RAF信号通路

目的明确SIRT1下调在聚苯乙烯纳米塑料(PS-NPs)引起的肺泡上皮细胞(AECs)线粒体功能障碍和肺纤维化中的作用,阐明PS-NPs损伤AECs线粒体功能的上游分子事件,揭示SIRT1下调参与上述分子事件的作用方式和调控机制。材料和方法使用咽后壁滴注法建立小鼠PS-NPs呼吸道暴露模型,通过Masson染色和天狼星红染色等方法评估肺组Trichostatin A使用方法织纤维化水平,检测AECs中SIRT1表达水平及线粒体功能变化。构建体外PS-NPs暴露AECs模Erastin体外型,检测细胞毒性与线粒体功能相关指标,明确PS-NPs对线粒体功能的影响。检测PS-NPs对SIRT1表达的影响,并从转录、翻译、蛋白质降解等角度阐明SIRT1的调控机制。应用蛋白质谱技术结合免疫沉淀等方法明确SIRT1的相互作用蛋白。最后,通过体内外过表达SIRT1来验证其下调介导PS-NPs诱导AECs线粒体自噬功能障碍及肺纤维化的作用。结果 4周PS-NPs呼吸道暴露可引起小鼠肺组织发生肺纤维化,AECs线粒体功能障碍及SIRT1表达下调。PS-NPs可以诱导体外肺泡上皮细胞活力下降、线粒体功能障碍和SIRT1下调。而在小鼠肺AECs上特异性过表达SIReggshell microbiotaT1能有效减轻PS-NPs诱导的肺纤维化和线粒体功能障碍。体外过表达SIRT1减轻PS-NPs诱导的细胞毒性和线粒体损伤。PS-NPs促进SIRT1经由蛋白酶体降解,提示PS-NPs通过泛素蛋白酶体降解调控SIRT1表达。通过蛋白质谱及免疫共沉淀对SIRT1的互作蛋白鉴定PHB2(线粒体自噬受体)是SIRT1的新互作蛋白。SIRT1抑制剂或PS-NPs暴露增加了PHB2的乙酰化水平,提示SIRT1作为PHB2的乙酰基转移酶,调控PHB2的乙酰化。结论纳米塑料促进SIRT1蛋白酶体降解,继而诱导线粒体损伤,肺泡上皮细胞受损,最终促进肺纤维化发生。该过程可能与PHB2乙酰化调控有关。

近年来，呼VDA抑制剂吸系统疾病的发病率在不断上升，中医可CB-839细胞培养从肺肠合治入手治疗呼吸系统疾病，宣白承气汤由生石膏、杏仁、生大黄、瓜蒌皮组成，具有清肺定喘、通腑化痰的功效，是肺肠合治的经方。本文对宣白承气汤及其加减方治疗呼吸系统疾病近五年的研究进展进行综述。临床研究表明，宣白承气汤可以从清除内毒素，减少炎症因子，提高免疫力，保护肠黏膜屏障，调节肠道菌群等方面，来恢复患者的肺脏功能和肠道功能，达到肺肠同治的效Strategic feeding of probiotic果。实验研究表明，减轻炎症反应是宣白承气汤治疗呼吸系统疾病的核心作用机制，可通过抑制炎症细胞分泌，降低炎性因子水平，调节相关通路蛋白表达抑制其相应炎症反应，调节免疫能力减轻炎症损伤，调节肠道菌群，修复肠道损伤黏膜等途径来缓解肺部和肠道炎症从而达到肺肠同治的目的。本文既为“肺与大肠相表里”的经典理论提供基础研究和临床证据，又为呼吸系统疾病的临床治疗及新药研发提供新思路。

外泌体是一类由细胞分泌至胞外的囊泡，生物发生主要涉及细胞质膜的两次内陷、多囊泡体的形成以及外泌体的释放。外泌体具有丰富多样的内含物，包括一些标志性膜蛋白、可溶蛋白、各类RNA分子和DNA片段等。细胞可以通过分泌和接受外泌体来实现细胞间的信号交流，外泌体通过膜上携带Direct medical expenditure的配体分子与其他细胞质膜表面的受体相互作用，从而NVP-TNKS656核磁激活细胞的信号转导或与受体细胞质膜发生融合释放内容物进入胞质来发挥调节功能。在中枢神经系统中，神经元及各类神经胶质细胞分泌的神经外泌体可以介导布线式的突触信号传递，但主要还是以容积传递的方式发挥类似神经调质的功能。本文详细阐述了外泌体的生物发生过程及部分重要的功能性成分，就神经外泌体在发生、内容物分选和受控释放三个方面的RP56976研究购买特性与突触囊泡进行比较，总结了神经外泌体在中枢神经系统中发挥的生理功能及其在神经退行性疾病和抑郁症发生、发展中作用的研究进展，并对外泌体在神经系统疾病早期诊断及靶向治疗方面的应用前景进行了展望。

为探究罗汉果山柰苷对慢性睡眠剥夺小鼠抗氧化能力的影响，本试验将56只4周龄无特定病原体（SPF）级雄性ICR小鼠作为研究对象，适应性饲养1周后，按体质量随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、二甲基亚砜（DMSO）对照组以及低、中、高浓度罗汉果山柰苷组，每组8只，每组4个重复，每个重复2只，组间体质量差异不显著（P>0.05）。对除空白对照组外的其他试验组小鼠进行4周的慢性睡眠剥夺，造模成功后灌胃4周，其中空白对照组和模型对照组小鼠每日灌胃0.5 mL生理盐水，阳性对照组小鼠每日灌胃30 mg/kg BW的褪黑素，DMSO对照组小鼠每日灌胃0.5 mL的1%DMSO溶液，低、中、高浓度罗汉果山柰苷组小鼠每日分别灌胃15、30、60 mg/kg BW的罗汉果山柰苷。灌胃结束后测定小鼠体质量、胴体质量、心脏质量、肝脏质量和体脂含量，并测定小鼠心脏和肝脏中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）、血红素加氧酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)活性与总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDC59生产商A）含量，以及抗氧化相关基因核转录因子E2相关因子2(Nrf2)、SOD-1、SOD-2、GPX-1、GPX-4、HO-1、NQO1的mRNA相对表达量。结果显示：与模型对照组相比，每日灌胃15、30、60 mg/kg BW罗汉果山柰苷均可显著降低慢性睡眠剥夺小鼠的体质量、体脂率（P<Molecular Biology Reagents0.05），显著改善慢性睡眠剥夺小鼠的心脏指数和肝脏指数（P<0.05）。低、中、高浓度罗汉果山柰苷组慢性睡眠剥夺小鼠心脏中SOD、GPX、HO-1、NQO1活性均显著高于模型对照组和DMSO对照组（P<0.05）,MDA含量显著低于模型对照组和DMSO对照组（P<0.05）。中、高浓度罗汉果山柰苷组慢性睡眠剥夺小鼠心脏中T-AOC均显著高于模型对照组和DMSO对照组（P <0.05）。中、高浓度罗汉果山Adavosertib柰苷组慢性睡眠剥夺小鼠肝脏中SOD、GPX、HO-1、NQO1活性和T-AOC均显著高于模型对照组和DMSO对照组（P<0.05）,MDA含量显著低于模型对照组和DMSO对照组（P<0.05）。中、高浓度罗汉果山柰苷组慢性睡眠剥夺小鼠心脏和肝脏中SOD-1、SOD-2、GPX-1、GPX-4、Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA相对表达量均显著高于模型对照组和DMSO对照组（P<0.05）。综上所述，罗汉果山柰苷能显著提高慢性睡眠剥夺小鼠心脏和肝脏中抗氧化酶活性及抗氧化相关基因的表达，改善慢性睡眠剥夺小鼠的氧化应激损伤，提高其抗氧化能力。

[目的]探究肺炎衣原体(C.pn)感染诱导血管平滑肌细胞(VSMMK-2206 NMRC)焦亡及其可能机制。[方法]组织贴块法培养大鼠原代VSMC,利用C.pn感染VSMC模型，使用倒置相差显微镜观察C.pn感染后VSMC形态学的变化，试剂盒检测C.pn感染VSMC后乳酸脱氢酶(MLN4924 NMRLDH)含量变化，Western blot实验检测GSDMD和Caspase-1的表达，串联质谱标签法定量蛋白质组学实验和GO富集分析检测线粒体氧化磷酸化和氧化呼吸链Complex相关蛋白的变化。[结果]与对照组相比，倒置相差显微镜下可见C.pn感染后VSMC膜外出现气泡状囊泡，C.pn感染VSMC 36 h、48 h后LDH含量分别增加38.92%和79.54%(均Peffective medium approximation<0.001),焦亡相关蛋白GSDMD表达增加1.74倍和1.67倍(均P<0.001);C.pn感染VSMC 48 h后Caspase-1表达(pro-Caspase-1)和活性(Caspase-1 p12/p10)分别增加2.69倍和3.47倍(均P<0.001);质谱结果显示，C.pn感染VSMC后有20种差异表达的蛋白质富集在氧化磷酸化通路中，同时发现，ComplexⅠ泛醌氧化还原酶铁硫蛋白4(NDUFS4)下降最为显著。进一步的Western blot实验结果显示，C.pn感染VSMC 36 h、48 h后NDUFS4的表达水平分别下降了57.5%和57%(均P<0.001)。[结论]C.pn感染可能通过抑制NDUFS4表达影响线粒体功能，从而诱导VSMC焦亡。

目的 基于生物信息学探讨葛根芩连汤(GGQL)治疗溃疡性结肠炎(UC)的作用靶点及作用机制。方法 检索TCMSP数据库得到方剂中各药物的有效成分及靶基因；再检索OMIM数据库、DisGeNET数据库获得疾病的基因，将药物基因与疾病基因取交集得到核心基因；采用STRING数据库构建基因功能关联网络；采用DAVID数据库进行GO富集分析和通路富集分析。结果 共获得有效成分278种，靶点410个，疾病基因914个；将药物基因与疾病基因取交集共得到113个核心基因，然后采用STRING数据库构建基因功能关联网络，将网络信息数据导入Cytoscape软件进行拓扑分析发现IL6、STAT3、IL1B、VEGFA、MAPK1、EGF、PTGS2、selleckEGFR、ICAM1、MMP9等靶点度值较高，可能是核心靶点；使用DAVID数据库对靶点进行Gbiocide susceptibilityO获悉更多富集分析共得到16个富集的生物过程聚类，通路富集分析共获得26个富集的通路聚类，其中与炎症密切相关并且联系靶点较多的通路有TNF信号通路和炎症性肠病信号通路。结论 研究初步得到了GGQL治疗UC的作用靶点以及作用通路，结合已发表的相关研究认为GGQL可能通过TNF信号通路发挥作用。

为了探索基于胰岛素信号通路的无脊椎动物内分泌干扰性基因标志物，以伸展摇蚊(Chironomus tentans)为模式生物，在转录组测序基础上识别胰岛素信号通路中的关键基因，并针对InR、Pdk、Akt、FoxO等上游基因进行了cDNA全长扩增和氨基酸序列的多物种比对。基于该研究获取的cDNA全长序列，伸展摇蚊InRpre-existing immunity、Pdk、Akt、FoxO基因可分别编码含1 436、522、520、470个氨基酸的蛋白序列，序列同源性GSI-IX体外比对、系统发育树分析结果验证了其进化保守性。伸展摇蚊Ⅰ～Ⅳ龄selleck产品幼虫、蛹、雌性成虫、雄性成虫中基因相对表达量的实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测结果表明，InR、Pdk、Akt、FoxO在伸展摇蚊体内的表达趋势相似。Ⅰ龄和Ⅳ龄幼虫的基因表达峰值提示胰岛素信号在Ⅰ龄和Ⅳ龄幼虫中诱导了较快的生长发育速率；雌性成虫InR、Pdk、Akt、FoxO的表达显著高于雄性，这可能与胰岛素信号参与雌性生殖系统发育有关。

目的 探讨MET通过激活AMPK信号通路对急性PQ中毒致大鼠肺纤维化的保护作用。方法 健康成年SBOD biosensorPF级雄性SD大鼠30只，随机分为五组，对照组(Control组)、PQ中毒组(PQ组),二甲双胍干预组(PQ+MET组),腺苷类似物组(PQ+AICAR组)和复合物C组(PQ+MET+CC组)。干预21 d后取大鼠肺组织匀浆分别检测Hyp、SOD、GSH-px和MDA的含量，Masson染色和透射电镜观察大鼠肺组织病理变化，Western-blotting观察大鼠肺组织Phospho-AMPK、TGF-β1、E-cadherin和α-SMA蛋白的表达。结果 与PQ组比较，PQ+MET组和PQ+AIC购买Liproxstatin-1AR组明显降低了Hyp和MDA含量，差异有统计学意义(P<0.05),提高了SOD和GSH-px水平，差异有统计学意义(均P<0.05)。肺组织Masson染色和透射电镜结果示，PQ组21 d时可见肺泡壁增厚，肺泡腔挤压变形，基质增厚，支气管周围及肺泡间隔的胶原纤维增多，而PQ+MET组和PQ+AICAR组较PQ组明显减轻。W点击此处estern-blotting结果示，与PQ组比较，PQ+MET组和PQ+AICAR组的TGF-β1和α-SMA蛋白含量明显减少，差异有统计学意义(P<0.05),而Phospho-AMPK和E-cadherin蛋白明显增高，差异有统计学意义(均P<0.05);使用AMPK抑制剂后，PQ+MET+CC组较PQ+MET组TGF-β1和α-SMA蛋白升高，差异有统计学意义(P<0.05),而Phospho-AMPK和E-cadherin蛋白降低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 二甲双胍可以减轻PQ中毒大鼠肺纤维化，其机制与激活AMPK信号通路，下调TGF-β1来改善上皮-间质转化有关，而这一效应可以被AMPK抑制剂CC所抑制。

目的 研究大黄素对高糖条件中的人肾www.selleck.cn/products/forskolin小球血管内皮细胞(HRGEC)炎症、凋亡和氧化应激水平的影响及其可能的作用机制。方法 将体外培养的HRGEC随机分为对照组、模型组和低、中、高浓度实验组。对照组给予5 mmol·L~(-1)葡萄糖处置；模型组给予30 mmol·L~(-1)葡萄糖处置；低、中、高浓度实验组分别给予30 mmol·L~(-1)葡萄糖+5、10、20μmol·L~(-1)大黄素处置。用CCK-8法检测细胞存活率，用试剂盒检测氧化应激指标和炎症因子的水平，用蛋白质印迹法检测凋亡及相关通路蛋白的表达水平。结果 中、高浓度实验Empagliflozin核磁组和模型组、对照组的HRGEC存活率分别为(83.47±1.71)%、(95.61±2.18)%、(65.83±1.82)%和(100.00±2.34)%,丙二醛分别为(8.54±0.96)、(5.84±0.67)、(15.58±1.67)和(4.32±0.84)μmol·g~(-1),活性氧分别为(30.39±3.43)、(24.64±2.15)、(58.48±4.47)和(18.76±2.12)μmol·g~(-1),白细胞介素-1β分别为(36.47±1.28)、(30.92±1.61)、(49.81±2.31)和(28.73±1.62)pg·mL~(-1),肿瘤坏死因子-α分别为(37.14±2.42)、predictive protein biomarkers(26.73±1.54)、(55.41±3.72)和(22.73±2.11) pg·mL~(-1),血红素加氧酶1蛋白相对表达水平分别为0.41±0.09、0.19±0.02、0.98±0.12和0.54±0.12,核因子E2相关因子2蛋白相对表达水平分别为0.21±0.03、0.05±0.01、0.93±0.11和0.41±0.02。中、高浓度实验组的上述指标与模型组比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 大黄素能改善高糖条件下HRGEC的存活率，抑制高糖诱导的细胞凋亡及炎症反应，其可能通过抑制Nrf2/HO-1信号通路进而减轻高糖诱导的氧化应激反应。

目的:探讨慢性原发性闭角型青光眼(CPACG)双眼先后行小梁切除术前房水中炎症因子的表达水平及其与术后滤过泡和眼压的相关性。方法:选取202type 2 pathology1-09/12在南京医科大学附属眼科医院就诊并行小梁切除术的双眼CPACG患者15例30眼，双眼手术间隔7d,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测双眼术前房水中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子-β(TGF-β)和干扰素-γ(IFN-γ)点击此处的表达水平，并于术后1mo评估眼压及滤过泡形态。结果:纳入患者第一眼术前房水中MCP-1、IL-17、TGF-β和IFN-γ的含量分别为330.4±46.2、357.3±46.9、2347.5±363.8、527.7±101.6pg/mL,第二眼术前房水中MCP-1、IL-17、TGF-β和IFN-γ的含量分别为298.2±40.7、309.1±53.5、1938.3±426.0、628.2±104.9pg/mL,双眼术前房水中炎症因子表达水平均有差异(P≤0.053-MA)。纳入患者双眼术前房水中IL-17、TGF-β表达水平与术后1mo眼压、滤过泡高度均具有相关性(P<0.05)。结论:CPACG患者第一眼术后第二眼房水中炎症因子的表达水平可能发生一定变化，其中双眼术前房水中IL-17、TGF-β的表达水平与术后眼压和滤过泡高度具有一定的相关性。