醇质体(Ethosomes)是在传统脂质体基础上加入高含量的醇(20%～50%,w/w),Compound C试剂使其具有流动性高、包封率高和皮肤渗透性强等特点的新型脂质体。然而,醇质体较高的流动性会导致其稳定性差、药物易泄露,使它在实际应用中受到限制,因此需采取一定的修饰手段来改善醇质体的性能。神经酰胺3(Ceramide 3,Cer3)是一种常见的角质层脂质,可降低载体的流动性,故本课题首次采用Cer3修饰醇质体以提高其稳定性。此外,目前单包载醇质体已被大量报道,但双包载醇质体却鲜有研究,因此本课题进一步选取脂溶性活性物——视黄醇棕榈酸酯(Retinol palmitate,RP)和水溶性活性物——肌肽(Carnosine,Car)进行包封,并探究了载体的稳定机制和理化性能;最后为了降低载体中乙醇带来的刺激性,采用丙二醇和乙醇复配的方式构建了RP-Car神经酰胺二元醇质体,并对其体外透皮性能、抗氧化性能和细胞毒性进行了探究。本课题主要研究结果如下:首先,以外观、粒径、PDI及包封率为指标,确定了RP-Car神经酰胺醇质体最佳制备条件为:无水乙醇体积分数为33.3%、大豆卵磷脂(PC60)含量为25 mg/mL、Cer3含量为1 mg/mL、胆固醇含量为1 mg/mL、RP含量为2 mg/mL、Car含量为50mg/mL、水合温度为45℃、水合时间为20 min,该条件下RP的包封率为(92.14±0.88)%,Car的包封率为(30.56±0.53)%,粒径为(64.8±2.3)nm,PDI为(0.143±0.019)。TEM结果显示Cer3修饰前后载药醇质体均为多层囊泡结构,但Cer3修饰使醇质体粒径减小。FTIR结果显示药物被很好地包封于载体中。DSC分析中Cer3修饰后载药醇质体的相变温度升高。其次,比较了Cer3修饰前后载药醇质体的稳定性,结果显示Cer3修饰后载药醇质体稳定性提高;在4℃、25℃和45℃下储藏12selleckchem Barasertib0天,RP-Car神经酰胺醇质体的外观和粒径均无明显变化。FTIR及不同Cer3含量下RP-Car神经酰胺醇质体的膜微粘度变化结果表明,Cer3与胆固醇的氢键作用使双层膜中的分子间相互作用增强,膜的微粘度提高,从而增强了其稳定性。通过Franz扩散池法比较了Cer3修饰前后载药醇质体的透皮性能,HPLC、CLSM及拉曼成像结果均表明RP-Car神经酰胺醇质体的药物经皮渗透增加;RP的皮肤累积量由(0.194±0.004)μg/cm~2增加至(0.245±0.001)μg/cm~2,皮肤渗透量由0μg/cm~2增加至(1.834±0.047)μg/cm~2;Car的皮肤累积量由(15.612±0.596)μg/cm~2增加至(18.079±0.236)μg/cm~2,皮肤渗透量由(29.822±0.119)μg/cm~2增加至(63.501±0.476)μg/cm~2。ATR-FTIR揭示了RP-Car神经酰胺醇质体透皮机制为:载体可以显著增强皮肤水合并疏松角蛋白的堆积,且能补充角质层细胞间脂质并使其从有序变为无序状态。与单包载RP或Car醇质体相比,RP-Car神经酰胺醇质体具有更高的抗氧化性,并且Cer3修饰可在一定程度上降低对HaCat的细胞毒性。最后,为进一步提高载体的稳定性并降低刺激性,以乙醇/丙二醇比例为6:4制备了RP-Car神经酰胺二元醇质体,其水溶性活性物Car的包封率提高至(47.20±0.71)%;TEM结果显示RP-Car神经酰胺二元醇质体是较为规则的球状囊泡,粒径为80 nm左右。与RP-Car神经酰胺醇质体相比,由于丙二醇提高了双分子层磷脂头部亲水区域的微粘度,RP-Car神经酰胺二元醇质体的稳定性提高;并且由于丙二醇的高粘性延缓了药物释放,使更多的药物沉积在皮肤中,RP和prebiotic chemistryCar的皮肤累积量分别增加至(0.273±0.002)μg/cm~2和(22.521±0.280)μg/cm~2,RP和Car皮肤渗透量分别减少至0μg/cm~2和(20.559±0.120)μg/cm~2;此外,RP-Car神经酰胺二元醇质体抗氧化性能基本不变,细胞毒性降低。