苹果树腐烂病菌铁载体-铁转运蛋白VmSit1功能初探

黑腐LGK-974价格皮壳菌(Valsa mali引起的苹果树腐烂病在我国各苹果主产区可造成严重危害,是确认细节制约苹果产业可持续发展的主要限制因子。微生物的铁稳态主要通过调节铁的吸收、储存和解毒来保证充足的铁供应并预防铁积累毒性,在真菌中,铁载体-铁转运蛋白(SITs)主要通过ABC转运蛋白和MFS转运蛋白进行运输,对于植物和动物病原菌而言,铁载体-铁转运蛋白在其致病过程中起至关重要的作用。铁载体-铁转运蛋白属于MFS家族,具有底物特异性,是真菌界独有的一个蛋白家族。目前关于苹果树腐烂病菌铁载体-铁转运蛋白的研究较少。课题组在苹果树腐烂病菌转录组测序结合基因表达分析发现,腐烂病菌侵染致病过程中有1个铁载体-铁转运蛋白基因VmSit1显concomitant pathology著上调表达。通过qRT-PCR荧光定量发现腐烂病菌VmSit1基因表达水平在接种富士苹果枝条24 h、48 h后显著升高,推测其在腐烂病菌致病过程中可能发挥重要作用。笔者课题组通过PEG介导的原生质体转化法获得苹果树腐烂病菌基因VmSit1的两个敲除突变体菌株ΔVmSit1-52、ΔVmSit1-59。通过在PDA、CDM和ABM培养基和富士苹果枝条、叶片的接种试验,发现ΔVmSit1敲除突变体菌落形态和生长速率均无明显变化,但枝条和叶片的致病力显著降低。使用铁含量测定试剂盒测定YEPD培养基摇培48 h后ΔVmSit1敲除突变体菌丝铁含量显著降低,通过铬天青S比色法测定恰佩克培养基摇培96 h后ΔVmSit1敲除突变体相对铁载体含量显著上升。本研究首次对苹果树腐烂病铁载体-铁转运蛋白VmSit1基因进行初步研究,结果表明VmSit1基因是苹果树腐烂病菌的重要致病因子,VmSit1基因可能是通过调节铁载体-铁转运蛋白转运影响细胞铁含量调控这一过程。继续研究其基因功能,有望为苹果树腐烂病防治提供理论基础。