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氨氮(Ammonia nitrogen)是水环境中常见的氮Medications for opioid use disorder代谢物质之一。由于高浓度氨氮的毒性作用,使其成为鱼类养殖尤其是工厂化循环水养殖的主要限制性环境因素之一。当前,大量的研究都集中在氨氮对鱼类急性或慢性毒性作用的探讨上,有关外源性氨氮处理下鱼类的解毒机制及其对鱼类生长、肌肉品质影响的研究相对缺乏。草鱼(Ctenopharyngodon idella)是我国养殖规模最大的大宗淡水鱼养殖品种,在当前高密度的养殖模式下常常会受到氨氮胁迫。本研究将草鱼作为研究对象,选取氨氮作为影响因子,研究外源性氨氮作用对草鱼生长、血液生化和肌肉蛋白质代谢的影响。试验设置了1个对照组(0 mg/L)和4个氨氮处理组(1、3、6、9 mg/L),每个试验组各自设置3个平行,经过56 d的暴露,试验结果如下:(1)外源性氨氮的处理在一定范围内促进了草鱼的生长,提高了肌肉粗蛋白含量但降低了肌肉粗脂肪的含量。在整个试验过程中,各处理组草鱼健康状态较好,只有较少死亡现象发生,对饲料的摄食情况良好。经56 d养殖试验后,各氨氮处理组的试验鱼的增重率、特定生长率(SGR)显著增加(P<0.05),但是各氨氮浓度处理组之间差异不显著。同时,3、MCC950抑制剂6和9 mg/L的氨氮处理显著降低了草鱼饵料系数(P<0.05),但所有氨氮处理组中草鱼的摄食率均未受到显著影响。而肌肉营养成分检测发现,3、6和9 mg/L的氨氮显著提高了草鱼背肌的粗蛋白含量,但显著降低了肌肉粗脂肪的含量(P<0.05)。同时,草鱼的排氨率在6 mg/L氨氮下显著提高(P<0.05)。(2)随着氨氮浓度的升高,草鱼血氨水平以剂量依赖的方式显著增加(P<0.05)。3、6和9 mg/L的氨氮处理显著增强了草鱼血清谷氨酸脱氢酶的活性(P<0.05)。相似地,草鱼血清谷氨酰胺水平和谷氨酰胺合成酶活性在6、9 mg/L浓度下显著增强(P<0.05)。各处理组草鱼的血清尿素氮水平同样以剂量依赖的方式显著增加,而氨甲酰磷酸合成酶1的活性在9 mg/L的氨氮处理中显著增强(P<0.05)。相反地,草鱼血清谷草转氨酶活性在6、9 mg/L的氨氮处理下显著减弱,谷丙转氨酶活性在3、6、9 mg/L的氨氮处理也显著减弱(P<0.05)。结果表明,在外源性氨氮的处理下,草鱼主要通过3种途径来有效抵御氨毒,分别为增加氮排泄、将氨氮转化为其他低毒或无毒的含氮代谢物(谷氨酰胺,尿素),以及增加蛋白质的合成降低蛋白质的分解。(3)外源性氨氮的处理显著影响了草鱼背肌蛋白质合成代谢相关通路基因(P<0.05),但对e IF2B-e IF2通路相关基因eif2α无显著影响。与对照组相比,草鱼背肌TORC1通路相关基因(igf-1,igf-1r,pi3k,akt,tor)表达水平在氨氮处理下呈现不同程度的上调(P<0.05)。相对地,3、6和9 mg/L氨氮处理显著下调了4ebp1的表达水平(P<0.05),但对s6k1表达量无显著影响。同时,外源性氨氮的处理也显著降低了草鱼背肌蛋白分解代谢泛素-蛋白酶系统和自噬-溶酶体系统相关基因的表达量(murf1,psma2,beclin1,atg5,atg16l1,lc3b)的表达(P<0.05),但对草鱼背肌钙蛋白酶系统相关基因cast的表达无显著影响。结果表明,在外源性氨氮的处理下,草鱼可以Panobinostat分子式通过PI3K/Akt/TORC1通路来促进蛋白质合成,通过泛素-蛋白酶系统和巨自噬系统来减少蛋白质降解。

碎米荠(Cardamine hirsute)是具有超聚硒特性的新食品原料,有极高的开发潜力和应用价值。目前,为了更好地利用碎米荠的硒资源,国内外学者对碎米荠植株本身及其提取物进行了深度研究,但对碎米荠硒肽的报道却鲜见。硒、肽均呈现优良的抗氧化活性,并且生物活性肽具有高安全性、低毒副作用的特点,以碎米荠为基础开发抗氧化活性硒肽,对碎米荠的应用和硒营养的发展具有重要意义。本文以恩施碎米荠为原料,利用膜分离、液质联用和分子对接技术对碎米荠硒肽(SeCPPs)分离、结构鉴定和虚拟筛选,再利用行为学、组织学等方法和高通量测序技术考察了碎米荠硒肽的体内抗氧化活性及其对肠道菌群的影响。主要研究结果如下:1碎米荠蛋白的提取及抗氧化SeCPPs的制备以蛋白提取率为指标,选取液料比、提取时间、碱液浓度等为关键因素,分别利用碱溶酸沉法和超声辅助碱溶酸沉法提取碎米荠蛋白(SeCP)。碱溶酸沉法的最佳提取条件为:Na OH溶液浓度为0.10 mol/L、液料比45:1(v/w)、提取温度60℃、提取时间3 h、提取2次,该条件下蛋白的提取率为72.91%;超声辅助碱溶酸沉法的最佳提取条件为:振幅35%、超声时间60 min、液料比40:1(v/w)、Na OH溶液浓度0.125 mol/L。此时,碎米荠蛋白的提取率为65.53%。综合对比,选择碱溶酸沉法为SeCP提取的最适方法。此外,SeCP含有丰富的必需氨基酸和疏水性氨基酸,分别约占总氨基酸的40.73%和42.64%。根据水解度、DPPH·和ABTS~+·清除率,筛选出水解SeCP的实验用酶为碱性蛋白酶,采用单因素实验优化了SeCPPs的最适制备条件为:底物浓度4.0%、酶解时间1 h、加酶量1.0%。再经超滤膜分离出截留分子量为1k Da的级分,此时SeCPPs的Microscopy immunoelectron硒含量为362.378 mg/kg,DPPH·和ABTS~+·清除率的EC_(50)值分别为0.435和0.399mg/m L,并且其还原力和Fe~(2+)螯合力呈现出剂量-效应依赖关系。2 SeCPPs的结构鉴定及抗氧化含硒肽段的筛选对SeCPPs进行UPLC-MS/MS分析,并与蛋白质数据库中碎米荠蛋白信息进行比对,共解析出84条含硒肽段,其中以三肽和四肽居多;其中51.76%的肽段含有硒代蛋氨酸(SeMet)、48.24%的肽段含有硒代半胱氨酸(SeCys)。采用分子对接技术进行虚拟筛选,对84条含硒肽段与DPPH·的亲和力进行预测,根据结合能≤-5.00kcal/mol从中选取了RSeMKL、RSeMR、RVSeMI、RASeMT、RSeCK、RSeML和SQSeML七条肽段,再经人工合成并进行活性验证。分子对接可视化和DPPH·清除实验结果显示,RVSeMI的DPPH·清除率最高,EC_(50)值为5.65 mmol/L,可通过氢键与DPPH·作用,并且其Val2和SeMet3与DPPH·还存在疏水相互作用。3 SeCPPs在体内的分布及其抗氧化活性评估在D-gal诱导的衰老小鼠模型中,行为学实验、血清、脑和肝脏生理指标、病理组织切片结果表明:(1)硒在小鼠骨头、毛发和血浆中的含量较低(<1.000 mg/kg),在脾脏、肝脏、肾脏和睾丸中的含量较高,SeCPPs(30μg Se/kg/d.bw)可显著提高正常小鼠血浆和毛发的硒浓度(p<0.05),能维持机体正常的抗氧化能力,并未对肝功能产生消极影响,SeMet(30μg Se/kg/d.bw)和Na_2SeO_3(30μg Se/kg/d.bw)可显著提高D-gal致衰老小鼠肝脏和肾脏的硒浓度(p<0.05)。(2)给予SeCPPs(15μg Se/kg/d.bw)和SeMet(30μg Se/kg/d.bw)均能够显著降低D-gal致衰老小鼠的脑乙酰胆碱酯酶(Ach E)活性、丙二醛(MDA)含量(p<0.05)以及衰老神经元VP-16作用细胞密度,www.selleck.cn/products/gsk-j4-hcl改善其空间学习记忆能力,并且能够提高其血清总抗氧化能力(T-AOC)以及肝脏谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和T-AOC(p<0.05),改善肝脏炎细胞浸润和坏死症状;SeCPPs(15μg Se/kg/d.bw)还可以通过降低肝脏MDA含量、谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)活力,抑制肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素(IL-6)的表达(p<0.05),减轻脂质过氧化和炎症反应,保护机体免受氧化损伤;而Na_2SeO_3(30μg Se/kg/d.bw)则对D-gal致衰老小鼠抗氧化能力的提升和组织损伤无显著影响(p>0.05)。4 SeCPPs对小鼠肠道菌群的影响在正常小鼠中,给予SeMet(30μg Se/kg/d.bw)会导致肠道菌群的Shannon和Simpson指数极显著下降(p<0.01)以及β多样性变化,其肠道菌群组成与正常小鼠相比,差异变大,拟杆菌门(Bacterodetes)与厚壁菌门(Firmicutes)比例急剧下降,变形菌门(Proteobacteria)丰度极显著提高(p<0.01),肠道菌群失调;给予Na_2SeO_3(30μg Se/kg/d.bw)和SeCPPs(30μg Se/kg/d.bw)后,其α和β多样性无显著变化,在门和属水平上调节部分微生物群的丰度,不利于肠道稳态;而给予SeCPPs(60μg Se/kg/d.bw)亦对α和β多样性无显著影响,其肠道菌群基因所反映的功能通路与正常小鼠无显著差异,但极显著降低了幽门螺杆菌(Helicobacter)、提高了普雷沃菌属(Prevotellaceae＿UCG＿001)和Muribaculum的丰度(p<0.01),优化了肠道菌群结构。在抗生素暴露小鼠模型中,给予Na_2SeO_3(30μg Se/kg/d.bw)能显著降低了Ace指数和Chao1指数(p<0.05),极显著提高了阿克曼菌(Akkermansia)丰度,其肠杆菌(Enterobacter)占肠道菌群总丰度的75.10%,不利于失衡肠道菌群的恢复;给予SeMet(30μg Se/kg/d.bw)对肠道菌群的α和β多样性无显著影响,在属水平上能够降低麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas)丰度,对肠道菌群的恢复影响较小;而给予SeCPPs(30μg Se/kg/d.bw)在门水平上极显著提高了Firmutes的丰度、降低了Proteobacteria的丰度,在属水平上极显著降低了Stenotrophomonas丰度,有利于肠道菌群的恢复;给予SeCPPs(60μg Se/kg/d.bw)在门水平上极显著提高了Bacterodetes的丰度、降低了Proteobacteria的丰度,在属水平上提高了Akkermansia和Erysipelotrichaceae的丰度、降低了Stenotrophomonas和假单胞菌属(Pseudomonas)的丰度(p<0.01),并且其肠道菌群所反映的癌症、神经退行性疾病、心血管疾病等人类疾病和衰老功能基因丰度极显著下降(p<0.01),能使与碳水化合物、其他次级代谢产物生物合成转化、糖类生物合成和代谢等代谢功能相关通路的基因丰度极显著提高(p<0.01),有利于肠道菌群的恢复。

【目的】观察石斛乙醇提取物对2型糖尿病（T2DM）大鼠视网膜血管生成的作用及机制。【方法】随机选取85只大鼠，建立T2DM模型。将建模成功的80大鼠随机分为模型组，石斛乙醇提取物低、高剂量组与阳性药物组，每组20只，另设正常组（20只大鼠）。石斛乙醇提取物低、高剂量组分别给予石斛乙醇提取物100、300 mg·kg-1灌胃，阳性药物组给予羟苯磺酸钙5.4 mg·kg-1灌胃，正常组和模型组则给予等体积生理盐水灌胃。每日1次，持续12周。给药结束后，观察血浆空腹血糖（FPG）、血清空腹胰岛素（FINs）变化；苏木素-伊红（HE）染色法观察视网膜组织血管及病理学变化；酶联免疫吸附分析（ELISA）检测视网膜组织促炎因子白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1VX-445分子式β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量；聚合酶链反应（PCR）法和蛋白免疫印迹（Western Blot）法分别检测视网膜组织缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子（VEGF）mRNA与蛋白表达情况。【结果】与正常组比较，模型组FPG、FINs、IL-6、IL-1β、TNF-α水平，HIF-1α、VEGFgeriatric medicine mRNA与蛋白表达量升高（P<0.05）；与模型组比较，石斛乙醇提取物低、高剂量组和阳性药物组FPG、FINs、IL-6、IL-1β、TNF-α水平，HIF-1α、VEGF m RNA与蛋白表达量降低（P<0.05）；石斛乙醇提取物高剂量组与阳性药物组FPG、FINs水平，HIF-1α、VEGF mRNA与蛋白表达量降低效果相当（P>0.05），阳性药物组IL-6、IL-1β、TNF-α水平低于石斛乙醇提取物高剂量组（P<0.05）。FFA结果显示，石斛乙醇提取物低、高剂量组和阳性药物组心血管数量、荧光素泄漏量低于模型组，高剂量组和阳性药物组疗效相当。HE结果显示，石斛乙醇提取物低、AZD2281体外高剂量组和阳性药物组视网膜组织结构、内外膜层细胞排列以及细胞组织水肿均较模型组呈现不同程度的改善，高剂量组和阳性药物组疗效相当。【结论】石斛乙醇提取物可有效抑制T2DM大鼠视网膜血管生成，其机制可能与抑制HIF-1α/VEGF轴相关信号分子m RNA和蛋白表达及下游促炎因子有关。

骨质疏松症（osteoporosis，OP）的发病机制是由多种信号通路相互交联共同介导的结果，是一种影响中老年人健康的全身代谢性疾病。随着人口老龄化日益加重，OP的发病率也逐年上升，因其发病率高Biological life support、治愈难度大、预后差等一系列问SCH727965 molecular weight题，已被国内外学者广泛研究和报道。目前西医治疗OP的药物主要分为骨吸收抑制剂和骨形成促进剂两大类，虽然疗效可靠，但仍存在患者对该药物的依存性较差、副作用不可控、费用高昂等不足。然而，近年来随着对中医药研究的不断深入与创新，中医药治疗OP在临床得到普遍认可。诸多学者发现，中医药治疗OP的机制中有丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信号通路的广泛参与，其主要通过促进骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）向成骨细胞（osteoblasts，OB）分化、抑制破骨细胞（osteoporosis，OC）的分化及提高与成骨相关的因子碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，Aselleck化学LP)、Runt相关转录因子2（Runx2）、Ⅰ型胶原蛋白（COL1）等表达到来治疗OP。虽然目前对于中医药治通过MAPK通路治疗OP的研究不断深入，但在其分子机制研究等方面仍存在一定的不足。因此，本文综述了MAPK信号通路及关键靶点蛋白因子与OP的关系，以明确 MAPK信号通路对OP的重要作用。同时，对中药靶向调控MAPK信号通路来治疗OP作以系统总结，以期为中医药进一步精准治疗OP提供科学依据。

目的运用荟萃分析的方法探讨解整合素-金属蛋白酶33(ADAM33)基因多态性与COPD易感性的关系。方法全面检索PubMed、中国知网、重庆维普中文科技期刊全文数据库、万方科技期刊全文数据库获取ADAM33基因多态性与COPD易感性的病例对照研究, 根据纳入及排除标准筛选文献并提取数据。采用等位基因遗传模型、显性遗传模型、隐性遗传模型、共显性遗传模型分别评价COPD发病的相对危险度, 合并效应采用比值比(OR)和95%可SB203580信区间(95%CI)。Liproxstatin-1核磁并通过人种分组, 对各基因多态性进行亚组分析。发表偏倚通过漏斗图直观判断和Egger回归法、Begg秩相关法检验。结果共6篇文献(6个病例-对照研究)被纳入, 共有2 371例研究对象(其中1 174例为COPD患者, 1 197例为正常对照者)被纳入荟萃分析。Meta分析结果表明, 无论在亚洲人还是高加索人中, ADAM33 F+1基因多态性与COPD易Hepatoblastoma (HB)感性无关联。而Q-1 G/A与亚洲人种COPD患者易感性无关(OR=1.289, 95%CI=0.759～2.190, P=0.347), 与高加索人种COPD易感性有关(OR=1.651, 95%CI=1.178～2.314, P=0.004)。ADAM33 Q-1 G/A与COPD有关联(OR=1.421, 95%CI=1.014～1.991, P=0.042)。亚组分析显示, Q-1 G/A基因多态性与亚洲人COPD易感性无关(OR=1.289, 95%CI=0.759～2.190, P=0.347);与高加索人COPD易感性有关(OR=1.651, 95%CI=1.178～2.314, P=0.004)。结论 ADAM33 F+1T/C基因多态性可能与COPD易感性没有相关性, ADAM33 Q-1 G/A等位基因G可能是COPD的易感因素。

目的探讨超声造影及其量化分析技术评价睾丸缺血再灌注微血管损伤的方法。方法将24只成年健康大白兔随机分为对照组和微血管轻、中、重度缺血损伤组(Ⅰ组,包括Ⅰ_1、Ⅰ_2、Ⅰ_3组),每组6只。对照组暴露精索后穿线但不结扎,Ⅰ_1、Ⅰ_2、Ⅰ_3组术侧睾丸分别完全缺血2 h、4 h、6 h后,复灌注2h。术前、术后分别进行双侧睾丸超声造影,分析各组造影参数:峰值强度(PI)、达峰时间(TP)、曲率(S获悉更多lope)、平均渡越时间(MTT)、峰值减半时间(DT/2)和曲线下面积(Area)的Colforsin说明书变化。各组造影结束后,实验室检测血浆vWF、NO、ET-1含量。取术侧睾丸,行HE染色及免疫组化检查,对比观察各组病理变化。使用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果术前各实验组、对照组间术侧睾丸超声造影各参数无显著差别(P>0.05)。术后,Ⅰ_1组造影参数PI、Slope显著升高,TP、MTT明显延长,Area显著增大,与对照组相比有显著差别(P<0.05),造影时间-强度曲线峰值明显升高、后移。Ⅰ_2组造影参数PI、Slope进一步升高,DT/2显著延长,TP明显缩短,Area进一步增大,与对照组、Ⅰ_1组相比差异有统计学意义(P<0.05),造影曲线明显升高、前移且下降缓慢。Ⅰ_3组术侧睾丸实质始终未见显影,造影曲线近似一条直线。各实验组血Biomedical science浆vWF、NO、ET-1含量均较对照组显著增高(P<0.05),以Ⅰ_2组含量最高,较Ⅰ_1、Ⅰ_3组显著升高(P<0.05)。病理检查为各实验组随缺血程度加重,睾丸微血管扩张,红细胞淤积漏出、炎症细胞浸润逐渐增多,血管基底膜MMP-9表达逐渐增强。结论超声造影及其量化分析技术能够有效评价睾丸微血管损伤的程度。

以花椒果皮为研究对象，通过乙醇提取得到花椒果皮粗多酚，再采用分级萃取，依次得到二氯甲烷相（F寻找更多1）、乙酸乙酯相（F2）、正丁醇相（F3）和水相（F4），采用超高效液相色谱-电喷雾飞行时间串联质谱法（UHPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS）分析其酚类物质组成，通过对α-葡萄糖苷酶的抑制作用以及II型糖尿病模型小鼠评价其降糖活性。结果从花椒果皮中共鉴定出20种多酚Wave bioreactor类化合物，包括9种酚酸及其衍生物和11种黄酮类化合物。各相中总酚、总黄酮及多酚类化合物含量的变化趋势为F2＞F3＞F4＞F1，说明分级萃取对多酚类物质能起到良好的富集作用。花椒果皮多酚对α-葡萄寻找更多糖苷酶活性有抑制作用，其中F3的抑制率最高可以达到85.86%，且是通过反竞争性抑制的方式抑制α-葡萄糖苷酶的活性，F3中的主要活性成分绿原酸和芦丁与α-葡萄糖苷酶活性的抑制率显著正相关。F3能使糖尿病小鼠的空腹血糖降低64.2%，口服糖耐量降低21.42%，对小鼠的体重和饮食异常也有一定改善作用。因此花椒果皮多酚有望成为具有预防和治疗糖尿病潜质的活性成分。

theranostic nanomedicines目的:探讨LncRNA-NKILA靶向miR-3195对口腔癌细胞活性及血管生成的作用机制。方法:通过qRT-PCR方法检测LncRNA-NKILA在人正常口腔上皮细胞及人口腔鳞癌细胞中表达水平。按照随机数字表法分为空质粒组(SCC25细胞株+pcDNA)、NEAT1组(SCC25细胞株+pcDNA-NKILA)、NC-组(SCC25细胞株+miR-3195-NC-mimics); miR-3195组(SCC25细胞株+miR-3195-mimics)、联合1组(SCC25细胞株Galunisertib IC50+pcDNA-NKILA+miR-3195-NC-mimics)及联合2组(SCC25细胞株+pcDNA-NKILA+miR-3195-mimics)。采用CCK-8方法检测细胞增殖;流式细胞仪检测凋亡率，免疫印迹检测细胞VEGF及VEGF-C蛋白;荧光素酶方法检测LncRNA-NKILA对miR-3195调控作用。结果:SCC25细胞株转染pcDNA-NKILA使细胞增殖降低，凋亡增加，VEGF及VEGF-C蛋白降低，与空质粒组比较存在差异(P<0.05);与NC组相比，miR-3195组SCC25细胞株增殖降低，凋亡率升高，VEGF及VEGF-C蛋白降低(P<0.05)，与联合1Liraglutide组相比，联合2组SCC25细胞株增殖降低，凋亡率升高，VEGF及VEGF-C蛋白降低(P<0.05);荧光素酶实验显示miR-3195是LncRNA-NKILA靶基因。结论:LncRNA-NKILA可通过调控miR-3195表达抑制口腔癌细胞增殖，促进其凋亡，研究机制可能抑制VEGF表达相关。

新型冠状病毒(Severe acute rColforsinespiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)是冠状病毒科β冠状病毒属成员,属单股正链RNA病毒,基因组大小为29.9kb,是新型冠状病毒肺炎(Corona virus disease 2019,COVID-19)的病原体。SARS-CoV-2基因组编码28种蛋白质,其中包括4种结构蛋白(刺突蛋白S、包膜蛋白M、膜蛋白N和核衣壳蛋白E),16种非结构蛋白(Nonstructural protein,NSP1-NSP16)和8种辅助蛋白(ORF3a,ORF3b,ORF6,ORF7a,ORF7b,ORF8,ORF9b,ORF14)。COVID-19病死率仅为2.1%,但与2003年流行的SARS相比较,其传播能力更强。SARS-CoV-2的威胁迫在眉睫,其发病机制研究尚存在诸多空白。病毒在进化过程中会有一系列对抗宿主先天免疫反应的策略,利用宿主蛋白对自身进行加工包装以避免被宿主的免疫系统识别清除。木瓜样蛋白酶(Papain-like protease,PLpro)是SARS-CoV-2 NSP3编码的一种半胱氨酸蛋白酶,是病毒复制过程中必须的蛋白水解酶,完成SARS-CoV-2复制所需的NSP1、NSP2和NSP3的释放。先前研究表明,SARS-CoV-2能够通过NSP1、NSP6、NSP12和NSP13等蛋白抑制天然免疫反应,且SARS-CoV中PLpro也能发挥相同的抑制作用,但SARS-CoV-2 PLpro的作用机制不清楚。为阐明SARS-CoV-2PLpro在宿主I型干扰素应答(包括I型干扰素的产生及I型干扰素的信号转导)中的作用,并解析其作用的分子机制,本研究首先将SARS-CoV-2编码的PLpro克隆至真核表达载体pc DNA3.1中,转染HEK-293T细胞,经Western blot检测验证其表达。通过双荧光素酶报告基因检测发现SARS-CoV-2 PLpro能够抑制Poly(I:C)和Se V诱导的IFN-β启动子活性,并且呈剂量依赖性。q RT-PCR检测发现SARS-CoV-2 PLpro能抑制IFN-β等抗病毒因子的表达,ELISA检测结果也表明PLpro可以抑制Se V诱导的A549细胞上清液中IFN-β分泌,提示SARS-CoV-2 PLpro具有抑制I型干扰素分泌的作用。为进一步探究SARS-CoV-2 PLpro干预天然免疫的机制,通过双荧光素酶报告基因和Western blot检测确定PLpro抑制天然免疫信号的作用靶点,Fasciola hepatica发现PLpro可以促进内源性和外源性MDA5的降解,同时可以抑制IRF3的磷酸化。为探究PLpro表达对MDA5蛋白降解的影响,采用自噬抑制剂或泛素蛋白酶体降解抑制剂后发现,抑制自噬后,PLpro对MDA5的Metabolism抑制剂降解无显著影响,而使用蛋白酶体抑制剂后,MDA5的表达重新恢复。进而我们检测PLpro对MDA5的K48泛素化水平的影响,结果显示PLpro促进了MDA5的K48泛素化降解。提示PLpro通过泛素化蛋白酶体途径降解MDA5,抑制MDA5对病毒RNA的识别,实现病毒免疫逃逸。同时,使用蛋白酶体降解抑制剂MG132能够提高感染SARSCoV-2细胞的存活率。最后,在探究SARS-CoV-2 PLpro对I型干扰素下游信号转导的影响,我们使用IFN-α激活下游通路,发现SARS-CoV-2 PLpro能够通过抑制STAT1和STAT2的磷酸化来抑制下游信号的转导。综上所述,本研究证明了SARS-CoV-2编码的PLpro能够抑制IRF3磷酸化和促进MDA5泛素化降解抑制IFN-β产生;抑制STAT1和STAT2的磷酸化阻止Ⅰ型干扰素下游信号转导。这些发现进一步加深了对SARS-CoV-2免疫逃逸机制的理解,为了解SARS-CoV-2致病机理提供了理论基础。

目的 探讨胎儿监护和阶段性心理干预对妊娠期高血压高危产妇分娩结局、围生儿结局及心理应激情况的影响。方法 选取2017年4月至2020年4月河南科技大学第一附属医院收治的100例妊娠期高血压产妇的临床资料,所有产妇均为单胎、足月、头位。按照随机数字表法将其分为观察组及对照组,每组50例。对照组采用常规护理干预,观察组在对照组的基础上采用胎儿监护及阶段性心理干预。比较2组产妇的一般资料(年龄、孕周、妊娠期高血压程度)、血压、产妇并发症情况、1 min Apgar评分、分娩结局、干预前后Zung焦虑自评量表(SAS)评分和抑Biocontrol fungi郁自评量表(SDS)评分。结果 2组产妇一般资料(年龄、孕周、妊娠期高血压程度)比较差异无统计学意义(P>0.05)。2组产妇干预前收缩压(SBP)、舒张压(DBP)比较差异无统计学意义(P>0.05)。2组产妇干预后DBP、SBP下降明显,且观察组产妇干预后DBP、MRTX1133研究购买SBP较对照组低,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组产妇分娩后产褥感染、出血等发生率较对照组下降明显,观察组新生儿1 min Apgar评分较对照组更优(P<0.05),窒息发生率明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组产妇阴道分娩、阴道助产、剖宫产率分别为60%、14%、26%,观察组分别为82%、10%、8%,观察组剖宫产率较对照组下降明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。干预前2组产妇SDS、SAS评分比较差异无统计学意义(P>0.05),2组产妇干预后SDS、SAS评分下降明显,且观察组产妇较对照组下降更显著,差异均有统计学意义(P<0.05)。结AZD6738小鼠论 胎儿监护联合阶段性心理干预能有效改善妊娠期高血压产妇分娩结局、围生儿结局及心理应激,降低剖宫产率。