研究背景:类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一种自身免疫性疾病,以关节肿胀、疼痛、僵硬和骨骼的逐渐破坏为特征。RA的发病机制涉及多种免疫细胞、细胞因子和信号通路,导致异常的免疫反应和组织损伤。其中,CD4~+T细胞在启动和维持RA方面起着关键此网站作用。环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类由前体m RNA的反向剪接产生的内源性非编码RNA。它们在转录、转录后和翻译水平上具有多种调控基因表达的功能。近年来,越来越多的证据表明circRNA在RA中发挥重要作用,影响CD4~+T细胞的分化、活化和功能。N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m~6A)修饰是真核生物中最丰富和最保守的内部转录修饰之一,在mRNA和ncRNA中都存在。m~6A修饰可以影响RNA的稳定性、剪接、迁移、结合蛋白质亲和力等,并参与各种生理过程和疾病进展的调控。值得注意的是,近期研究发现m~6A修饰可通过影响circRNA水平参与circRNA生物学功能的调控,从而在机体免疫应答中发挥作用。然而,目前对于在RA患者CD4~+T细胞中m~6A修饰circRNA的分布特征及其对CD4~+T功能的影响还不清楚。研究目的:本课题旨在探讨m~6A修饰的circRNAs在CD4~+T细胞中的表达差异谱,及m~6A修饰hsa＿circ＿0000817通过调节CD4~+T细胞功能在RA发生发展中的影响,为揭示RA的分子机制及寻找新型治疗靶点提供新思路。研究方法:1.分别Rational use of medicine选择12例RA患者和12例健康对照者(healthy JAK/STAT抑制剂control,HC),采用m~6A-Circular RNA Epitranscriptomic Microarray(8*15K)芯片技术检测RA和HC外周血CD4~+T细胞中m~6A-circRNA的表达情况。2.根据芯片技术检测结果,筛选了3条可能与RA发生发展相关m~6A-circRNA(hsa＿circ＿0001931、hsa＿circ＿0001313、hsa＿circ＿0000817)。然后本研究将备选的m~6A-circRNA采用MeRIP-qPCR进行验证。3.RT-qPCR检测上述3条circRNA和m~6A修饰酶相关基因在HC和RA患者CD4~+T细胞中的表达情况:细胞总RNA提取按照Trizol试剂盒说明书进行操作,分光光度法测定总RNA浓度。根据逆转录试剂…