目的:神经病理性疼痛是一种顽固性慢性疼痛,发病率高且临床症状明显,严重威胁患者的生命健康。神经病理性疼痛的发病机制尚未完全阐明,目前普遍认可氧化应激反应是介导神经病理性疼痛的主要原因,大量IACS-10759研究购买研究也已证实抑制氧化应激可极大地改善神经病理性疼痛。因此,本研究选用具有强效抗氧化应激反应的传统中药甲基阿魏酸,旨在证实其对神经病理性疼痛的药理作用以及潜在的治疗机制。方法:采用雄性SD大鼠建立SNI模型引起大鼠神经病理性疼痛。甲基阿魏酸(5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg)在SNI模型建立后给予灌胃处理14天,Nox4过表达是在造模前4周显微注射Nox4腺相关病毒。所有组在术前1 d,术后1、3、7和14 d进行PMWT、PWCD和PTWL等疼痛行为学测试并观察甲基阿魏酸对神经病理性疼痛的作用效果。Western blot和免疫荧光染色检测DRG上Nox4蛋白及铁死亡标志性蛋白ACSL4和GPX4的表达情况。采用荧光探针检测DRG神经元ROS水平,组织铁试剂盒检测DRGVX-765 IC50铁含量的变化,透射电镜观察DRG神经元线粒体形态的变化。结果:(1)与Sham组相比,SNI组PMWT和PWCD的阈值更低(均P<0.001),PTWL差异无统计学意义(P>0.05)。此外,与Sham组相比,SNI损伤后Nox4表达更高(P<0.001),铁死亡标志性蛋白ACSL4表达更高(P<0.001),GPX4表达更低(P<0.001)。同时,ROS、铁含量以及异常线粒体百分比也更高(均P<0.001)。(2)与SNI组相比,SNI+MFA 5mg/kg组、SNI+MFA 10mg/kg和SNI+MFA 20mg/kg组PMWT和PWCD的阈值更高(均P<0.001)。其中,SNI+MFA 20mg/kg和SNI+MFA 10mg/kg组对PMWT和PWCD的阈值高于SNI+MFA 5mg/kg组(均P<0.001)。SNI+MFA20mg/kg和SNI+MFA 10mg/kg组PMWT和PWCD差异无统计学意义(P>0.05)。PTWL在各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。与SNI组相比,SNI+MFA 5mg/kg、SNI+MFA 10mg/kg和SNI+MFA20mg/kg组Nox4表达更低,铁死亡标志性蛋白ACSL4表达更低,GPX4表达更高(均P<0.001)。同时,ROS表达更低(P<0.001),异常线粒体百分比更低(P<0.05),铁含量更低(P<0.05)。(3)与Sham组相比,SNI+AAV-Nox4组PMWT和PWCD的阈值更低(P<0.001),并且比SNI组和SNI+AAV-NC组更低。但是在给予甲基阿魏酸灌胃治疗后被逆转(P>0.05)。PTWL各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。与SNI+AAV-NC组和SNI组相比,SNI+AAV-Nox4组Nox4表达更高(均P<0.01),ACSL4表达也更高(均P<0.001),GPX4表达更低(P<0.05,P<0.01)。此外,ROS、铁含量和异常线粒体百分比更高(P<0.001,P<0.05,P<0.05)。在给予甲基阿魏酸治疗后,与SNI+AAV-Nox4组相比,Nox4、ACSL4、ROS、铁含量和异常线粒体百分比更低(均P<0.001),GPX4更高(P<0.001)。结论:甲基阿魏酸改善大鼠神经病理性疼痛的PMWT和PWCD与抑制Nox4和铁死亡标志性蛋白Cartilage bioengineeringACSL4的表达,上调GPX4的表达相关。