目的 探究姜黄素(curcumin)促进小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)成骨分化的适宜浓度及是否通过BMP-2/RUNX-2信号通路发挥作用。方法 将BMSCs分为对照组和姜黄素组,通过CCK-8实验筛选对BMSCs无细胞毒性的姜黄素浓度(0.1~10μmol/L),根据结果选择0.1~5μmol/L姜黄素在成骨分化条件培养BMSCs 7 d和21 d,分别采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)染色和茜素红染色检测BMSCs成骨分化水平与矿化能力;根据以上结果,选择浓度为0.1μmol/L姜黄素进行后续实验。0.1Protein Tyrosine Kinase抑制剂μmol/L姜黄素在成骨分化条件下培养BMforensic medical examinationSCs 7 d,分别采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)实验和免疫印迹法(Western blot)评价成骨标志物骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)和Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX-2)的mRNA和蛋白的表达情况。使用BMP-2抑制剂Noggin预处理BMSCs,姜黄素继续培养7 d, Western blot检测BMP-2和RUNX-2的蛋白表达水平。结果 CCK-8实验结果表明,与对照组相比,10μmol/L姜黄素组在48 h和72 h明显抑制BMSCs增殖(P<0.05),其余各浓度组(0.1~5μmol/L)对细胞增殖无显著影响(P>0.05)。ALP染色和茜素红染色结果显示,0.1μmol/L姜黄素组BMSCs的ALPAZD1152-HQPA溶解度活性及矿化结节的形成均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。qRT-PCR实验结果表明,与对照组比较,姜黄素组BMSCs的BMP-2和RUNX-2的mRNA表达均上调(P<0.05)。Western blot实验表明,姜黄素组BMSCs的BMP-2和RUNX-2的表达均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);Noggin处理24 h后发现,Noggin组BMSCs的BMP-2和RUNX-2的表达相较于对照组下降(P<0.05),而姜黄素组BMP-2和RUNX-2表达显著高于Noggin组和Noggin+姜黄素组(P<0.05)。结论 0.1μmol/L姜黄素可能为诱导BMSCs成骨分化的适宜浓度,且BMP-2/RUNX-2信号通路可能参与其中。