基于生大黄与大黄炭治疗溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）的药效差异，结合超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用（UPLC-QE-Orbitrap-MS）技术及网络药理学探索生大黄与大黄炭的差异成分及其作用机制。使用Biophilia hypothesis葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium，DSS）诱导的小鼠模型评价生大黄与大黄炭分别组方的芍药汤（shaoyao decoction， SYD）治疗UC的药效，结果表明生大黄与大黄炭分别组方的芍药汤均能在不同程度上改善小鼠UC疾病症状，大黄炭组方在减轻血性腹泻、降低炎症水平方面更具优势。采用UPLC-QE-Orbitrap-MS共鉴定出生大黄与大黄炭水煎液中78种小分子化合物，通过多元统计方法筛选得到炒炭后含量明显升高的7种成分包括5种游离蒽MG132化学结构醌、没食子酸、5-羟甲基糠醛，炒炭后含量明显降低的9种成分为结合蒽醌、儿茶素类化合物等。网络药理学与分子对接结果表明游离蒽醌、没食子酸及5-羟甲基糠醛可能作用于B细胞淋巴瘤-2（B-cell lymphoma-2，BCL2）、表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）、胱天蛋白酶3（caspase-3，CASP3）等核心靶点，干预磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B（phosphoinositide-3-kinase/protein kinase B，PI3K-Akt）、缺氧诱导因子-1（hypoxia inducible factor-1，HIF-1）、TNF、丝裂原活化蛋白激酶（miSCH772984供应商togen-activated protein kinase，MAPK）等信号通路，调控机体炎症、氧化应激及细胞凋亡过程，发挥UC治疗作用。该研究对大黄炒炭后药效及物质基础变化进行了分析，为临床治疗UC的大黄用药选择提供了参考。