研究背景:酪氨酸激酶抑制剂(Tyrosine kinase inhibitors,TKIs)是EGFFUT-175试剂R突变的非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的一线治疗方式,但患者总生存期不理想,需要寻求其他治疗方法。虽然在细胞和动物水平的相关结果支持EGFR突变NSCLC能通过抗PD-1/PD-L1治疗获益,但是人体结果并非如此。深入探讨EGFR突变NSCLC对免疫检查点抑制剂(Immune checkpoint inhibitors,ICIs)耐受的分子机制,具有重要的理论价值和临床意义。研究方法:我们首先通过生物信息学分析E-钙粘蛋白在EGFR突变及野生型NSCLC细胞系及肿瘤组织中的表达,并分别通过Western Blot及免疫组织化学染色验证;其次分析EGFR突变及野生型NSCLC患者外周NK细胞及CD8~+T细胞表面E-钙粘蛋白受体KLRG1的表达;然后通过流式细胞术检测外周KLRG1~+Medial pivotCD8~+T细胞IFN-γ表达,同时分析肿瘤浸润KLRG1~+CD8~+T细胞的细胞毒性功能;随后体外探讨E-钙粘蛋白表达对CD8~+T细胞细胞杀伤功能的抑制作用,并进一步敲低E-钙粘蛋白表达,验证E-钙粘蛋白对CD8~+T细胞免疫抑制作用,并探讨具体的机制;最后探讨E-钙粘蛋白是否可通过外泌体分泌的方式对CD8~+T细胞杀伤活性及增殖能力产生影响。研究结果:我们发现E-钙粘蛋白在EGFR突变型NSCLC细胞及肿瘤组织中表达上调,另外,收集EGFR突变及野生型NSCLC患者外周血,流式细胞术检测发现E-钙粘蛋白的受体KLRG1在EGFR突变型NSCLC外周CD8~+T细胞中的表达更高;随后我们发现外周KLRG1~+CD8~+T细胞杀伤因子IFN-γ表达上调,发挥效应功能,但肿瘤浸润KLRG1~+CD8~+T细胞细胞毒性功能减弱,发挥免疫抑制功能;进一步地我们在体外证实E-购买PF-03084014钙粘蛋白高表达的EGFR突变NSCLC细胞株可抑制CD8~+T细胞的细胞杀伤功能,主要通过抑制CD8~+T细胞细胞毒性因子IFN-γ及Granzyme B的表达而实现;最后我们通过超速离心法分离EGFR突变及野生型NSCLC细胞的外泌体,检测发现EGFR突变NSCLC细胞株可分泌富含E-钙粘蛋白的外泌体,抑制CD8~+T细胞杀伤活性及增殖能力。研究结论:EGFR突变型NSCLC中肿瘤E-钙粘蛋白及外周血CD8~+T细胞上其受体KLRG1表达升高,E-钙粘蛋白-KLRG1轴可抑制CD8~+T细胞的细胞杀伤功能,在EGFR突变型NSCLC免疫治疗耐受中发挥重要作用,可能为EGFR突变型NSCLC提供新的免疫治疗靶点。