基于miRNA测序技术探讨补中益气汤治疗自身免疫性甲状腺炎的潜在机制

目的:探讨补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠甲状腺组织miRNA表达的影响。方法:选择NOD.H-2h4小鼠共30只,随机分为正常组、模型组、补中益气汤组(BG组),每组各10只。根据分组给予小鼠含0.05%碘化钠水8周构建小鼠AIT模型后,灌胃给药8周取材。观察每组小鼠甲状腺组织病理改变情况,并对每组小鼠甲状腺组织差异miRNA进行实验验证及生物信息学分析。结果:与正常组比较,模型组甲状腺组织炎性细胞浸润明显,血清甲状腺球蛋白抗体(TgAb)水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,BG组甲状腺组织炎症程度减轻,血清TgAb水平显著降低(P<0.01)。与正常组比较,模型组小鼠白细胞介素(IL)-6、IL-17表达显著增高(P<0.01),IL-1β表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,BG组IL-1β、IL-6、IL-17表达明显降低(P<0.05)。与正常组比较,模型组得到154个差异表达miRNA;与模型组比较,BG组得到112个差异表达miRNA。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)结果表明miR-326-3p、miR-128-3p、miR-223-5p、miR-141-3p、miR-871-3p、miR-204-3p表达与测序结果趋势一致。基因本体(GO)功能富集于T细胞活化调节、氧化应激、miRNA结合等方面;京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶selleck产品(MAPK)信号通路、环磷酸腺苷(cAMP)信号通路等途径。差异miRNAProtein Tyrosine Kinase抑制剂预测得到3个关键基因,果蝇母源抗皮肤生长因子domestic family clusters infections蛋白(Smad3)、Janus相关激酶2(JAK2)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)。结论:补中益气汤可能通过调节6种miRNA干预自身免疫性甲状腺炎。