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目的 探究微小RNA(miR)-182调控线粒体凋亡通路对冠心病模型大鼠心肌组织细胞凋亡的影响。方法 选取健康SD成年大鼠30只，8～10周龄，15只作为假手术组，15只建立冠心病模型，建模成功后获取建模大鼠心肌组织细胞，经培养、转染后分为上调miR-182a、下调miR-182组、对照组。采用RT-PCR技术检测miR-182、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)相关基因表达，观察3组细胞增殖、凋亡变化，免疫组化法检测心肌组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平，WesRoxadustat分子式tern印迹检测Bcl-2、Bax表达水selleck激酶抑制剂平。结果 在1、3、6 h与对照组比较，下调miR-182组GSH-PX、SOD、Bcl-2表达水平较高，足细胞凋亡率、细胞增殖密度值、miR-182、MDA、Bax表达水平较低，上调miR-182组GSH-PX、SOD、Bcl-2表达水平较低，足细胞凋亡率、细胞增殖密度值、miR-182、MDA、Bamedicine re-dispensingx表达水平较高，差异有统计学意义(P<0.05);与下调miR-182组相比，上调miR-182组GSH-PX、SOD、Bcl-2表达水平较低，足细胞凋亡率、细胞增殖密度值、miR-182、MDA、Bax表达水平较高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-182通过下调表达水平调控线粒体凋亡通路Bcl-2、Bax水平低表达，从而抑制冠心病模型大鼠心肌组织细胞凋亡，对心肌细胞具有一定保护作用。

目的 基于音猬因子(Shh)途径分析山药提取物对老龄慢性萎缩性胃炎大鼠的干预作用。方法 选取12月龄的雄性SD老龄大鼠50只，随机分为空白对照组(A组)、慢性萎缩性胃炎模型组(B组)、低剂量山药提取物组(C组)、中剂量山药提取物组(D组)、高剂量山药提取物组(E组),每组10只。第2周至12周对B、C、D组进行造模，造模成功14 w时，给予B、C、D组山药提取物灌胃治疗，各组灌胃浓度依次为0.25、0.50、0.75 g/ml,剂量为10 ml/kg,连续灌胃5 w。A组不做处理，B组灌胃等体积生理盐水。第20周，收集、分析各组一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、胃分泌功能及微循环胃血流量、Shh通路蛋白表达。结果 与A组相比，B组胃液分泌量、胃液酸度、胃蛋白酶活性明显降低(P<0.05);与B组相比，C、D、E组以上指标明显升高，且E组升高水平最优(P<0.05)。与A组相比，B组胃体部与幽MK-1775核磁门部血流量、胃血流量明显减少(P<0.05);与B组相比，C、D、E组以上指标明显增加，且E组增加水平最优(P<0.05);与A组相比，B组NO、MDA表达明显升高，SOD、GSH-Px表达明显降低(P<0.05);与B组相比，C、D、E组NO、MDA表达明显降低，SOD、GSH-Px表达明显升高(P<0.05)。与A组相比，B组Shh、RA-mediated pathway蛋白质调控基因(Ptch)1、平滑受体蛋白(Smo)、神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白(Gli)1蛋白表达明显降低，Gli2、Gli3蛋白表达明显升高(P<0.05);与B组相比，C、D、E组Shh、Ptch1、Smo、Gli1蛋白表达明显升高，Gli2、Gli3蛋白表达明显降低，且E组变化幅度最优(P<0.05)。C59价格结论 山药提取物可通过重新激活抑制状态Shh信号通路，改善老龄慢性萎缩性大鼠的胃黏膜病理改变，改善大鼠胃微循环血流量及氧化应激反应，同时调节胃液、胃酸、胃蛋白的分泌，抑制病情进展。

腓骨肌萎缩症（Charcot-Marie-Tooth disease,CMT）是一组以周围神经病变为主的遗传性运动感觉神经病。主要临床症状包括进行性对称性肢体远端无力、萎缩、感觉障碍和腱反射减退或消失。根据神经电生理表现和病理特点，CMT可分为以脱髓鞘为主的CMT1型和轴索病变为主的CMT2型。除了周围神经系统病变外，CMT部分表型可同时累及中枢神经系统或其他脏器；其中小脑系统受累的CMT患者同时合并小脑性共济失调，可见于神经丝蛋白轻链（neurofilament light chain,NEFL）基因突变所致的CMT1F型和CMT2E型，MORC家族CW型锌指结构蛋白2 确认细节(MORC family CW-type zinc finger 2,MORC2)基因突变所致的CMT2Z型，溶质载体家族25成员46 (solute carrier family 25 me此网站mber 46,SLC25A46)基因突变所致的伴视神经萎缩的CMT6B型，以及多核苷酸激酶3′-磷酸酶（polynucleotide kinase 3′-phosphnocardia infectionsatase,PNKP）基因突变所致的CMT2B2型等。近年来，CMT重叠表型成为研究的热点，其中CMT合并小脑性共济失调具有高度临床异质性和遗传异质性，临床上易发生误诊。该文就合并小脑性共济失调的CMT表型的临床及遗传学特点进行综述，旨在为该类患者的早期诊断和治疗提供参考。

目的 利用多数据平台与生物信息分析技术探讨桂枝茯苓丸对乳腺癌的干预机制，并通过细胞试验对分析结果进行验证。方法 从GEO数据库下载乳腺癌相关数据集，分析乳腺癌差异基因；从TCMSP数据库中筛选出桂枝茯苓丸的主要有效成分及作用靶基因；2组靶基因映射出桂枝茯苓丸治疗乳腺癌的关键靶基因。通过TCGA数据平台分析关键靶基因在乳腺癌中的表达，并通过TIMER、CPTAC Data Porta购买Staurosporinel、Kaplan-Meier plotter、TISIDB、SangerBox等数据平台分析该表达与乳腺癌免疫微环境、免疫浸润水平、基因组异precise hepatectomy质性、免疫亚型和分子亚型以及不良预后的关系。通过Metascape分析平台对关键靶基因进行KEGG通路富集，寻找可能信号通路。最后采用血清药理学方法通过CCK-8试验、细胞划痕试验、Transwell小室试验及Westernblotting技术在体外对分析结果进行验证。结果 桂枝茯苓丸中有效成分42个，对应靶点185个，与GEO数据库映射得到与乳腺癌治疗相关的关键靶点14个，经与TCGA中乳腺癌差异基因比对，得到桂枝茯苓丸治疗乳腺癌的6个关键靶基因。这6个靶基因表达与乳腺癌中6种免疫细胞水平、3个免疫微环境评分、乳腺癌免疫亚型及分子亚型都有很强的相关性(P<0.05)，在基因组异质性相关性上也表现出了一致性，且Metabolism抑制剂与不良预后有密切的关系(P<0.05)。经KEGG富集分析发现，这6个基因主要富集在PI3K/Akt等信号通路上。细胞试验发现桂枝茯苓丸含药血清可以显著抑制乳腺癌HCC1937细胞的增殖、迁移与侵袭，还可降低HCC1937细胞中p-Akt/Akt、p-PI3K/PI3K蛋白相对表达，且作用呈剂量依赖性。结论 桂枝茯苓丸可能通过阻断PI3K/Akt信号通路，调节肿瘤免疫微环境实现对乳腺癌的干预作用。

目的 探讨肝细胞肝癌(LIHC)中NDC1基因的表达水平及临床价值。方法 利用The Human Protein Atlas、GEPIA、TIMERCytokine Detection数据库在线分析NDC1基因在健康人体各器官组织、正常肝组织和肝细胞肝癌组织中的表达情况。利用Kaplan-Meier Ploter和UALCAN数据库的肝癌数据集在线分析患者NDC1表达与生存总周期的关系。通过STRING数据库在线检索NDC1的相关蛋白网络图，并进行功能注释和KEGG通路富集分析。通过TIMER数据库检测NDC1在肝癌中的免疫细胞的浸润水平以分析临床不良预后的相关性。结果 人体不同器官的NDC1 m RNA存在差异表达。与对照组相比，NDC1基因在乳腺癌、膀胱癌、结肠癌、胆管癌、肺鳞癌、肝癌的表达水平显著上升，且差异有显著统计学意义(P<0.001)。肝癌组织NDC1 m RNA的表达水平高于正常肝脏组织，肝癌组织中NDC1 m RNA表达水平明显上调，差异有统计学意义(P<0.05)。NDC1基因在正常肝组织中的表达水平为2.356(1.728～2.878)。根据病理分级，NDC1基因在1级肝癌组织中的表达水平为3.071 (2.475～4.981)，在2级肝癌组织中的表达水平为3.69 (2.457～5.305)，在3级肝癌组织中的表达水平为4.676 (2.745～6.874)，在4级肝癌组织中的表达水平为4.586 (3.159～6.954)，各级肝癌中NDC1的表达水平差异有显著统计学意义(P<0.01)；根据肿瘤临床分期，NDC1基因在Ⅰ期肝癌组INCB28060溶解度织中表达水平为3.323 (2.371～5.414)，在Ⅱ期肝癌组织中表达水平为4.294 (2.704～7.496)，在Ⅲ期肝癌组织中表达水平为4.684 (2.979～7.037)，在Ⅳ期肝癌组织中表达水平为1.983 (1.801～2.669)，肝癌Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期中NDC1基因的表达水平均显著高于正常组织(P<0.001)，而肝癌Ⅱ期和Ⅲ期中的表达水平显著高于Ⅰ期，差异具有显著统计学意义(P<0.01)；根据身体质量指数分组，在正常体质量的肝癌组织表达水平为3.62 (IDN-6556研究购买2.584～5.661)，在超常体质量的肝癌组织表达水平为3.841 (2.098～6.056)，在肥胖的肝癌组织表达水平为3.627 (2.504～5.182)，在极度肥胖的肝癌组织表达水平为3.577 (2.359～4.909)。任何BMI患者的肝癌组织中NDC1的表达水平均显著高于正常肝脏组织，差异具有显著统计学意义(P<0.01)。NDC1与CDK1、CCNB1、CCNB2、SEH1L、NUP155、CDCA8等蛋白相关，NDC1 m RNA在肝癌免疫微环境中与CD8~+T细胞、CD4~+T细胞、T细胞、B细胞、中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞和骨髓细胞等免疫细胞中的表达呈正相关性(P<0.05)。结论 肝癌组织中NDC1基因呈现高表达水平，其表达水平与肝癌的发生、发展及预后密切相关，可能是肝癌潜在的预后生物学标志物及治疗靶标。

[目的]探究《黄帝内经》饮食理论的内涵，为系统性红斑狼疮患者提供饮食指导思路。[方法]以《黄帝内经》饮食理论为基础，Laduviglusib研究购买通过查阅古今文献，分析饮食与系统性红斑狼疮的关系，总结饮食对疾病的影响。[结果]系统性红斑狼疮患者应遵守食饮有节、谨和五味的原则，即限制热量、缩短Elexacaftor NMR进食时间以及根据证候或体质适当进食辣椒、大蒜等辛辣食物，可以通过改善机体代谢从而减轻自身免疫反应。由于会加重皮肤损害，导致糖脂代谢紊乱和肠道菌群失调，应尽量减少高糖高脂食物的摄入。糖类摄入过多还与关节疼痛、脱发相关，脂肪摄入过多则会加重肠道炎症。另外，建议食用富含维生素D、Ⅱ型胶原的食物，通过调节免疫，有助于减轻关节症状；适当饮茶、咖啡抗氧化，补充富含双歧杆菌的酸奶可以调节肠道菌群，改善肾功能。[结论]饮食调护是《黄帝内经》极具特色的理论之一，可有效指导系统性红斑狼疮患者日常饮食，有助于缓解病情、减轻药物毒副作用，对于Thermal Cyclers疾病治疗发挥一定的辅助作用，可以作为患者日常饮食的指导原则。

目的：探讨成人原发性膜性肾病原发性膜性肾病（PMN）伴乙肝病毒（HBV）感染的临床特点及预后。方法：回顾性分析20Emergency medical service15年1月至2020AMG510 molecular weight年10月在广西医科大学第一附属医院肾内科住院治疗并经肾活检确诊的成人PMN患者临床资料，比较伴或不伴HBV感染的PMN患者的临床特点，运用Kaplan-Meier生存分析和COX回归分析比较两组患者的预后。结果：共纳入PMN患者88例，其中伴HBV感染（PMN-HBV组）49例，不伴HBV感染（PMN组）39例；PMN-HBV组谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶selleck化学（ALT）、24 h尿蛋白水平高于PMN组（P<0.05），而补体C3、C4水平低于PMN组（P<0.05）。两组间在其他临床指标及药物使用上差异均无统计学意义（P>0.05）。Kaplan-Meier生存分析显示，PMN组临床缓解率高于PMN-HBV组（Log-rank χ~2=5.124, P=0.024）。多因素COX回归分析显示，合并HBV感染是影响PMN临床缓解的影响因素（HR=0.049,95%CI=0.214～0.899,P=0.024）。结论：伴HBV感染是影响成人PMN患者临床缓解的影响因素，伴HBV感染的成人PMN患者预后较差。

作为应用最广泛的医用高分子材料之一的聚氯乙烯(PVC),当用作医疗器械产品时,存在增塑剂的迁出和细菌易在其表面黏附和增殖导致感染的问题。因此,赋予PAnaerobic biodegradationVC材料优异的抗菌性和良好的加工性是对医用聚氯乙烯的客观要求,也是将传统PVC材料实现高性能和高附加值的迫切需要。本论文通过结构设计,合成了基于氯乙烯的二元和三元共聚物,并进一步反应合成季铵盐阳离子抗菌聚合物,以制备耐迁移抗菌PVC材料以及具有增塑性和抗菌性双重功能的PVC基体树脂材料。主要研究内容如下:(1)基于大分子季铵盐类抗菌剂优异的抗菌性和耐迁移性,选用氯乙酸乙烯酯(VCA)作为季铵化的功能性单体,通过沉淀聚合合成了3种不同共聚组成的低分子量氯乙烯与氯乙酸乙烯酯的二元共聚物。进一步通过共聚物中VCA与不同碳数的N,N-二甲基烷基叔胺之间的季铵化反应,成功地合成AZD6738研究购买了一系列大分子季铵盐阳离子抗菌剂,其本征抗菌结果显示所制备的不同碳数的大分子季铵盐阳离子抗菌剂对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均表现出优异的抗菌性能。将不同质量分数的大分子季铵盐阳离子抗菌剂与PVC基体混合制备PVC复合抗菌材料。含5 wt%大分子季铵盐阳离子抗菌剂的PVC复合抗菌材料具有优异的抗菌性能,抗菌率高达99.9%。同时,耐迁移实验结果显示大分子季铵盐阳离子抗菌剂具有非常低的迁移率(﹤0.4%)。(2)选择新癸酸乙烯酯(VND)作为内增塑单体,氯乙酸乙烯酯(VCA)作为季铵化的功能性单体,通过悬浮聚合合成了一系列分子量在62000-72000 g/mol的P[(VC)-co-(VND)-co-(VCA)]三元共聚物。测试结果表明,该三元共聚物相对未改性的纯PVC,玻璃化转变温度降低明显,最低降到47.3℃。塑化过程显示VND的引入可以显著地降低熔体的粘度,改善加工性。力学性能测试结果表明三元共聚物的拉伸强度和抗冲强度相比于纯PVC均有所提升,三元共聚物的拉伸强度最高为80.0 MPa,提升了149%,三元共聚物的抗冲强度最高为3.0 k J/m~2,提升了137%。(3)将P[(VC)-co-(VND)-co-(VCA)]三元共聚物塑化并压制成片材,采用弱极性溶剂溶胀的方式在其膜表面进行季铵化,得到集成了内增塑与抗菌功能的聚合物膜。正己烷与四氢呋喃质量比为13:7的混合溶剂是适合于该三元共聚物表面季铵化的反应介质。抗菌结果表明投料量80 wt%P更多VC的抗菌PVC材料在VCA实际含量为3%及以上时对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌率为98.4%及以上,而投料量70 wt%PVC的抗菌PVC材料在VCA实际含量为4%及以上时抗菌率均高达99.9%。

[目的]探讨灵芝提取物（ganoderma lucidum extrnovel medicationsact,GLE）对肝硬化小鼠的肝保护作用及机制。[方法]将10只雄性C57BL/6小鼠作为对照组，剩余40只小鼠采用四氯化碳橄榄油混悬液诱导肝硬化模型，并随机分为模型组和GLE低（50 mg/kg·d）、中（100 mg/kg·d）、高（200 mg/kg·d）剂量组，对照组及模型组均灌胃等量0.9%氯化钠溶液。计算肝脏指数；以全自动生化分析仪检测小鼠血清中谷氨酸转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸转氨酶（aspartate transaminase,AST）活性和总胆固醇（total cholesterol,TC）、总胆红素（total bilirubin,TB）和肌酐（creatinine,Cr）水平；以苏木精-伊红（hematoxylin eosin,HE）染色观察肝组织病理学变化，Masson染色观察肝组织纤维化程度；以脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记（terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labeling,TUNEL）染色观察肝细胞凋亡情况；酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、丙二醛（malondiawww.selleck.cn/products/z-vad-fmkldehyde,MDA）水平和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活性；免疫印迹法检测肝组织中总核因子E2相关因子2(nuclear factor E2 related factor 2,Nrf2)和核Nrf2、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)及醌氧化还原酶1[NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1,NQO1]、α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、Ⅰ型胶原蛋白（CollagenⅠ）及E-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达情况。[结果]与对照组比较，模型组小鼠肝损伤明显，肝脏指数，血清ALT、AST活性，TCDolutegravir抑制剂、TB及Cr水平，肝纤维化程度，肝细胞凋亡指数，血清TNF-α、IL-1β、IL-6及MDA水平，α-SMA及CollagenⅠ蛋白相对表达量升高（P<0.05），血清SOD和GSH-Px活性、肝组织总Nrf2和核Nrf2、HO-1、NQO1及E-cadherin蛋白表达降低（P<0.05）。与模型组比较，GLE低、中、高剂量组小鼠肝损伤逐步减轻，肝脏指数，血清ALT、AST活性，TC、TB及Cr水平，肝纤维化程度，肝细胞凋亡指数，血清TNF-α、IL-1β、IL-6及MDA水平，α-SMA及CollagenⅠ蛋白表达降低（P<0.05），血清SOD和GSH-Px活性、肝组织总Nrf2和核Nrf2、HO-1、NQO1及E-cadherin蛋白表达升高（P<0.05）。[结论] GLE可减轻肝硬化小鼠组织病理损伤，改善肝功能，这可能与激活Nrf2/ARE通路，抑制氧化应激和炎症反应，进而干预肝纤维化有关。

目的:黑质(Substantia nigra,SN)多巴胺能神经元选择性缺失是帕金森病(Parkinson’s disease,PD)的主要病理特征,且SN铁沉积是PD发病的关键因素,铁过量可导致细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)过多产生,引起细胞损伤。胆固醇在脑内含量丰富,过高的胆固醇可引起脑内铁代谢改变和细胞死亡,与PD发病密切相关。胆固醇衍生物24S-羟基胆固醇(24S-Hydroxycholesterol,24SOHC)在PD患者的血浆和脑脊液中显著升高,被认为是潜在的治疗靶点,然而胆固醇及24S-OHC对神经元铁代谢影响及细胞损伤的机制目前还不清楚。本实验旨在探讨胆固醇及24S-OHC对神经元中铁代谢、细胞损伤的影响及其机制,以期为PD防治提供新的实验支持。方法:应用Cell counting kit-8(CCK-8)试剂盒检测SH-SY5Y神经元和原代中脑腹侧(Ventral mesencephalon,VM)神经元活力,应用流式细胞术检测细胞内ROS水平,应用铁试剂盒检测细胞内铁含量,应用透射电子显微镜观察细胞器形态,应用免疫印迹法检测细胞内铁死亡、凋亡和坏死性凋亡相关蛋白表达,应用实时定量荧光PCR检测细胞内促炎细胞因子表达。结果:1.胆固醇对SH-SY5Y神经元的影响。1.1胆固醇处理SH-SY5Y神经元,与对照组相比,100μM浓度处理时细胞活力升高,因此选择10μM、100μM作为后续实验浓度;100μM处理组细胞内ROS水平升高(P<0.001),铁螯合剂去铁胺(Deferoxamihead impact biomechanicsne,DFO)共处理后,ROS水平升高被Y-27632分子量部分抑制(P<0.05)。1.2胆固醇处理SH-SY5Y神经元,与对照组相比,100μM处理组细胞内铁调节蛋白1(Iron regulatory protein 1,IRP1)表达升高(P<0.001),ROS抑制剂N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)预处理后,IRP1蛋白表达升高被抑制(P<0.01);转铁蛋白受体1(Transferrin receptor 1,Tf R1)、铁转入蛋白二价金属离子转运蛋白1(Divalent metal transporter 1,DMT1)、铁蛋白(Ferritin)表达升高(P<0.05,P<0.001),铁转出蛋白(Ferroportin 1,FPN1)表达降低(P<0.001);细胞内二价铁和总铁含量升高(P<0.01,P<0.001),而谷胱甘肽过氧化物酶4(Glutathione peroxidase 4,GPX4)的蛋白表达无明显变化(P>0.05),细胞未发生铁死亡。1.3胆固醇处理SH-SY5Y神经元,与对照组相比,100μM处理组细胞内胞外信号调节激酶(Extracellular signal-regulated kinase,Erk)和核因子激活的B细胞的κ-轻链增强(Nuclear factor kappa-B,NF-κB)的蛋白磷酸化水平升高(P<0.001),DFO共处理后,二者磷酸化水平升高被抑制(P<0.01,P<0.001)。1.4胆固醇处理SH-SY5Y神经元,与对照组相比,100μM处理组内细胞内白介素1-β(Interleukin-1 beta,IL-1β)、白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)mRNA表达上调(P<0.001),加入Erk抑制剂PD98095、DFO、NAC后,二者表达上调均被抑制(P<0.001)。2.24S-OHC对VM神经元的影响。2.1胆固醇处理SH-SY5Y神经元,与对照组相比,50μM,100μM处理组细胞内胆固醇24-羟化酶(Cholesterol 24-hydroxylase,CYP46A1)蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.001)。2.2 24S-OHC处理原代VM神经元,与对照组相比,0.05μM浓度处理时细胞活力降低,因此选择0.01μM,0.1μM作为后续实验浓度;0.01μM,0.1μM处理组细胞内ROS水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。2.3 24S-OHC处理原代VM神经元,与对照组相比,0.1μM处理组细胞内IRP1、Tf R1、DMT1、Ferritin蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),FPN1蛋白表达降低(P<0.01),铁调素Hepcidin mRNA表达在0.01μM处理组细胞内上调(P<0.001);细胞内二价铁和总铁浓度升TGF-beta/Smad抑制剂高(P<0.01),GPX4和铁死亡抑制蛋白1(Ferroptosis suppressor protein 1,FSP1)的蛋白表达无明显变化(P>0.05),细胞未发生铁死亡。2.4 24S-OHC处理原代VM神经元,与对照组相比,0.1μM处理组细胞内Cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.01),B细胞淋巴瘤2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)/BCL2-associated X的蛋白质(BCL2-associated X,BAX)蛋白表达比值降低(P<0.05),细胞发生凋亡;受体相互作用蛋白激酶1(Receptor-interacting protein kinase1,RIPK1)、RIPK3、磷酸化混合谱系激酶结构域样蛋白(Phosphorylated mixed lineage kinase domain-like,p-MLKL)蛋白表达升高(P<0.01、P<0.001),加入坏死性凋亡抑制剂Necrostatin-1(Nec-1)预处理后,三种蛋白表达均被抑制(P<0.001),细胞发生坏死性凋亡;DFO共处理后,Cleaved caspase-3蛋白表达升高被抑制(P<0.05),而p-MLKL蛋白表达不被影响(P<0.001);电镜下观察到0.1μM24S-OHC处理组细胞内线粒体出现了不同程度的核膜破裂,染色质凝集现象,也有细胞发生细胞质空泡化,细胞器肿胀,膜破裂,内容物流出的现象,进一步证明细胞发生了凋亡和坏死性凋亡。3.24S-OHC对SH-SY5Y神经元的影响。3.1 24S-OHC处理SH-SY5Y神经元后,与对照组相比,5μM浓度处理时细胞活力降低,因此选择2μM、5μM作为后续实验浓度;5μM 24S-OHC处理组细胞内IRP1、DMT1蛋白表达升高(P<0.01),Tf R1、FPN1蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),GPX4蛋白表达不变(P>0.05),细胞未发生铁死亡。3.2 24S-OHC处理SH-SY5Y神经元后,与对照组相比,5μM处理组细胞内Cleaved caspase-3表达量升高(P<0.001),Bcl-2/Bax蛋白表达比值降低(P<0.001),细胞发生了凋亡;Nec-1预处理后,细胞活力下降程度减轻(P<0.001),细胞发生了坏死性凋亡。3.3 24S-OHC处理SH-SY5Y神经元后,与对照组相比,5μM处理组内细胞内IL-1β、IL-6 mRNA表达上调(P<0.01,P<0.001)。结论:1.胆固醇使SHSY-5Y细胞ROS水平升高,通过IRP1的激活增加铁的转入减少铁的转出使细胞内铁含量升高,但细胞不发生铁死亡;胆固醇使细胞内促炎因子IL-1β和IL-6表达量升高,可能与Erk-NF-κB通路有关,此过程可被DFO部分抑制。2.24S-OHC使原代培养的VM神经元和SHSY-5Y细胞ROS水平升高,通过IRP1激活增加铁的转入减少铁的转出使细胞内铁含量升高;24S-OHC不引起细胞铁死亡但可诱导细胞凋亡和细胞坏死性凋亡,铁离子螯合剂DFO能部分抑制细胞凋亡,但不能抑制细胞坏死性凋亡。本实验通过不同浓度的胆固醇和24S-OHC作用于SH-SY5Y神经元、原代培养的VM神经元,观察了胆固醇对细胞铁代谢和细胞损伤的影响及其相关机制,为神经退行性疾病的预防和治疗提供了新的实验支持。