生淀粉糖化酶(raw starch glucoamylase, RSGA)可以直接作用于未糊化淀粉颗粒。该研究基于Aspergillus fumigatus来源RSGA氨基酸序列分析发现，Asn121、Asn422和Asn610位点均为Asn-Xaa-Ser形式的糖基化基序，具有将其突变为Asn-Xaa-Entinostat采购Thr形式糖基化基序的潜力。首先，利用NetNGlyc 1.0 Server评估突变序列N-糖基化的可能性，并获得突变体S123T(Asn121-Pro122-Thr123)、S424T(Asn422-Gly423-Thr424)和S612T(Asn610-Arg611-Thr612)。突变体在Komagataella phaffii中表达并完成糖基化，利用去糖基化酶EndoH处理进一步验证突变体均成功被糖基化。basal immunity在此基础上，以生玉米淀粉为底物，在40℃,pH 4.6的条件下分析了突变体S123T、S424T和S612T的催化效率(k_(cat)/K_m),分别是RSGA的1.31、1.29和1.15倍，这主要是由于K_m值降低导致突变体对底物的亲和力增加造成的。此外，蛋白浓度及十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, selleck VE-822SDS-PAGE)分析显示突变体S123T表达量提高了9.3%,且糖基化效果显著。酶学性质分析结果显示，重组酶的最适反应温度从70℃降低到60℃。研究结果表明，N-糖基化基序改造是一种有效的提高RSGA的催化效率的策略。