基于CRISPR/Cas9方法对DF-1细oncologic imaging胞的鸡乳酸脱氢酶A(GgLDHA)基因进行定向突变,有效减少了乳酸积累,明显改善了细胞的能量代谢状态,并显著提高了DF-1细胞的法氏囊病毒(IBDV)增殖能力。首先,通过启动子优化构建了适用于DF-1细胞的CRISPR载体Dibutyryl-cAMP NMR;随后通过同时共转靶向GgLDHA的2条sgRNAs,获得了13株GgLDHA基因突变型细胞株,其蛋白表达水平和酶活出现不同程度的下降。通过对突变克隆细胞株生长、葡萄糖和乳酸代谢、能量代谢以及IBDV增殖研究发现,乳酸对葡萄糖得率从2.1显著下降为1.6,ATP合成速率明https://www.selleck.cn/products/LBH-589.html显提高,相比对照细胞最高提高了57%,突变细胞株的能量代谢效率获得了有效改善。突变型细胞株的IBDV滴度较野生型均有明显增加,相比对照最大提高了5倍。通过定向突变GgLDHA基因,明显降低了DF-1细胞的乳酸积累,有效改善了细胞的能量代谢状态,并显著促进了IBDV病毒的增殖,为提高IBDV病毒疫苗的生产能力提供了一种新思路。