旨在探讨L-半胱氨酸(L-Cys)对体外培养绵羊卵巢颗粒细胞(GCs)增殖、凋亡和类固醇分泌的影响。本研究采集1～1.5岁龄体重相近饲养条件相同的30只健康性成熟小尾寒羊母羊新鲜卵巢，从优势卵泡(2～8 mm)中收集GCs,随机分为5组，每组6个重复，各组添加L-Cys浓度分别为0、100、300、500和700μmol·L~(-1),培养48 h后用CCK-8试剂盒进行细胞增殖活力测定，Annexin V-FITC/PI流式细胞仪检测GCs的凋亡情况，采用ELISA检测GCs培养液上清中孕酮和雌二醇的分泌水平并采用实时荧光定量PCR和Western blot分析L-Cys对绵羊颗粒细胞增殖相关基因(PCNA、CCND2、CCNB1)、凋亡相关基因(BAX、Caspase-3、Bcl-2)和类固醇分泌相关基因的(STAR、3β-HSD、CYP11A1、CYP19A1)mRNA和蛋白表达的影响。结果显示，100、300和50Polyhydroxybutyrate biopolymer0μmol·L~(-1)组的L-Cys均可显著促进绵羊GCs的增殖活力(P<0.05),并显著抑制其凋亡率(P<0.05)。添加300μmol·L~(-1)的L-Cys显著抑制了孕酮(P_4,MK-1775说明书P<0.05)的分泌。进一步研究发现，300μmol·L~(-1)和500μmol·L~(-1)组的L-Cys可以上调增殖相关基因(PCNA、CCND2、CCNB1)mRNA表达水平，其中300μmol·L~(-1)组的增殖蛋白(PCNA、CCND2、CCNB1)表达量显著上升(P<0.05);100μmol·L~(-1)和300μmol·L~(-1)组显著下调凋亡相关基因(BAX、Caspase-3)mRNA(P<0.05)及其蛋白表达水平(P<0.05)。添加300μmol·L~(-1) L-Cys显著降低了类固醇相关基因(STAR、3β-HSD)mRNA及蛋白表达水平(P<0.05),添加100μmol·L~(-1)和300μmol·L~(-1) L-Cys显著升高了类固醇相关基因(CYP11A1、CYP19A1)mRNA(P<0.05)及其蛋白表达水平(P<0.05)。综上，L-Cys通过上调基因PCNA、CCNB1、CCND2、Bcl-2 mRNA及其蛋白表达、下调基因BAX、Caspase-3 mRNA及其蛋白表达，促进绵羊GCs增殖，抑制其凋亡；L-Cys通过下调基因STAR、3β-HSD mRNA及其蛋白表达以及上调基因CYP11A1 mRNA及其蛋白表达抑Wnt-C59小鼠制P_4的分泌。