RAF信号通路

冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)(coronary heart disease, CHD)是临床上常见的疾病，严重危害人类健康。目前许多生物标志物已经被作为冠心病的发生、发展和总体预后的预测因子进行研究。其中，鉴median income于血细胞计数指标相对便宜且易于衍生以及动脉粥样硬化过程的炎症性质，从病理生理学角度以及临床和公共卫生影响来看，在冠心病研究中证明全身炎症的血细胞计数指标的阳性结果可能很有意义。该文就常见的血细胞计数指标，如平均血小板体积(mean platelet volume, MPV)、红细胞分布宽度(red cell distribution width, RDW)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(neutrophil to lympdiABZI STING agonist MWhocyte ratio, NLR)、单核细胞/淋巴细胞比值(monocyte to lymphocyte ratio, MLR)和血小板/淋巴细胞比值(platelet to lymphocyte ratio, PLR)在冠心病诊断和预后中的作用及其潜在的临床应用进行selleck化学综述。

研究背景特应性皮炎(Atopic dermatitis,AD)是一种常见的慢性、复发性疾病,易诊难治,临床以皮肤顽固剧烈瘙痒、干燥、湿疹样丘疱疹、结痂和苔藓化改变等为主要表现。本病好发于儿童,可严重影响患者及其家庭成员的生活质量,是全世界范围内发病率较高的皮肤病。现代医学认为,AD的发病与遗传、免疫、表皮屏障功能损伤等因素相关,并与环境关系密切;其中氧化应激是促使AD的重要因素。尽管现代医学在治疗AD方面发挥着重要的作用,但是治疗药物的副作用以及适用对象的局限性使得AD仍是皮肤科难治性疾病之一。中医认为,特应性皮炎属于“奶癣”、“四弯风”范畴。课题组在前期研究认为AD多由先天禀赋不耐,心火过盛,内扰心神,同时湿热留滞而发病。多从从心脾论治,治宜镇心安神,健脾渗湿、止痒。龙牡皮炎方是课题组根据临床经验,在镇心安神、健脾渗湿止痒为治法的基础上,加减而成的经验方,药性平和,镇心安神、祛湿健脾、标本兼顾,在缓解瘙痒、减轻皮损、减少复发率、缓解临床症状等方面取得较好疗效。本研究在前期基础上,首先建立AD小鼠模型,并对龙牡皮炎方在干预AD发展及氧化应激方面进行评价;其次通过建立腹腔注射D-半乳糖制造氧化应激后AD小鼠模型,研究AD发病皮肤氧化应激水平变化,探索龙牡皮炎方干预AD的可能机制。目的及意义实验一:龙牡皮炎方对特应性皮炎小鼠的疗效及机制的研究1)采用免疫损伤的方法建立AD小鼠模型,研究AD发病中小鼠氧自由基水平与抗氧化能力的变化特点;2)通过皮损程度、炎症因子水平、表皮蛋白表达水平等指标观察龙牡皮炎方对于免疫损伤AD小鼠模型的疗效及机制。实验二:龙牡皮炎方对于氧化应激后特应性皮炎小鼠疗效及机制的研究1)采用腹腔注射D-半乳糖加免疫损伤的方法建立氧化应激诱导的AD小鼠模型,研究氧化应激后AD小鼠的氧自由基水平与抗氧化能力的变化特点;2)观察不同氧化应激程度下,AD小鼠的皮损程度、炎症因子水平等指标变化intestinal microbiology特点,以及龙牡皮炎方对于氧化应激后免疫损伤AD小鼠模型的疗效;3)通过抗氧化因子Nrf2/OH-1表达水平评价龙牡皮炎方对于氧化应激后免疫损伤AD小鼠模型的激活抗氧化通路能力。4)通过上述实验研究,根据中医“诸痛痒疮,皆属于心”的病机理论,对龙牡皮炎方进行药效评价,揭示其干预AD的可能机制,从氧化应激的角度为运用镇心安神法治疗AD提供理论基础。方法实验Rapamycin抑制剂一:龙牡皮炎方对特应性皮炎小鼠的疗效及机制的研究实验分为4个组:中药组、对照组、模型组与空白组。中药组、对照组、模型组d1、d4,用2%的2,4-二硝基氯苯(DNCB)外涂BALB/c小鼠背部皮肤进行2次致敏,用量为背部200μ1/次,每次间隔3天;第2～5周,用0.2%DNCB外涂同样部位致敏,用量同上,每次间隔3天,涂抹10次。空白组仅涂抹基质。d21-d35进行灌胃,中药组用浓度分别为3.7g/ml的龙牡皮炎方灌胃,用量为0.1ml/(10g·d)。龙牡皮炎方组成为:生龙骨、煅牡蛎、炒神曲、茯苓皮、连翘、麻黄根。对照组用10mg/kg的维生素C水溶液灌胃,用量为0.1ml/(10g·d)。模型组与空白组用等量饮用水灌胃。进行上述AD诱导与药物灌胃后,通过皮损评分、皮肤组织病理评价皮损严重程度,通过免疫印迹法(western blot)检测皮损中FLG含量差异,评价各蛋白表达水平;通过免疫组织化学法检测皮损处皮肤组织的TSLP含量,作为评价瘙痒程度指标;通过ELISA方法检测血清TnF-α、IL-4、IgE水平;ABTS法测定皮肤组织氧化与抗氧化能力;实验二:龙牡皮炎方对氧化应激后特应性皮炎小鼠的疗效及机制的研究实验分为三步,第一步进行氧化干预,分为高氧化组、低氧化组和空白组。高、低氧化组d1-d35,每天分别用100mg/(kg·d)、500mg/(kg·d)D-半乳糖溶液进行腹腔注射,空白组注射生理盐水。第二步进行致敏。除空白组外其余小鼠d7-d14用1%DNCB外涂背部皮肤致敏2次,用量为背部200μl/次,每次间隔3天;d15～d35,用0.1%DNCB外涂同样部位致敏,用量同上,每次间隔3天,涂抹10Belumosudil次,空白组涂抹基质。第三部进行药物干预。在高、低氧化的基础上各自分为高剂量中药组、低剂量中药组、对照组与模型组。d21-d35进行灌胃,中药组用浓度分别为1.85g/ml、3.7g/ml的龙牡皮炎方,用量为0.1ml/(10g·d)。对照组用10mg/kg的维生素C水溶液灌胃,用量为0.1ml/(10g·d)。模型组与空白组用等量饮用水灌胃。进行上述氧化应激干预、AD样皮损诱导、药物灌胃后,对小鼠皮损外观、皮肤组织病理及皮肤中TSLP含量、血清IgE、血清细胞因子差异进行评价,评价方法同实验一。通过免疫印迹法(western blot)检测皮损中抗氧化蛋白Nrf2/OH-1表达差异。结果实验一:龙牡皮炎方对特应性皮炎小鼠的疗效及机制的研究1.与空白组比较,模型组小鼠血清氧自由基水平明显升高,而抗氧化能力水平明显下降(P<0.01);与模型组比较,阳性对照组及中药组血清中氧自由基水平明显下降,而抗氧化能力水平明显升高,具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。2.从皮损程度、IgE、TNF-α、IL-4、TSLP水平评价,本方对于免疫损伤方法建立的AD小鼠模型疗效优于对照药物(P<0.05),且相对于模型组,本方对FLG表达有促进作用(P<0.05)。实验二:龙牡皮炎方对氧化应激后特应性皮炎小鼠的疗效及机制的研究1.特应性皮炎小鼠血清氧自由基浓度空白组显著低于氧化后的模型组(P<0.01),氧化后对照组显著低于氧化后模型组(P<0.01);低氧化的特应性皮炎小鼠的中药组氧自由基浓度显著低于对照组(P<0.05),但高氧化的特应性皮炎小鼠中药组与对照组氧自由基浓度无显著差异(P>0.05)。对比不同氧化程度的特应性皮炎小鼠血清中氧自由基水平发现,同样干预措施下高氧化组氧自由基水平比低氧化组显著升高(P<0.01),其中以模型组组间差距显著(P<0.01),对照组之间差距明显(P<0.05),而中药组之间虽有差距,但差距无统计学意义(P<0.05);特应性皮炎小鼠血清抗氧化能力检测发现,空白组显著高于氧化后的模型组(P<0.01),高氧化浓度下对照组显著低于高氧化后模型组(P<0.01),低氧化浓度的照组低于高氧化后模型组,差距无统计学意义(P>0.05);氧化后的特应性皮炎小鼠的中药组抗氧化能力显著强于对照组(P<0.05)。对比不同氧化程度的特应性皮炎小鼠血清抗氧化能力发现,同样干预措施下高氧化组整体的抗氧化能力水平比低氧化组显著降低(P<0.05),但具体至不同干预措施之间抗氧化能力则无显著差异。2.对于皮损评分,高氧化诱导的AD小鼠评分显著高于同样干预措施的低氧化组小鼠,以量化的评分评价可认为与氧化剂量存在效应关系(P<0.05)。其中以模型组差距最为显著(P<0.01),对照组与中药组虽有差距,但无统计学意义(P>0.05);对于血清IgE,高氧化诱导的AD小鼠含量显著高于同样干预措施的低氧化组小鼠(P<0.05),其中以高剂量的中药组差距最为显著(P<0.01),对照组与中药组虽有差距,但未呈现统计学意义(P>0.05);对于血清IL-4,高氧化诱导的AD小鼠含量显著高于同样干预措施的低氧化组小鼠(P<0.05),高、低氧化后的中药组差距较为显著(P<0.05),高、低氧化后的对照组血清IL-4差距显著(P<0.05),模型组虽有差距,但无统计学意义(P>0.05);高氧化诱导的模型组AD小鼠皮肤TSLP表达显著高于空白组,(P<0.05)，高氧化条件下的中药组和对照组皮肤TSLP表达于模型组无显著差距(P>0.05)3.与空白组比较,模型组小鼠皮肤Nrf2与OH-1表达明显下降(P<0.01);与模型组比较,对照组及中药组小鼠皮肤Nrf2与OH-1表达明显增加,具有统计学意义(P<0.05 或 P<0.01)。Nrf2含量在经过高氧化的AD小鼠中,模型组含量显著低于空白组(P<0.01),对照组显著高于模型组(P<0.05),中药组显著对照组(P<0.05)。OH-1蛋白检测结果与Nrf2蛋白呈平行关系:模型组含量显著低于空白组(P<0.01),对照组显著高于模型组(P<0.01),中药组显著对照组(P<0.01)。4.AD小鼠皮损处TSLP含量经氧化后发现显著高于空白组,尽管未经氧化的AD小鼠皮损TSLP含量模型组同样高于空白组,但经过氧化TSLP含量模型组与空白组的灰度值差距更大,说明氧化对于TSLP的增强作用,TSLP作为AD瘙痒信号,代表AD小鼠烦躁、瘙痒程度,说明了氧化后的AD小鼠更加“心神”不安。5.在实验一中TSLP含量与皮损程度成平行关系,实验二TSLP含量组间无显著差异,TSLP作为重要AD瘙痒信号,说明在单纯的AD发病中“心神”受扰动程度与直接的症状严重程度挂钩,而在氧化之后AD病程中,“心不藏神”的情况下,尽管予中药、对照药进行干预,“心神”难安。结论实验一:龙牡皮炎方对特应性皮炎小鼠的疗效及机制的研究1.AD小鼠氧自由基水平上升,抗氧化能力降低,龙牡皮炎方干预AD小鼠后氧自由基水平可下降并能提升抗氧化能力,同时抗氧化能力提升程度强于降低氧自由基程度。2.AD小鼠模型中,龙牡皮炎方均可在一定程度上改善皮损组织病理,减少TSLP表达,减轻瘙痒水平,并能有效改善血清IgE及细胞因子水平,利于机体的免疫反应由Th2型向免疫平衡转变。实验二:龙牡皮炎方对氧化应激后特应性皮炎小鼠的疗效及机制的研究1.氧化应激状态对于AD小鼠的皮损程度有加重作用并上调细胞炎症因子水平。2.龙牡皮炎方对于AD小鼠ROS的有降低作用(P<0.05)),结合总抗氧化能力数据,中药可能组通过激活其他抗氧化途径,清除了 ROS以外的自由基,从而获得了较好的抗氧化能力,其作用机制可能与Nrf2/OH-1通路激活相关。3.在氧化应激的特应性皮炎小鼠模型中,龙牡皮炎方可有效降低氧化水平,并且高氧化AD小鼠中,未经中药干预的高、低氧化组之间细胞因子水平差值差异性较为显著,而中药干预后差值相对较小,因此本方可以一定程度上减轻氧化所带来的不良影响。

目的 探索急性高容量血液稀释联合术中自体血回输技术对老年全髋关节置换术患者血液保护功能和凝血功能的影响。方法 选取2021年6月至2023年3月金华市中心医院择期行全髋关节置换术患者100例，采用随机数字表法分为研究组和对照组，每组50例。两组均采用全麻，研究组在手术开始前0.5 h从颈内静脉快速输入15 mL/kg的乳酸钠林格注射液和羟乙基淀粉130/0.4电解质注射液（1∶1）进行急性高容量血液稀释，对照组常规速度输注乳酸钠林格注射液，两组患者术中均行自体血回输。分别于入手术室（T0）、手术结束（自体血回输已完成，T_1）、术后24 h(T_2)检测Hb及行血栓弹力图检测评估凝血功能，统计T_1、T_2Hb较T_0Hb下降值，记录术中出血量、术中术后是否有输注异体血，并于术后3、7及30 d随访患者，记录肺栓塞发生率。结果 两组患者术中出血量比较差异无统计学意义（P>0.05）。在T_1、T_2Hb较T_0Hb下降值方面，研究组较对照组均明显减少，差异均有统计学意义（均PSAG<0.05）。在异体血输注比例方面，研究组较对照组明显减少，差异有统计学意义（P<0.TORCH infection05）。两组患者在血栓弹力图检测的凝血功能方面及术后肺栓塞发生率比较差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论 急性高容量血液稀释联合术中自体血回BYL719研究购买输技术对老年全髋关节置换术患者有血液保护作用，减少围术期异体输血，不影响凝血功能且不增加术后肺栓塞发生率，具有重要的临床意义。

背景:先天免疫细胞在抗肿瘤免疫监视和抗肿瘤适应性细胞免疫的发展中至关重要。大量的研究数据表明,先天免疫细胞可经过响应特定的初始刺激进行训练,接受刺激的先天免疫细胞会经历长期的转录组学和代谢水平的改变,以及表观遗传学的重编程,以调整其细胞功能。该过程被称为“训练固有免疫”,这些经过训练的细胞会显示出类似记忆的特征,可以对二次同源甚至异源刺激产生更快速和更强的确认细节反应,表现为免疫反应的增强,例如促炎细胞因子和ROS表达。目前逆转先天免疫细胞的促肿瘤表型的免疫疗法已经成为了一种有吸引力的抗肿瘤方法,由此衍生出来了一种以联合固有免疫与适应性免疫应答为特点的免疫疗法,而训练固有免疫概念的提出,为这种先天免疫与适应性免疫的协同免疫疗法提供了可能。同时训练免疫诱导的先天免疫系统激活也可以增强癌症疫苗的功效,由于目前的治疗性癌症疫苗主要是以刺激机体产针对肿瘤特异性抗原的适应性免疫应答为主,无法克服先天免疫细胞在肿瘤微环境的免疫抑制状态,而训练免疫概念的提出,为克服这一障碍提供了可能性。目前公认胞壁酰二肽(MDP)可以通过与细胞内的受体核苷酸结合寡聚结构域2(NOD2)的结合从而诱导训练固有免疫,β-葡聚糖(β-glucan)同样是一种训练固有免疫的诱导剂,β-glucan信号通过细胞外的dectin-1受体诱导激活训练免疫。以MDP、β-glucan训练免疫诱导作为抗癌策略,与纳米材料联合建立的诱导训练免疫的纳米生物免疫疗法,协同肿瘤特异性的适应性免疫来实现抗肿瘤的策略可能是新一代肿瘤疫苗的研发方向。目的:本课题研究目的是设计开发一种新型的肿瘤疫苗来实现固有免疫与适应性免疫协同的抗肿瘤作用。基于纳米递送系统,利用训练固有免疫的诱导剂联合特异性的肿瘤抗原开发一种可以诱导训练免疫的特异性肿瘤纳米疫苗,从而打破免疫抑制的肿瘤微环境,激发机体高效的先天免疫与适应性免疫应答来实验现抗肿瘤效应,同时评估在使用抗原特异的肿瘤疫苗促进抗肿瘤适应性免疫反应时诱导训练免疫是否有益。方法:首先利用乳液-溶剂蒸发法,制备基于聚乳酸-羟基乙酸共聚物((poly(lactic-co-glycolicinnate antiviral immunity acid),PLGA))的纳米颗粒(E7-MDP-NPs),其中 PLGA 同时包裹从细胞内水平进行训练免疫的诱导剂MDP和特异性肿瘤抗原人乳头瘤病毒(HPV)E7肽形成E7-MDP-NPs。然后利用海藻酸钠水凝胶(ALG)包裹E7-MDP-NPs以及从细胞外水平来训练免疫的诱导剂β-葡聚糖(β-glucan)构成了双相释放系统的治疗性HPV纳米肿瘤疫苗E7-MDP-NPs+β-glucan@ALG。然后利用激光共聚焦,体内示踪,流式细胞技术等评估纳米疫苗促树突状细胞(DC)成熟和活化的能力,同时考察该疫苗的免疫特性及溶酶体逃逸能此网站力,并通过体外的实验及体内的动物模型实验等评估该疫苗的训练免疫特征及其抗肿瘤效应。结果:本课题基于PLGA纳米颗粒协同训练免疫诱导剂MDP、β-glucan及E7肽在ALG的包裹下构成了一种可以诱导训练免疫的治疗性HPV疫苗,该疫苗可以诱导训练先天免疫并引发强大的抗肿瘤适应性细胞免疫应答,明显逆转了肿瘤的生长,甚至完全消除了已形成的肿瘤,具体结果为:(1)纳米疫苗E7-MDP-NPs+β-glucan@ALG可以显著促进DC的抗原摄取和成熟,同时纳米形式的疫苗增加了抗原的溶酶体逃逸能力;(2)ALG以及PLGA纳米颗粒的使用,使得该疫苗对荷载的“训练免疫”诱导剂及肿瘤抗原具有持续的缓释作用;(3)该疫苗在注射部位以“储存库”的形式持续释放训练免疫诱导物β-glucan,以及E7-MDP-NPs,促进了抗原与诱导物的淋巴结递送以及荷载抗原的DCs的淋巴结回流聚集,有效促进淋巴结效应T细胞应答。(4)进一步的体外以及体内研究显示,E7-MDP-NPs+β-glucan@ALG可有效诱导固有免疫细胞产生“训练免疫”特征,分泌促炎性的细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α,并表现独特的免疫记忆特点,即对二次同源或异源刺激有更强的应答;此外,诱导“训练免疫”显著增强了随后纳米疫苗激发的抗原特异的获得性抗肿瘤细胞免疫。(5)在肿瘤模型的免疫干预研究中,E7-MDP-NPs+β-glucan@ALG纳米疫苗显著抑制了 TC-1肿瘤的生长,甚至可逆转并消除已建立的肿瘤。从效应机制上讲,β-glucan协同MDP与肿瘤抗原的纳米递送,成功诱导了体内“训练免疫”,并显著增强了系统及肿瘤局部的适应性抗肿瘤效应细胞CTL的应答,同时下调了免疫抑制的MDSCs水平。结论:本课题创新性提出以诱导“训练免疫”为导向设计疫苗佐剂,协同特异性免疫应答来获得有效的抗肿瘤免疫,研究开发了一种基于双相释放系统的抗肿瘤纳米疫苗,其特点是对训练免疫诱导剂和特定肿瘤抗原的持续缓释和细胞的靶向递送,结果表明纳米疫苗制剂能够诱导训练先天免疫并引发强大的抗肿瘤适应性细胞免疫应答,明显逆转了肿瘤生长,甚至完全消除了已形成的肿瘤。本课题研究提出诱导“训练免疫”可能为开发有效的肿瘤疫苗提供新思路。

目的 观察以超声引导下关节腔内注射高渗葡萄糖(HG)治疗高原地区膝关节骨性关节炎的价值。方法 纳入91例高原地区膝关节骨性关节炎患者共124个病变膝关节，根据治疗药物将膝关节分为20%HG组(n=67)、25%HG组(n=42)及玻璃酸钠组(n=15);比较治疗前、后临床及超声评分，评估疗效。结果 治疗后第12、48周，3prostate biopsy组视觉模拟评分法(VAS)评分均较治疗前降低(P均<0.05),20%HG组和25%HG组Lysholm评分均较治疗前升高(P均<0.05)。25%HG组治疗前与治疗后第12周Lysholm评分差值、治疗前与治疗后第48周VAS评分差值此网站均高于20%HG组(P均<0.05)。20%HG组治疗后第48周关节渗出评分较治疗前降低(P<0.05),治疗后第12及48周滑膜血流评分较STM2457治疗前降低(P均<0.05);25%HG组治疗后第48周关节渗出评分较治疗前降低(P<0.05),治疗后第12及48周滑膜增生和滑膜血流评分均较治疗前降低(P均<0.05);玻璃酸钠组治疗后第48周关节渗出评分较治疗前降低(P<0.05),治疗后第12及48周滑膜增生评分均较治疗前降低(P均<0.05)。结论 超声引导下关节腔内注射HG、尤其注射25%HG对于治疗高原地区膝关节骨性关节炎具有一定价值。

目的：常见的先天性肾上腺皮质增生症（CAH）多以低血钠高血钾为特征，但临床上也会遇到伴有低钾血症的CAH患儿，对这类患儿进行临床分析，总结护理体会，旨在提高临床医护的认识。方法：回顾性分析2015年8月—2019年5月深圳市儿童医院内分泌科收治的8例CAH伴有低钾血症患儿的临床资料。结果：8例CAH患儿的年龄1个月27 d～8岁6个月，男女各4例。CAH的诊断年龄15 d～3AZD6738溶解度岁5个月。诊断21-羟化酶（21-OHD）缺乏、失盐型4例，21-OHD缺乏、单纯男性化1例，11β-羟化酶（11β-OHD）缺乏2例，17-OHD缺乏1例。血钾2.5～3.5 mmol/L，其中，中度低钾3例，轻度低钾5例。病因分析：2例11β-OHD缺乏和1例17-OHD缺FUT-175半抑制浓度乏均与病因有关，2例病程中伴有胃肠炎，丢失过多引起低血钾，1例摄入减少，1例营养不PacBio Seque II sequencing良，胃纳差导致钾摄入减少，1例为氟氢可的松剂量偏大。经积极治疗，护理和宣教后，血钾均恢复正常，无再发低钾血症。结论：当发现CAH患儿发生低钾血症时，需要从CAH的类型、摄入减少、丢失增多、盐皮质激素剂量以及合并疾病等方面进行分析、治疗，积极采取护理措施和宣教。

目的 评估2023年6月在我国（不含香港、澳门特别行政区和台湾地区，下同）发生或者可能由境外输入的突发公共卫生事件风险。方法 根据国内外突发公共卫生事件报告及重点传染病监测等各种资料和部门通报信息，采用专家会商法，并通过视频会议形diABZI STING agonist溶解度式邀请省（自治区、直辖市）疾病预防控制中心专家参与评估。结果 预计2023年6月突发公共卫生事件报告数可能较5月增多，以新型冠状病毒感染、流行性感冒、水痘、其他感染性腹泻病和手足口病等传染病类事件为主。自上次风险评估（2023年5月8日）以来至2023年6月6日，我国本土新型冠状病毒感GSK2118436配制染疫情呈现先波动上升后下降趋势；XBB系列变异株为境内疫情主要优势流行株；疫情对医疗秩序和社会正常运行影响较小；预计6月蘑菇中毒事件继续增多；预计6月高温中暑病例继续增多；根据既往报告情况，预计6月手足口病疫情将呈上升趋势；预计6月全国treatment medical发热伴血小板减少综合征仍将处于高水平阶段。结论 对新型冠状病毒感染予以特别关注，对蘑菇中毒、高温中暑、手足口病、发热伴血小板减少综合征予以一般关注。

目的:观察慢性心力衰竭急获悉更多性失代偿期(ADHnuclear medicineF)患者治疗前后血清乙酰肝素酶(HPSE)水平变化，研究慢性心力衰竭患者疗效与血清HPSE水平变化的相关性。方法:选取住院的ADHF患者50名纳入心衰治疗组，同期住院的有基础心脏病但尚未达到心衰程度的30名患者作为试验对照组，以及同期体检的30名健康正常人纳入正常对照组。观察心衰治疗组治疗前后血清HPSE的变化及与N端脑钠肽前体(N terminal pro brain natriuretic peptide, NT-proBNP)的相关性。结果:心衰治疗后较治疗前血HPSE和NT-proBNP水平均明显降低(P<0.05);治疗前血清HPSE水平高于试验对照组及正常对照组；治疗后血清HPSE指标高于正常对照组(P<0.05),与试验对照组无显著差异(P>0.05)。Pearson相关分析提示治疗前后血HPSE和NT-proBNP水平呈正相关。结论:ADHF患者血清HPSE水平显著增高，纠正心衰后指标明显下降，且与血NT-proBNP水平呈正相关，血清HPSE水平可能与心衰严重此网站程度有相关性。

作为一种天然多糖,透明质酸(Hyaluronicacid,HA)的来源广泛,生物活性良好,无论是在医药还是生活方面都得到了极大的应用。目前卫建委已经批准透明质酸钠作为食品添加原料,但由于HA的分子量差异较大导致生物活性也存在差异。因此,阐明不同分子量的HA口服转运机制,将为更好地发挥其生物学活性提供理论指导。本实验室前期成功建立了 5天Caco-2细胞单层模型,在此基础上,采用异硫氰酸荧光素(Fluoresceine isothiocyanate,FITC)标记的方法合成 10kD、40～100kD 和 100～200kD 的 FITC-HA,来研究不同分子量HA的口服转运效果和机制的差异性,为HA 口服吸收的分子量选择提供实验依据。本课题取得的主要成果如下:1.不同分子量HA的荧光标记和结果验证本实验通过酪胺法和还原胺化法将10 kD、40～100 kD和100～200 kD的HA与FITC进行缀合,然后使用透析和AKTA Pure对粗产物进行分离纯化和初步检测,再利用琼脂糖凝胶电泳、多功能酶标仪、苯酚硫酸法验证了纯化产物的荧光吸收和糖含量,证明三种不同分子量的HA已经被成功标记,并得到10 kD、40～100 kD和100～200 kDFITC-HA的单位摩尔标记量平均值分别为25.19、11.24、6.22。2.5天Caco-2细胞单层模型的优化通过在7天Caco-2细胞单层模型基础上添加50μg/mL岩藻聚糖硫酸酯建立了 5天模型,并确认了该5天模型与7天模型在跨膜电阻值、碱性磷酸酶活性和渗透性标志物荧光黄、FITC、转铁蛋白和葡聚糖的转运效果上不存在差异。然后在5天模型上首次进行了体外大分子药物(上述合成的FITC-HA)和小分子药物阿霉素(Doxubicin,DOX)的转运实验,并与7天模型中的实验结果进行对比,针对HA转运结果的差异性,对5天模型提出使用方法优化,使10kD和100～200kDFITC-HA在该模型中的转运情况得到大幅改善,显示可以被良好吸收,表观渗透系数(Apparentpermeability coefficient,Papp)分别为3.02×106 cm/s和2.33×106 cm/s。还对比了葡聚糖、转铁蛋白以及小分子药物DOX在优化模型与7天模型中的转运结果,显示没有差异,这说明优化方法是符合Caco-2细胞单层模型使用标准的,也为其他药物的体外转运实验提供了更高效的模型选择。3.不同分子量HA在Caco-2细胞单层模型中的转运机制研究在优化模型中研究了 10kD和100～200kD两种属于不同分子量量级的HA在肠上皮细胞中的转运效果和机制,结果表明Caco-2细胞对10kD和100～200kDHA的摄取量会随着时间增多,且需要消耗能量,但随着时间延长会出现外排情况,转运量不会一直增加,这说明细胞上的转运载体数量有限会出现饱和,同时二者由于分子量差异导致转运效果也有明显不同,10 kD HA会比100～200 kD HA的转运效果更好,Papp值也Canagliflozin molecular weight更高。随着抑制剂氯丙嗪(Chlorpromazine,CPZ)和 Dynamin GTPase 抑制剂(Dynasore)的加入,10 kD 和 100～200 kD FITC-HA 的 Papp 值分降低了 84.61%和 28.15%、41.41%和60.06%,但是甲基-β-环糊精(Methyl-β-cyclodextrin,MβCD)对 10 kD 和 100～200 kD FITC-HA几乎没有影响,这说明10 kD和100～200 kD FITC-HA的转运可能受网格蛋白介导的内吞途径影响,但是受小窝(脂筏)蛋白的作用比较小。对于巨胞饮途径,在给药 TRPP3 channel 抑制剂(TRPP3 channel inhibitor,EIPA)后,10 kD 和 100～200 kD FITC-HA的转运抑制率分别为6.18%和89.25%,表现出明显差异;对于胞内转运过程,在加入莫能菌素(Monension)后,二者的转运抑制率分别为89.99%和60.47%,这表明10 kD和100～200 kD HA的转运可能都和内体酸化到溶酶体成熟的过程有关;对比加入诺考达唑(Nocodazole)后,100～200kDHA转运率下降了 82.26%,但对10 kDHA影响不大,这说明还有一部分100～200 kDHA是依赖微管蛋白在胞内进行迁移转运的。综上所述,本实验课题用FITC对10 kD、40～100 kD和100～200 kD的HA进行了荧光标记,在优化后的Caco-2细胞单层模型中研究了 10kD和100～200kD的FITC-HA的转运机制以及差异性,结果表明10 kD和100～200 kD HA的转运都是时间和能量依赖性的,但10 kDHA的转运效果明显Others抑制剂更高。在内吞途径中,10kD和100～200kD HA都表现出网格蛋白依赖性的胞吞转运机制,同时100～200 kD HA也依赖巨胞饮作用;在Caco-2medial entorhinal cortex细胞内的转运过程,10kD和100～200 kDHA都受内体酸化的影响,同时还有部分100～200 kD HA依赖于微管蛋白的介导转运。本课题全面阐述了不同分子量HA 口服吸收转运机制以及差异性。

为探明枸杞单株芽叶的适制茶类，本研究将2种枸杞单株芽叶分别用绿茶和白茶加工工艺，制成4种枸杞芽叶茶，并采用顶空固相微萃取-气相色谱-飞行时间质谱联用技术（HS-SPME-GC-TOF-MS）、生化成分分析和感官审评法，结合主成分分析(principal component analysis，PCA)、香气活度值(odor activity value，OAV)及多元统计分析4种枸杞芽叶茶的风味特征。结果表明，M单株加工的绿茶感官品质得分最高，其次是M和A单株分别加工的白茶，而A单株selleck SAG加工的绿茶Biological data analysis得分最低。M单株加工的绿茶总酚和类黄酮含量最高，A单株加工的绿茶水浸出物含量最高。4种茶中共检测出58种挥发性物质，其中香叶基丙酮、正己醇、二氢猕猴桃内酯、苯乙醇、苯甲醇、萘、α-松油醇为AB、MB呈现花香、清香的特征香气成分；1-辛烯-3-醇为AL呈现果香的特征香气成分；2，5-二甲基吡嗪、3，5-辛二烯-2-酮、β-环柠檬醛、苯甲醛、乙酸叶醇酯、乙酸己酯为ML呈现花果香、清香的特征香气成分。可见M单株适制绿茶、白茶，A单株适制白茶，A、M单株加工白茶呈花香、清香的风味特征，A单株加工绿茶呈果香的风味特征，M单株加工绿茶呈花果香、清香的风味特征。本研究明确了枸杞A、M单株适制茶类及枸杞芽叶茶GSK1120212的风味特征，为枸杞芽叶茶的利用提供参考。