目的:本研究中望明确miR-15b-5p是否参与“新型支气管肺发育不良(Bronchopulmonary dysplasia,BPD)”的发病过程,并探讨在“新型BPD”中血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth factor,VEGF)是否为miR-15b-5p的靶标基因。方法:1.将48只新生SD大鼠随机分为BPD组(n=24)和对照组(n=24)。BPD组新生大鼠生后第1天开始在氧浓度为60%高氧环境下饲养建立BPD模型,对照组新生大鼠在正常空气条件下饲养,两组新生大鼠其他生活环境相同。分别于出生后第7天、第14天和第21天时处死大鼠并收集肺组织进行HE染色后观察肺组织学改变,Image-Pro Plus6.0软件计算两组新生大鼠肺pediatric hematology oncology fellowship泡平均数量(MAN)、肺泡平均面积(MAA)及肺泡平均直径(MAD)变化,并检测肺组织中miR-15b-5p、VEGF m RNA及蛋白表达量。2.培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(RLE-6TN),并转染miR-15b-5p mimicselleckchem C59、miR-15b-5p inhibitor过表达和抑制miR-15b-5LBH589 NMRp,检测过表达及抑制miR-15b-5p情况下VEGF m RNA及蛋白表达量变化。3.在RLE-6TN中过表达miR-15b-5p后通过CCK8实验检测细胞增殖活性。4.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测VEGF mRNA与miR-15b-5p的相对表达量。采用ELISA和Western blot检测VEGF蛋白表达水平。结果:1.肺组织学改变:随着高氧暴露时间的延长,BPD组新生大鼠肺组织改变以肺泡数量减少、肺泡腔增大及肺泡结构简单化为主要特征,与对照组相比MAN逐渐减少,MAA及MAD增大。2.VEGF mRNA及蛋白表达水平:高氧暴露7天时,两组大鼠肺组织中VEGF mRNA及蛋白表达量无差异。随着高氧暴露时间的延长,BPD组新生大鼠肺组织中VEGF m RNA及蛋白水平逐渐降低,且显著低于相同时间段对照组(P均<0.05)。3.miR-15b-5p表达量:第7天及14天时,两组大鼠肺组织中miR-15b-5p表达量无差异。高氧暴露时间延长至21天时,BPD组miR-15b-5p表达量高于对照组4倍以上(P<0.01)。4.细胞实验结果:在RLE-6TN细胞中,过表达miR-15b-5p后VEGF mRNA及蛋白的表达水平降低。相反,在miR-15b-5p抑制组VEGF mRNA及蛋白表达量增高(P均<0.05)。此外,本研究发现在RLE-6TN细胞中过表达miR-15b-5p可抑制细胞增殖活性。结论:本结果表明:miR-15b-5p可能通过抑制上皮细胞活性参与“新型BPD”发病过程,且“新型BPD”中miR-15b-5p可能为VEGF的上游调节因子。