RAF信号通路

目的 探究肌微管素相关蛋白6(myotubularin-related protein 6, MTMR6)对人肝癌细胞(HepG2)侵袭能力的影响及潜在的分子机制。方法 在GEO数据库中通过分析肝癌组织与非癌肝组织的测序结果，筛选出差异表达基因MTMR6,随后从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中对MTMR6与通路相关性评分进行Spearman分析，最后通过Genemania数据库分析MTMR6与信号通路蛋白的互作关系。比较MTMR6在人正常肝细胞系(LO-2)和肝癌细胞系(Huh-7和HepG2)中的蛋白表达情况；选取HepG2作为研究对象，沉默或过表达MTMR6基因，运用Transwell实验检测细胞侵袭能力，蛋白免疫印迹实验(Western blot)检测MTMR6、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR、MMP-2和MMP-9蛋白表达。结果 MTMR6基因在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织，并且MTMR6与PI3K/AKT/mTOR信号通路呈正线性相关(P<0.01),MTMR6与PI3K、AKT、mTOR蛋白之间存在互作关系。与LO-2和Huh-7细胞相比，MTMR6在HepG2细胞中的表达水平明显升高(P寻找更多<0.01)。将HepG2细胞中MTMR6基因过表达，细胞侵袭能力明显增强(P<0.01),而将HepGimmune system2细胞中MTMR6基因沉默，细胞侵袭能力明显下降(P<0.01)。沉默MTMR6基因导致PI3K、AKT、mTOR蛋白的磷酸化水平以及MMP-2和MMP-9表达水平下降(P<0.01),而过表达MTMR6则促进PI3K、AKT、mTOR蛋白的磷酸化水平以及MMP-2和MMP-9表达水平升高(P<0.01)。使用特异性PI3K抑制剂LY294002阻断PI3K/AKT/mTOR通路下调MMP-2、MMP-9表达(P<0.01),但对MTMR6表达无影响。结论 MTMR6通过激活PI3K/AKT/mTO购买Wnt-C59R信号通路促进肝癌细胞发生侵袭。

神经退行性疾病(neurodegenerative diseases, NDs)是一类慢性、进行性发展的神经疾病，以特异性神经元的大量丢失为主要特征，主要包括阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)、帕金森病(Parkinpathology competenciesson’s disease, PD)、亨廷顿病(Huntington’s disease, HD)及肌萎缩性脊髓侧索硬化症(amyotrophic lateral sclero此网站sis, ALS)等。虽然不同类型神经退行性疾病的病变部位和病因各不相同，但大脑特定区域的迟发性神经细胞退行性病变、神经元或突触丢失是它们的共同特征，因此统称为神经退行性疾病。由于神经退行性疾病的复杂性、多基因调控性，导致其病因和发病机制尚不明确，因此这类疾病的治疗举步维艰。近年来，斑马鱼(zebrafish)作为一种新型的模式生物，因其神经传导系统、神经元和神经胶质细胞类型及疾病相关基因同源性与人类都十分相似，受到越来越多的关注。目前，斑马鱼已广泛应用于神经退行性疾病的研究，并在此领域研究中已取得一定的成果，提高了我们对神经退行性疾病的认识Pevonedistat体内实验剂量。本文通过查阅近几年国内外相关文献，综述斑马鱼作为模式生物近年来在神经退行性疾病研究中的研究进展。

为探究联吡啶类除草剂敌草快（DQ）Neurological infection对鸡卵巢组织结构及繁殖性能相关基因表达的影响，拟利用不同剂量的DQ诱导母鸡发生氧化应激，本实验将60只180日龄的雌性康乐黄母鸡随机Pidnarulex分子量平均分为对照组和5、15、20 mg/kg DQ组，不同浓度的DQ处理组鸡均采用一次性腹腔注射的方法进行处理。21 d后颈动脉放血处死，迅速采集鸡卵巢组织样品。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测氧化应激相关基因Nrf2、HO-1和Gpx1的表达水平，利用组织抗氧化功能检测试剂盒检测鸡卵巢过氧化氢酶（CAT）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性及丙二醛（MDA）浓度变化情况，利用HE染色法检测氧化应激对卵巢组织结构的影响，利用Western blot技术分别检测B-细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和半胱氨酸蛋白酶3(Caspase3)的蛋白表达量变化，通过qRT-PCR和Western blot技术分别检测母鸡繁殖性能相关基因ZP2和Wnt4的mRNA和蛋白的表达量变化。结果表明：与对照组相比，敌草快组卵巢组织中氧化应激相关分子HO-1、Nrf2和Gpx1的mRNA表达量均下调（P<0.05）,CAT和T-SOD酶活性降低（P<0.05），且MDA浓度升高（P<0.05）;HE染色结果显示，鸡卵巢经DQ作用后，卵泡发育受阻，卵泡颗粒细胞排列稀疏，20mg/kgDQ组出现大量闭锁卵泡，促凋亡相关蛋白Bax和Caspase3的selleck HPLC蛋白表达量上调（P<0.05），而20 mg/kg DQ组抗凋亡蛋白Bcl-2下调（P<0.05），且Bax/Bcl-2的比率上调（P<0.05）；基因ZP2和Wnt4的mRNA及蛋白表达量均下调（P<0.05）。由此可见，DQ能够诱导鸡卵巢组织发生氧化应激，提升卵巢组织细胞凋亡程度，抑制卵泡发育及繁殖性能相关基因的表达。本研究可为进一步探究联吡啶类除草剂对母鸡繁殖性能损伤的具体作用机制提供理论依据。

目的 研究引经药升麻、柴胡对补中益气汤治疗脾虚泄泻的引经增效作用。方法 60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、补中益气汤全方组、补中益气汤缺升麻组、补中益predictors of infection气汤缺柴胡组和补中益气汤缺升麻柴胡组。除正常组外，其余大鼠采用利血平~+大黄~+隔日进食法复制脾虚泄泻大鼠模型。从第3周开始，各组分别灌胃相应药物，正常组和模型组灌胃等体积蒸馏水，连续给药2周。末次给selleck HPLC药后，计算腹泻、脾脏及胸腺指数；苏木素-伊红（HE）法观察空肠组织病理学变化；酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)、胃泌素（GAS）、血管活性肠肽（VIP）水平；流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群CD3~+、CD4~+、CD8~+T淋巴细胞百分比；Western Blot法检测空肠中p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38 MAPK）、闭锁小带蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白（Occludin）的表达。结果 与正常组比较，模型组大鼠腹泻指数、IL-6水平及p-p38 MAPK蛋白表达明显升高（P<0.01），脾脏及胸腺指数、血清IL-10、GAS、VIP、CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+比值、空肠ZO-1、Occludin蛋白表达均明显降低（P<0.01），空肠可见黏膜损伤。与模型组比较，补中益气汤全方组给药后大鼠腹泻指数、IL-6水平、p-p38 MAPK蛋白表达明显降低（P<0.05,P<0.01），脾脏及胸腺指数、血清IL-10、GAS、VIP、CD3~+、CGW-572016D4~+、CD4~+/CD8~+比值、空肠ZO-1、Occludin蛋白表达明显增高（P<0.05,P<0.01），空肠黏膜损伤不同程度地改善，较其他组改善更明显。结论 升麻、柴胡具有增强补中益气汤改善脾虚泄泻大鼠胃肠和免疫功能，修复肠黏膜损伤的效应。

目的 探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)患者血清可溶性共刺激因子B7同源体-4(B7 nomolog 4,B7-H4)、外周血淋巴细胞表面诱导共刺激分子配体(inducible costimulator ligand, ICOSL)的表达水平与核因子KappaB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路中IκB激酶(IκB-kinase, IKK)β间的关系。方法 将2020年4月至2021年12月50例SMolecular genetic analysisLE患者纳入研究组，选取同期来某院一般体检的50例健康人作为对照组，酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测血清B7-H4及诱导性共刺激分子配体(inducible costimulator ligand, ICOSL)表达水平，反转录聚合酶链反应(reverse tran-scription PCR,RT-PCR)法检测NF-κB通路中IKKβ mRNA表达水平。组间比较采用t检验，两两变量的相关性采用Pearson分析，绘制受试者操作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线分析联合B7-H4、ICOSL、IKKβ检测对SLE患者的诊断价值。结果 研究组血清可溶性B7-H4、ICOSL表达水平高于对照组，差异有统计学意义(t=-4.281、-31.439,P<0.05);研究组血清IKKβ mRNA表达水平高于对照组，差异有统计学意义(t=-5.256,P<0.05);Pearson相关系数显示B7-H4、ICOSL与IKKβ mRNA均存在显著正相关关系(r=0.782、0BMN 673价格.766,P<0.05);ROC曲线显示联合检测诊断SLE曲线下面积为0.855,显著高于任意单一检测(Z=3.412,P<0.001),特异度为83.20%,敏感度为89.40%,有较高诊断效能。结论 SLE患者体内存在https://www.selleck.cn/products/Lapatinib-Ditosylate.htmlB7-H4、ICOSL和IKKβ mRNA高表达，3者呈正相关关系，实时检测B7-H4、ICOSL水平能准确评估疾病发展，对改善患者预后及抑制该病进展有重要意义。

目的 采用数据挖掘的方法探究复方专利处方中用于增强免疫力的中药配伍规律,并运用网络药理学、分子对接技术分析其中核心药物的潜在作用机制。方法 挖掘国家知识产权局中药增强免疫力的复方专利数据,进行中药频次、关联规则以及复杂网络分析,并筛选出核心药物。利用TCMSP平台筛选核心药物活性成分并进行靶点预测,于疾病数据库OMIM、DrugBank、GeneCards、Uniprot筛选免疫力相关靶点,获取核心中药与免疫力的交集靶Pexidartinib点;对交集靶点进行蛋白互作(PPI)分析和基因本体(GO)功能及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。使用分子对接技术对药物活性成分、关键靶点进行验证。结果 分析中药复方专利得出5味核心药物:黄芪、人参、枸杞子、茯苓、当归,有效活性成分对应靶点214个,Cellular immune response1 784个免疫力相关靶点,交集靶点55个,关键作用靶点有RELA、TNF、TP53、IL-6。GO分析结果显示主要调控对细菌起源分子的反应、对脂多糖的反应、对生物刺激的反应等。KEGG通路160条,主要涉及脂质与动selleck激酶抑制剂脉粥样硬化、南美洲锥虫病、TNF信号通路、癌症通路等多条信号通路。分子对接结果显示,槲皮素、山柰酚能较好地与RELA、TNF、TP53、IL-6进行结合。结论 专利文献中增强免疫力的中药以补虚药为主,主要有效成分为槲皮素、山柰酚等化合物,以RELA、TNF、TP53、IL-6为关键靶点,通过脂质和动脉粥样硬化、南美洲锥虫病、TNF信号通路、癌症通路等多条通路发挥增强免疫力的作用。

目的 探讨半夏白术天麻汤（BBTD）不同有效部位对H_2O_2损伤的海马神经元（HT22）细胞的保护作用。方法 采用系统溶剂法对BBTD水煎液进行萃取，分别得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位及萃余水相部位，构建H_2O_2诱导损伤的HT22细胞模型，使用MTT法检测细selleck激酶抑制剂胞存活率，筛选BBTD最佳有效GSK2118436试剂部位；通过试剂盒检测活性氧（ROS）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）、线粒体膜电位，Western Blotting法检测Caspase 3、Bax和Bcl-2蛋白表达水平。结果 建立H_2O_2诱导损伤的HT22细胞模型；对BBTD有效部位进行筛选，其中，0.8 mg/mL乙Bioactive borosilicate glass酸乙酯部位促进细胞存活最显著（P <0.01）；模型组ROS、MDA、LDH水平升高，SOD活性降低，线粒体膜电位下降，Caspase 3、Bax/Bcl-2蛋白表达上升（P <0.01,P <0.05），给药组细胞存活率上升，ROS、MDA、LDH水平下降，SOD活性升高，线粒体膜电位上升，Caspase 3及Bax/Bcl-2蛋白表达下降（P <0.01,P <0.05）。结论 BBTD乙酸乙酯部位对H_2O_2诱导的HT22细胞损伤具有保护作用，其机制与抑制Caspase 3/Bax/Bcl-2信号通路有关。

目的:研究牛蒡子苷元调节Hippo-YAP信号通路对宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:将人子宫颈鳞癌细胞SiHa分为对照组、低浓度牛蒡子苷元组（5.0 μmol/L）、中浓度牛蒡子苷元组（10.0 μmol/L）、高浓度牛MK-1775半抑制浓度蒡子苷元组（20.0 μmol/L）、高浓度牛蒡子苷元（20.0 μmol/L）+TDI-011536组（3 μmol/L Hippo信号通路抑制剂）。分组处理后，集落形成实验检测细胞活性；Transwell检测细胞侵袭；划痕实验检测细胞迁移；免疫荧光检测细胞中Vimentin和E-Cadherin；蛋白质免疫印迹技术检测p-YAP、YAP、PCNA、MMP-2蛋白表达。结果:与对照组比较，低浓度牛蒡子苷元组、中浓度牛蒡子苷元组、高浓度牛蒡子苷元组SiHa的细胞存活率、细胞侵袭数、细胞迁移愈合率、细胞中Vimentin荧光强度、YAP、PCNA、MMP-2蛋白表达https://www.selleck.cn/products/azd9291.html均降低，而E-Cadherin荧光强度和p-YAP蛋白表达升高（P<0.05）；与高浓度牛蒡子苷元组比较，高浓度牛蒡子苷元+TDI-011536组SiHa细胞存活率、细胞侵袭数、细胞迁移愈合率、细胞中Vimentin荧光强度、YAP、PCNA、MMP-2蛋白表达升高，而E-CadheCell Culturerin荧光强度和p-YAP蛋白表达降低（P<0.05）。结论:牛蒡子苷元可能通过激活Hippo/YAP信号通路抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖、迁移和侵袭。

背景：慢性创面炎症和氧化应激阻碍了角化细胞的再生，氧化苦参碱具有抗氧化、抗炎等多种生物活性，可能具有促进创面愈合的潜在效应。目的：探讨氧化苦参碱对创面愈合的作用，以及对H_2O_2诱导人角质形成细胞系HaCaT细胞氧化应激损伤的保selleck抑制剂护作用。方法：(1)体内实验：分别制备含0,0.05,0.1,0.2 g/L氧化苦参碱的甲基丙烯酰化透明质酸(HAMA)水凝胶。在75只糖尿病小鼠背中部制作直径12 mm的全层皮肤缺损模型，随机分5组干预，每组15只：模型组创面包扎固定，单纯水凝胶组以HAMA水凝胶覆盖创面，低、中、高剂量氧化苦参碱组分别以含0.05,0.1,0.2 g/L氧化苦参碱的HAMA水凝胶覆盖创面，光固化后包扎固定，14 d内进行相关指标的检测。(2)体外实验：将人角质形成MG132核磁细胞系HaCaT分5组培养，正常组常规培养，H_2O_2组及低、中、高浓度氧化苦参碱组均加入H_2O_2干预4 h，然后分别更换为含0,0Hellenic Cooperative Oncology Group.05,0.1,0.2 g/L氧化苦参碱的培养基，培养24 h后进行相关指标的检测。结果与结论：(1)体内实验：与模型组比较，单纯水凝胶组小鼠创面愈合率无明显变化，低、中、高剂量氧化苦参碱组治疗后7,14 d的创面愈合率升高(P <0.05)。治疗后14 d的创面样本切片病理观察显示，与模型组相比，中、高剂量氧化苦参碱组再生表皮层厚度、显微血管数量与胶原沉积均增加(P <0.05)。术后7 d的创面样本Western blotting检测显示，与模型组相比，中、高剂量氧化苦参碱组肿瘤坏死因子α与白细胞介素6的蛋白表达降低(P <0.05)。(2)体外实验：CCK-8检测、EdU及Ki67染色显示，与H_2O_2组相比，中、高浓度氧化苦参碱组细胞增殖能力明显升高(P <0.05)。与H_2O_2组相比，中、高浓度氧化苦参碱组线粒体膜电位升高(P <0.05)、活性氧含量降低(P <0.05)。Western blotting检测显示，与H_2O_2组相比，高浓度氧化苦参碱组Nrf2核蛋白、Nrf2总蛋白、HO-1蛋白及超氧化物歧化酶1蛋白的表达增加(P <0.05)。(3)结果表明：氧化苦参碱能够通过上调Nrf2、HO-1蛋白减轻HaCat细胞的氧化应激损伤，加速创面愈合。

目的 基于TMT-PRM技术研究慢性间歇性低氧大鼠肾脏组织的蛋白质组学，筛选差异表达蛋白以鉴定潜在的生物标志物。方法 将20只SD大鼠随机分为正常组、实验组（n=10）。实验组放入低氧舱内建立慢性间歇性低氧（CIH）大鼠模型。12周后采集肾脏样本，HE染色观察大鼠肾组织形态变化；提取蛋白并酶解和TMT标记，采用LC-MS/MS鉴定蛋白，软件Proteome Discoverer2.4处理数据，进行生物信息学分析，以倍数变化1.2以上或低于0.83为标准，t检验P<0.05作为差异表达蛋白，并应用PRPF-03084014 molecular weightM技术验证候选蛋白的表达情况。结果 CIH引起肾脏损伤，肾小球形态不规则，肾小管上皮细胞肿胀等。实sonosensitized biomaterial验组与正常组比较，筛选出差异表达蛋白有31种，其中表达上调的22种，表达下调的9种。GO功确认细节能富集分析显示差异表达蛋白主要参与细胞黏附、缺氧应激、钙离子等生物学过程。KEGG通路富集分析结果显示差异表达蛋白涉及PPAR、AMPK、代谢途径等信号通路。PRM相对定量分析的目标蛋白中进行筛选，P07379(PCK1)、P19132(Fth1)、Q5XI79(Ndufaf7)3个蛋白与TMT定量蛋白质组结果趋势一致。结论 应用TMT-PRM技术在慢性间歇性低氧大鼠肾组织筛选出差异表达蛋白有31种，其中P07379(PCK1)、P19132(Fth1)、Q5XI79(Ndufaf7)可能是与慢性间歇性低氧大鼠肾损伤密切相关的关键蛋白。