基于网络药理学和实验验证探究尿石素A治疗肾纤维化的作用机制

目的：基于网络药理学、分子对接及动物实验探究尿石素A（urolithin A， UA）治疗单侧输尿管结扎（unilateral ureteral obstruction， UUO）诱导的肾纤维化的疗效及潜在作用机制。方法：采用网络药理学技术分析UA改善肾纤维化的作用机制；使用Auto Dock Tool软件对UA与改善肾纤维化关键靶点进行分子对接。采用UUO建立大鼠肾纤维化模型，纤维化标志蛋白的免疫组化染色检测UA对纤连蛋白和胶原蛋白Ⅰ的调控作用，免疫荧光染色和WesGalunisertib价格tern blot 检测UA对p-Akt1和Akt1的调控作用，Western blot 检测UA对Akt1Hepatocyte growth上游PI3K、p-PI3K和下游GSK3β、p-GSK3β蛋白表达的影响。结果：通过网络药理学技术共筛选获得21个UA抗纤维化核心靶点。通过PPI网络拓扑分析、GO生物功能注释和KEGG通路富集分析发现UA可以通过PI3K-Akt、p53等信号通路及Akt1、CCND1、CDK4、EGFR、Cselleckchem PLX5622DK2、ERBB2、CDK6、GSK3B、BCL2L1、PTK2、ESR1、PTGS2 等关键核心靶点发挥治疗肾纤维化的作用，其中Akt1是此次网络研究中节点程度最高的关键靶点。分子对接进一步验证了UA和Akt1的对接亲和度较高。动物实验结果表明UA可显著降低UUO大鼠的纤连蛋白和胶原蛋白Ⅰ的表达（P＜0.01），并抑制p-Akt1的表达（P＜0.01），同时抑制Akt1上游PI3K和下游GSK3β蛋白的磷酸化（P＜0.01）。结论：UA可通过抑制PI3K/Akt1/GSK3β信号通路，降低大鼠肾脏纤连蛋白和胶原蛋白Ⅰ的表达，有效缓解肾纤维化，可为后续尿石素A治疗肾纤维化的深入研究提供科学依据。