研究背景:胃癌(Gastric Cancer,GC)是世界范围内高发且死亡率较高的恶性肿瘤之一,目前胃癌防治的重中之重就是提高其早期诊断率、寻找更有效的治疗靶点。环状RNA(circular RNAs,circ RNAs)与肿瘤的发生发展过程关联密切,其高特异性和高敏感性使得体液中的circ RNAs作为胃癌早期诊断、预后预测的重要生物标记物以及作为治疗靶点成为希望。自噬(autophagy)是指细胞通过溶酶体对自身损伤的细胞器及生物大分子进行消化,从而实现对机体的自我更新与代谢功能的过程。在多种癌症中均有报道,许多circ RNAs都是通过对自噬过程的有效调控来发挥其作用的,即circ RNAs-自噬轴。基于自噬在肿瘤发生发展过程中的重要作用,以及对非编码RNAs愈加深入的认识,circ RNAs与自噬在胃癌中的MRTX1133说明书作用机制引起了人们的广泛关注。因此,探究circ RNAs对胃癌细胞增殖、迁移和自噬相关基因的影响对寻找胃癌有效的生物标记物及治疗靶点有着重要意义。研究目的:1.检测hsa＿circ＿0005927在胃癌组织样本中的表达,并对其表达水平与患者临床病理特征之间的关系进行分析;2.检测hsa＿circ＿0005927和自噬相关基因在胃癌细胞中的表达,并对两者表达量之间的相关性进行分析;3.明确hsa＿circ＿0005927对胃癌细胞增殖、迁移和自噬相关基因的影响。研究方法:1.收集延安大学附属医院33例胃癌患者癌、癌旁、正常组织标本及其全部临床病理资料。应用q RT-PCR实验检测胃癌、癌旁及正常组织中hsa＿circ＿0005927的表达水平,并对其表达水平与患者临床病理特征之间的关系进行分析。2.人胃癌细胞系MKN28、AGS、HGC27和人正常胃黏膜细胞系GES-1购自延安大学医学研究中心实验室,进行细胞培养。通过q RT-PCR实验检测胃癌细胞系中hsa＿circ＿0005927的表达水平,筛选表达差异明显细胞系,进一步检测胃癌细胞系中自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62的m RNA表达水平,并对其表达量与hsa＿circ＿0005927表达量之间的相关性进行分析。3.靶向hsa＿circ＿0005927的小干扰RNA及过表达质粒构建,并转染胃癌细胞,构建低表达hsa＿circ＿0005927及过表达hsa＿circ＿0005927的胃癌细胞系。通过q RT-PCR实验检测hsa＿circ＿0005927及自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62的m RNA表达水平改变;通过细胞实验(CCK-8实验、划痕实验)验证hsa＿circ＿0005927被敲低或过表达后,细胞增殖、迁移能力的变化。统计学方法:所有数据采用Graphpad Prism 8.0.2、SPSS26.0软件进行统计学分析;两组间比较采用独立样本t检验;不符合正态分布的两组间比较采用U检验;多组间比较采用方差分析;不符合正态分布的多组间比较采用多组独立样本秩和检验;相关分析采用Pearson相关性分析;单因素分析采用Fisher确切概率法检验。P<0.05则认为差异具有统计学上的显著性意义。研究结果:1.hsa＿circ＿0005927在胃癌组织中呈低表达(P<0.0001),而且在肿瘤体积较大的患者中表达相对更低,HER-2(3+)患者较HER-2(+/-)患者表达相对更低(P<0.05),而与分化程度、TNM分期、淋巴结转移等无关(P>0.05)。LY2835219核磁2.hsa＿circ＿0005927在胃癌细胞中呈低表达(P<0.01),自噬相关蛋白Beclin1、LC3、P62在胃癌细胞中的m RNA表达显著降低(P<0.05)。在人胃癌细胞系MKN28中,Beclin1、LC3与hsa＿eating disorder pathologycirc＿0005927的相对表达量呈正相关(r=0.6931,P=0.0384<0.05;r=0.7342,P=0.0243<0.05),P62与hsa＿circ＿0005927的相对表达量呈负相关(r=-0.7959,P=0.0103<0.05)。3.在胃癌细胞系中,hsa＿circ＿0005927敲低组Beclin1、LC3的m RNA表达降低,P62表达增高(P<0.05),而过表达组Beclin1、LC3的m RNA表达增高,P62表达降低(P<0.05)。CCK-8及划痕实验结果显示,敲低组胃癌细胞的OD值较对照组上升更快,增殖能力更强(P<0.05),而过表达组较对照组OD值上升缓慢,增殖能力相对较弱(P<0.05);敲低组胃癌细胞较对照组愈合更快,迁移能力更强(P<0.05),过表达组则愈合相对更缓慢,迁移能力更弱(P<0.05)。研究结论:1.hsa＿circ＿0005927在胃癌组织和细胞中的表达下调,并且可能与胃癌患者的肿瘤大小及HER-2表达状况有关。2.胃癌细胞中自噬水平下调,且自噬水平与hsa＿circ＿0005927的表达量呈正相关,下调hsa＿circ＿0005927的表达,自噬水平降低;上调hsa＿circ＿0005927的表达,自噬水平增高。3.下调hsa＿circ＿0005927的表达,促进胃癌细胞的增殖、迁移,上调hsa＿circ＿0005927的表达,则抑制胃癌细胞的增殖、迁移。