目的 LAG-3与PD-1作为免疫检查点在多种肿瘤中具有协同调控作用,相关治疗性抗体的研发是当前的研究热点。此前我们制备了一种靶向免疫检查点LAG-3的新型全人源抗体LBL007,为进一步研究LBL007的治疗作用与机制,我们对新抗体LBL007与商品化anti-PD-1抗体的协同抗肿瘤的作用及其机hepatocyte proliferation制进行了研究。方法 (1) PHA刺GSK126作用激Jurkat细胞48 h后免疫荧光法检测细胞表达LAG-3与PD-1蛋白的水平;(2) Western Blot检测肿瘤细胞A549,MGC803表达LAG-3与PD-1的配体MHC-II和PD-L1的水平。(3)用LBL007与商品化anti-PD-1抗体刺激已经由PHA活化后的Jurkat与肿瘤细胞A549,MGC803共培养模型48 h,CCK-8法检测Jurkat细胞杀伤肿瘤细胞的效率。(4) ELISA检测经抗体处理的共培养上清中TNF、IL-10和IL-2等细胞因子的分泌水平。(5)Western Blot检测经抗体处理的共培养体系下肿瘤细胞的凋亡信号通路活化情况。(6)在人LAG-3转基因小鼠皮下接种MC38结肠癌细胞,同时注射LBL007与商品化anti-PD-1抗体,检测最终成瘤的体积。(7)对小鼠瘤体进行病理切片,HE染色以及免疫组化检查cleaved-caspase3水平。结果 (1)PHA刺激48 h能有效诱导Jurkat细胞表达LAG-3与PD-1蛋白。(2)肿瘤细胞A549,MGC803能表达LAG-3与PD-1的配体MHC-II和PD-L1。(3) LBL007与anti-PD-1抗体均能增强Jurkat细胞对肿瘤细胞A549,MGC803的杀伤作用,且有协同作用。(4) LBL007与anti-PD-1抗体均能增强共培养上清中TN更多F、IL-10和IL-2等细胞因子的分泌水平,且有协同作用。(5) LBL007与anti-PD-1抗体均能增强共培养体系下肿瘤细胞的凋亡信号通路活化,且有协同作用。(6) LBL007与anti-PD-1抗体均能显著缩小MC38结肠癌细胞在人LAG3转基因小鼠皮下接种模型的成瘤体积,且有协同作用。(7)病理显示LBL007与anti-PD-1抗体处理能有效诱导瘤体细胞发生凋亡,且有协同作用。结论成功构建活化的Jurkat细胞与肿瘤细胞共培养模型。新型anti-LAG3抗体LBL007与anti-PD-1抗体在体外能有效增强Jurkat细胞对肿瘤细胞的杀伤作用,促进共培养上清中TNF的分泌和诱导肿瘤细胞的凋亡,且有协同作用。LBL007与anti-PD-1抗体在体内实验中也有抑制肿瘤体积与诱导肿瘤细胞凋亡的协同作用。