌细胞的细胞膜或胞质中。KIF26B在正常卵巢组织中仅2例表达弱阳性(+),阳性表达率为13.3%(2/15)。KIF26B在良性卵巢肿瘤组织中共有5例阳性表达,其中2例KIF26B表达弱阳性(+),3例KIF26B表达阳性(++),阳性表达率为33.33%(5/15)。在50例上皮癌组织中KIF26B呈现不同程度的阳性表达,其中14例表达弱阳性(+),15例表达阳性(++)9例表达强阳性(+++),阳性表达率为76%(38/50),提示KIF26B在上皮卵巢癌中呈高表达(P<0.05)。(2)临床资料验证提示KIF26B在EOC中阳性表达与FIGO分期有关(P<0.05)。其中与FIGO分期早期(Ⅰ~Ⅱ)组比较,晚期(Ⅲ~Ⅳ)组的KIF26B的表达强度增加,差异有统计学意义(χ~2=14.068,P﹤0.05)。而KIF26B在EOC中阳性表达与年龄、病理分级无关(P>0.05)。(3)生存分析示KIF26B高表达组患者的生存率比低表达组患者的生存率呈明显降低趋势(P<0.05)。Cox分析示KIF26B(HR=2.35,95%CI:1.01-1.04,P<0.01)、FIGO分期(HR=1.52,95%CI:0.90-1.73,P<0.01)、病理分级(HR=1.40,95%CI:1.19-1.63,P<0.01)可作为影响EOC患者预后的独立风险因素。结论:(1)基于生物信息和回顾性临床研究分析结果提示与正常组织相比,KIF26B在EOC中呈高表达且KIF26B与EOC患者的FIGO分期及不良预后有关。(2)KIF26B在EOC呈高表达可作为EOC患者预后的独立危险因素,KIF26B可能是EOC的一个潜在预后标志物。(3)KIF26B可能通过PI3K-Akt、粘着斑(FAK)、VEGF信号通路、间充质细胞分化、上调TGFB1等信号通路参与EOC的发生发展过程。(4)KIF26B在EOC中的高表达与多种免疫细胞浸润含量呈正相关并影响患者预后,KIF26B可能参与肿瘤免疫过程,并可能是EOC潜在的免疫治疗靶点。