RAF信号通路

目的 以二血管(2-VO)法制作血管性痴呆(VaD)大鼠模型，探讨神经元自噬及相关信号通路的变化及外源性硫化氢(H_2S)的神经保护作用。方法 改良2-VO结扎SD大鼠双侧颈总动脉制作VaD模型，按缺血进程急性缺血期、缺血损伤期、损伤恢复期共设置1、7、30 d 3个时间段，每个时间段各有假手术(Sham)组、模型(VaD)组、阳性对照[尼莫地平(Nimodipine)组、硫氢化钠(NaSH)低剂量(Low-NaSH)组、NaSH高剂量(High-NaSH)组。为保持药物处理时间一致，1 d及7 d,各组术前灌胃给药30 d, 30 d各组术后灌胃给药30 d, VaD组和Sham组生理盐水灌胃，Nimodipine组Nimodipine灌胃给药，Low-NaSH组、High-NaSH组NaSH灌胃给药。利用水迷宫检测30 d各组学习记忆能力。Western印迹检测海马神经元线粒体蛋白中Beclin1、P62、蛋白激酶B(Akt)、P-Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、P-mTOR表达。结果 术后1 d,与Sham组比较，VaD组Beclin1、P-Akt、P-mTOR表达显著降低；与VaD组比较，不同剂量NaSH组Beclin1表达显著降低，Nimodipine组及不同剂量NaSH组P-Akt表达显著降低(P<0.01,P<0.05)。术后7 d,与Sham组比较，VaD组P62、P-Akt、P-mTOR表达显著降低，Beclin1表达显著升高；与VaD组比较，Nimodipine组及不同剂量NaSH组P62表达显著升高、Beclin1表达显著降低，不同剂量NaSH组P-Akt表达显著升高，High-NaSH组P-mTOR表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。术后30 d,与Sham组比较，VaD组Beclin1、P62表达显著升高，P-mTOR、P-Akt表达显著降低；与VaD组比较，Nimodipine组及不同剂量NaSH组Beclin1、P62表达显著降低，P-mTOR、P-Akt表达显著升高；与Low-NaSH组比较，High-NaSH组Beclin1、P62表达显著降低VP-16，P-mTOR、P-Akt表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论 缺血再灌注会导致神经确认细节细胞线粒体功能受损，且引发线粒体自噬，外源性H_2S可减轻VaD大鼠海马神经元线粒体自噬程度并保护线粒体功oral pathology能，从而改善VaD大鼠学习记忆功能，推测其保护作用是通过上调磷脂酰肌醇3蛋白激酶(PI3K)/Akt/mTOR信号通路实现的。

目的 调查抑郁障碍住院患者的治疗情此网站况，探究首发与复发抑郁药物治疗情况有何不同。方法 通过京津冀精神卫生数据平台对2018年1月至2019年12月在河北省精神卫生中心住院治疗的抑郁障碍患者治疗相关数据进行回顾性分析，描述首发与复发抑郁患者一般资料情况，治疗情况及相关药物使用情况。结果 1492例患者中，首发抑郁与复发抑郁在伴有躯体疾病、住院天数、抗精神病药、抗焦虑药、抗抑郁药数量方面比较，差异有统IACS-010759 MW计学意义(P<0.05)。两组在抗抑郁药联合抗焦虑睡眠药比较差异有统计学意义(P<0.05);联合抗精神病药比较差异均有统计学意义(P<0.01);2种抗抑郁药基础上再使用抗精神病药比较差异均有统计学意义(P<0.01);而在联合使用心境稳定剂方面比较差异无统计学意义(P>0.05)。在抗抑郁药分类使用上，首发抑郁选用SSRIs类药明显高于复发抑郁；复发抑郁在使用SNRIs类、NASSA类上要高于首发抑郁。结论 复发抑郁与首发routine immunization抑郁相比，复发抑郁伴躯体疾病的比率更高，住院天数更长；在抗抑郁治疗方面复发抑郁联合使用抗焦虑失眠药、抗精神病药更突出，联合用药几率更高。临床医生需关注复发抑郁在治疗中联合用药躯体健康、药物不良反应发生的风险，增加非药物治疗、全病程药物监测及用药指导。

目的 分析接受内镜下黏膜剥离术（ESD）治疗的早期胃癌患者幽门螺杆菌（Hp）感染及耐药情况。方法 选择430例行ESD治疗的早期胃癌患者，对患者进行13C尿素呼气试验，判断Hp感染情况。收集患者临床病理资料，采用多因素Logistic回归分析Hp感染的circadian biology危险因素。对Hp感染患者ESD手术切除病变前行放大内镜评估并切除胃体、胃窦黏膜组织，采用平皿掺入法进行Hp菌株培养和鉴定，采用琼脂稀释法对获得的Hp菌株进行常用抗菌药物的体外敏感性试验。结果 430例患者中，Hp感染318例，Hp感染率为73.95%。有家族史、组织分化程度为分化型、浸润深度为黏膜下癌、周围黏膜高度萎缩、有肠化、高度异型增生患者的Hp感染率分别高于无家族史、组织分化成为为未分化型、浸润深度为黏膜内癌、周围黏膜中低度萎缩、无肠化、低度异型增生患者（P均<0.05）。家族史、浸润深度、周围黏膜萎缩程度、有无肠化、有无异型增生是早期胃癌患者Hp感染的独立影响因素（P均>0.05）。取318例Hp感染患者的胃黏膜组织进行培养，共分离出248株Hp菌株。药敏试验显示，248株Hp菌株对甲硝唑耐药率97.98%，克拉霉素耐药率57.67%，左氧氟沙星耐压率61.69%，阿莫西林、呋喃唑酮、四环素耐药率均为0。寻找更多其中0.81%的菌株对6种抗生素均敏感，25%的菌株对单一抗生selleck抑制剂素耐药，30.24%的菌株对两种抗生素耐药，43.95%的菌株对3种及以上抗生素耐药。结论 早期胃癌患者Hp感染率较高，有家族史、深度浸润、周围黏膜重度萎缩及伴有肠化、异型增生是早期胃癌患者Hp感染的危险因素；早期胃癌患者感染的Hp菌株对甲硝唑耐药率高，阿莫西林、呋喃唑酮、四环素可作为根除治疗的首选药物。

河道疏浚底泥在工业化处理过程中会产生大量余水，其含有较高浓度的氨氮、总氮、化学需氧量（COD_(Cr)）以及重金属等有害物质receptor-mediated transcytosis，如不对其进行有效处理，将会对受纳水体造成严重污购买CX-5461染。采用固定化微生物技术，设计了处理量50 t/d的多级接触氧化装置，对疏浚底泥余水进行处理。结果表明，该工艺对氨氮和总氮的去除率可分别达到91.21%和59.00%，出水可满足地表水准Ⅳ类标准。基于分子生物学方法研究了selleck抑制剂多级接触氧化装置中功能微生物的丰度和群落多样性，结果表明反硝化功能基因narG、napA、nirS、cnorB、nosZ的丰度在前3级反应池中占主导地位，充分保障了系统的反硝化功能，该结果通过16S rRNA群落结果分析以及PICRUSt功能预测得到了进一步证实。定量PCR和群落结构分析表明氨氧化细菌（AOB）和完全氨氧化菌（CAOB）可能是系统中的主要氨氧化微生物。AOB主要来源于N. oligotropha分支，亚硝酸盐氧化细菌（NOB）主要来源于Nitrospira lineage Ⅰ，两者均在好氧池中得到了富集。因此，固定化微生物技术可实现对硝化细菌和反硝化细菌的富集，增强系统的抗冲击负荷能力，对疏浚底泥余水处理具有重要的参考意义。

目的：探讨重楼皂苷I（Polyphyllin I，PPI）对人肝癌细胞HCCLM3增殖、迁移、侵袭的影响及其机制研究。方法：CCK8方法检测PPI对HCCLM3细胞活力抑制作用；克隆形成实验观察PPI和Sorafenib对HCCLM3细胞增殖能力影响；细胞划痕实验验证PPI和Sorafenib对HCCLM3细胞迁移能力影响；Transwell实验观察PPI和SorafeniNeural-immune-endocrine interactionsb对HCCLM3细胞侵袭能力影响；Western Blot实验检测PPI和LY2835219使用方法Sorafenib对HCCLM3肝癌细胞MMP2、MMP9蛋白以PI3K/AKT信号通路标志蛋白影响。结果：CCK8实验结果显示，与对照组相比，不同浓度的PPI对HCCLM3细胞活力有明显的抑制作用，且呈时间和剂量依赖性（P＜0.05）；克隆结果表明，与空白对照组相比，PPI和Sora购买MLN8237fenib对HCCLM3细胞增殖能力有明显抑制作用，PPI联合Sorafenib组抑制作用最明显（P＜0.01）；细胞划痕实验与Transwell结果显示，PPI和Sorafenib对HCCLM3细胞迁移和侵袭能力也具有抑制作用，联合组给药组效果更好（P＜0.01）；Western Blot实验结果表明PPI和Sorafenib对HCCLM3细胞转移标志蛋白有明显抑制作用，Sora联合PPI组的抑制效果更好（P＜0.01）。结论：PPI可通过调控PI3K/Akt信号通路影响HCCLM3细胞的增殖、侵袭和迁移能力。

含氮类杂环化合物具有十分广泛的应用,无论是自然界,还是在人工合成等领域,均有着十分重要的地位。在含氮类化合物中,喹啉,吡啶,吡唑都是十分重要的组成部分,喹啉类化合物在医药,化工等领域有着及其重要的应用。吡啶基吡唑烷酮类化合物,是许多上市农药的重要中间体,在农药合成领域有着不可或缺的地位,由于喹啉类化合物与吡啶基吡唑烷酮类化合物均具有重要的应用价值,故而在有机合成领域受到有机合成化学家,药学家们的广泛关注。在广泛的阅读文献的基础上,我们发现自上个世纪至今,涌现出了大量的关于该两种化合物合成路径及药物活性的报道,然而在报道中我们同时也发现了一些不足之处,例如在喹啉类化合物的合成过程中,会使用一些贵金属催化剂,反应步骤也较为复杂。在吡啶基吡唑烷酮类化合物合成的过程voluntary medical male circumcision中,目标化合物收率较低,合成步骤及后处理复杂等情此网站况。针对以上几种问题,我们认为有必要去开发低成本,高效,具有工业应用潜力的喹啉及吡啶基吡唑烷酮类化合物的合成方法。在绪论部分,本文首先介绍了喹啉类化合物在医药生物农药等领域的应用,以及一些具有代表性的喹啉类化合物合成方法。之后介绍了吡啶基吡唑烷酮类化合物作为农药中间体在农药方面的应用,我们重点介绍了具有工业应用价值且已经具有广阔市场前景的几种上市农药,并且本文对几种比较有代表性的农药中间体的合成进行了简单的介绍。第二章本文介绍了二芳基喹啉类化合物的合成。我们以2-(1-苯基乙烯基)苯胺为原始底物,以苄胺作为碳合成子,以邻二甲苯为溶剂,最终获得我们的目标产物2,4-二芳基喹啉。在该课题中,我们首先通过筛选获得了最优反应条件,并在该条件下可以91%的收率获得目标化合物。在底物拓展方面,该反应体系同样有着优秀的表现,我们可以中等至良好的收率获得目标化合物。经过对底物的深入研究,我们发现,三苄胺作为底物,有效地合成出目标化合物,这一发现激发了我们的浓厚兴趣。为了探寻该反应机理,我们对该反应进行了详尽的控制实验,通过将苄胺与三苄胺单独在最优条件下进行反应,提出了苄胺偶联及三苄胺裂解成为N-苄烯丁胺,之后再与2-(1-苯基乙烯基)苯胺偶联,经过关环氧化电环化后,最终合成目标化合物的合理解释。该合成方案以碘单质作为催化剂,使用简单易得的氧气为氧化剂,采用的碳源价格低廉,反应路径简单可行,在之后的克量级实验过程中,我们也可以比较高的收率获得目标化合物,该合成方案具有一定的工业应用前景,为后续工业合成喹啉类化合物提供了一定的指导。第三章本文对2-(3-氯吡啶-2-基)-5-氧代吡唑烷-3-羧酸乙酯的合成工艺进行了优化研究,该有机化合物是一种非常重要的农药中间体,在众多已经上市的农药结构中,都以该化合物为骨架,在该项工作中,我们的工作重点放在了条件筛选上,我们选择2-肼基-3-氯吡啶为底物,以马来酸二乙酯为碳合成子,在碱的选择上,我们选择了简单易得的乙醇钠的醇溶液,以解决固体乙醇钠使用过程中容易变质的问题。最终我们经过大量的条件筛选,确定了最优条件,BYL719对于该反应的机理,我们同样进行了合理的解释。该项工作对重要的农药中间体的合成工艺进行了优化,提高了收率,降低了企业成本与能耗,具有一定的工业应用价值。

目的:简单、便捷、绿色、经济合成空心聚多巴胺(PDA)微球,避免引入其他物质或工艺去除核心这一步。基于合成的PDA空心微球这一具有良好生物相容Fer-1 NMR性的载体,设计开发一系列新型抗菌剂,首先通过负载纳米银制备Ag-PDA抗菌剂,不仅解决纳米银在使用过程中易聚集从而降低杀菌效率的问题,而且也降低银纳米粒子的在使用过程中蓄积的毒性,具有减毒增效的作用。然后制备了近红外光照下触发药物释放的新型抗菌剂CIP@PDA,实现抗细菌感染和促进伤口愈合的目的,该新型抗菌剂不仅能够按需释放药物而且可通过光热效应辅助灭活细菌。方法:通过将六水合硝酸锌和2-甲基咪唑甲醇溶液混合静置,制备沸石咪唑框架-8(ZIF-8),以ZIF-8为自牺牲模板,多巴胺在模板上发生聚合反应形成空心微球。利用PDA的自身弱还原性和吸附性,实现银纳米颗粒(Ag NPs)在微球上的原位生长,制备Ag-PDA复合抑菌剂。在应用透射电子显微镜(TEM)、扫描电子显微镜(SEM)、X射线衍射仪(XRD)等技术手段对合成材料进行系统表征的基础上,进行抑菌率、抑菌圈、最小抑菌浓度(MIC)以及抑菌动力学的研究,评价所得复合抑菌剂的抑菌效果。利用空心PDA微球的内部空腔结构和表面丰富的化学官能团进行载药,制备CIP@PDA复合抑菌剂,大大提高了载药率。应用透射电子显微镜、紫外可见吸收光谱、傅里叶变换红外光谱表征抗菌剂的合成。通过对不同浓度的抗菌剂近红外光照射,研究抗菌剂的光热性能。通过测定不同条件下药物的释放来研究其释放性能。应用涂布平板法、细菌生长曲线法进行抗菌剂的抗菌活性研究。通过在小鼠背部皮肤制造感染伤口,用不同的方法对小鼠进行抗感染治疗,观察小鼠伤口愈合过程,研究其对伤口愈合的影响。结果:合成的ZIF-8@PDA为表面厚度约20 nm的空心球壳,增加Ag~+浓度为0.24 mol·L~(–1)时得到Ag NPcombination immunotherapys分布均匀、外壳完整的Ag-PDA。合成的Ag-PDA抗菌剂抗菌谱广,对大肠杆菌(E.coli)的抗菌效果比金黄色葡萄球菌(S.Alisertib生产商aureus)更优异。合成的CIP@PDA抗菌剂在生理条件下表现出持续释放,但在近红外光(NIR)照射下可促进环丙沙星(CIP)释放。同时,近红外光可以激活PDA光热能力,产生的局部高温以协同方式导致细菌灭活。通过S.aureus感染的小鼠皮肤缺损模型验证了该抗菌剂优异的细菌灭活性能和突出的伤口愈合能力,并且证明该复合抗菌剂具有良好的生物相容性和无毒性。结论:Ag-PDA复合抑菌剂生物相容性良好并具有较好的广谱抑菌性能,对E.coli(G~-)展现出比S.aureus(G~+)更好的抑菌效果。合成的CIP@PDA复合抗菌剂具有良好的生物相容性,体外光热协同抗菌有着优异的抗菌效果,体内在不引起皮肤损伤的保守功率照射下依然有着良好的抗菌效果并能促进伤口的愈合。

目的 探讨红豆杉能否通过PI3K/Akt信号通路改善糖尿病肾病大鼠的肾功能，减轻肾部纤维化。方法 100只SD大鼠中随机选取20只作为对照组(行腹腔手术但不摘除右肾，注射60 mg/kg体重生理盐水);剩余80只SD大鼠MG132价格建立糖尿病肾病模型，造模成功后随机分为模型组、厄贝沙坦组、红豆杉组、红豆杉+LY294002组，各20只。检测各组大鼠血液和尿液样本各项指标；蛋白印迹法(Western-Blot)检测肾脏炎症损伤及PI3K/Akt信号通路相关蛋白；取各组大鼠肾脏组织，计算脏器指数；苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾脏病理学改变情Immunity booster况；Masson染色观察大鼠肾脏胶原纤维情况。结果 与对照组比较，模型组大鼠空腹血糖(FPG)、24 h尿蛋白(24 hUTP)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平及血管selleck HPLC细胞黏附分子-1(VCAM-1)、纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)蛋白表达水平、脏器指数明显升高，空腹胰岛素(INS)水平降低(P<0.05);与模型组比较，厄贝沙坦组、红豆杉组、红豆杉+LY294002组FPG、24 hUTP、TC、TG、LDL、Scr、BUN水平及VCAM-1和PAI-1蛋白表达水平、脏器指数明显降低，INS水平升高(P<0.05),其中红豆杉+LY294002组改变最为明显(P<0.05)。染色结果显示，与模型组比较，厄贝沙坦组、红豆杉组、红豆杉+LY294002组大鼠的肾间质和肾小管病理改善明显，肾小体肿胀减轻明显，大鼠的肾小球和肾小管间质中蓝色胶原纤维明显减少，其中红豆杉+LY294002组大鼠肾间质和肾小管病理改变、肾小体肿胀、肾脏纤维化改善情况最明显。与对照组比较，模型组大鼠肾组织中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR的比值明显升高(P<0.05);与模型组比较，厄贝沙坦组、红豆杉组、红豆杉+LY294002组大鼠肾组织中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR的比值明显降低(P<0.05),其中红豆杉+LY294002组最明显(P<0.05)。结论 红豆杉可能通过抑制PI3K/Akt信号通路改善糖尿病肾病大鼠的肾功能，降低炎症反应，减轻肾部纤维化。

目的:探讨β-谷甾醇抑制耐阿霉素人类髓性白血病细胞K562/ADR增殖、促进细胞凋亡与分化的效果及其可能机制。方法:使用细胞毒性试验计算β-谷甾醇对K562/ADR细胞的半数抑制率(IC_(50)),采用CCK-8法检测细胞增殖率，采用流式细胞术检测细胞凋亡率与线粒体膜电位下降率，使用分光光度法检测细胞上清中SOD活力与MDA含量，使用荧光试剂盒检测细胞ROS强度，使用联苯胺染色检测红细胞分化程度，使用蛋白质印迹(Western blot)检测珠蛋白转录因子1(GATA-1)、β-珠蛋白(β-globin)和核因子e2相关因子2(NF-E2)蛋白表达水平。结果:β-谷甾醇对K562/ADR细胞的半数抑制浓度的IC_(50)为163.64μmol/L。与空白组相比，3个浓度的β-谷甾醇均能抑制细胞增殖、VX-661促进细胞凋亡与红细胞分化，降低SOD活力、线粒体chronic viral hepatitis膜电位，增加MDA与ROS含量，升高GATA-1、β-globin和NF-E2蛋白表达水平(P<0.01)。结论Colforsin使用方法:β-谷甾醇能抑制K562/ADR细胞增殖，促进细胞凋亡，并且诱导红细胞分化，其机制可能是通过促进ROS积累引起氧化应激失衡。

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African Swine fever virus,ASFV)引起的高传染性病毒性疾病。自2018年我国出现首例ASF以来,其在大陆各省份迅速蔓延。研究表明ASFV感染后的临床症状类型广泛,极易诱发急性出血热,使得患病家猪和野猪可在短时间内从亚临床病症发展至死亡。然而,至今仍未研发出有效治疗预防该病的药物或疫苗,且随着病毒不断地传播与演化,疫病的流行病学状况愈发恶劣,严重影响了我国生猪养殖业的发展。临床上患病猪呈现出不同程度的病征,这与ASFV的致病能力同易感动物免疫系统间的关系密不可分。然而,目前对涉及此部分的相关免疫逃逸机制知识仍然匮乏。I型干扰素(Type I interferon,IFN-I)是病毒感染早期阶段中机体产生的能够快速有效抗病毒的细胞因子之一,而ASFV作为一种具有高度复杂结构的大型双链DNA病毒,拥有着庞大的基因组,这为其进化出更多拮抗IFN-I产生并消除其影响的逃逸通道提供了先天条件。构成ASFV内核芯壳重要组分的pS273R蛋白,是由S273R基因编码的一种半胱氨酸蛋白酶,能切割内核芯壳蛋白前体生成成熟的内核芯壳蛋白,从而参与病毒粒子的组装,在病毒增殖过程中扮演重要角色。截至目前其在宿主免疫反应中的调节作用尚未完全解析。因此,本论文对ASFV pS273R在调控IFN-I信号通路中的作用及作用机制展开了深入研究。1.ASFV pS273R拮抗IFN-I产生的机制首先利用双荧光素酶报告系统发现pS273R蛋白酶在猪源PK-15细胞中对双链DNA模拟物polselleck化学y(d A:d T)诱导IFN-β的荧光活性具有抑制作用,且呈剂量依赖性,推测pS273R可能靶向切割IFN-I通路的关键效应分子。为了筛选可能的作用靶点,将ASFV pS273R与本实验室构建的8个猪源信号分子真核表达质粒分association studies in genetics别共转染至HEK-293T细胞,蛋白免疫印迹(Western blot,WB)实验结果显示,pS273R蛋白酶呈剂量依赖性地切割DNA模式识别受体DEx H-box解旋酶9(DHX9,DEx H-box helicase 9)蛋白,且直接依赖于其蛋白酶活性。DHX9蛋白在宿主的先天免疫系统中发挥多种功能,本质上属于DEx H-box类RNA解旋酶,有研究报道DHX9具备识别双链DNA的能力,其结构域包括有位于N端的解旋酶核心域(helicase)、C端重复的精氨酸-甘氨酸-甘氨酸域(RGG-Domain)等。本研究通过构建一系列多点突变和截短突变的DHX9真核表达质粒,进一步证实pS273R蛋白酶可多点切割DHX9蛋白,作用区域是位于DHX9蛋白C末端的RGG-Domain,最后通过双荧光素酶实验表明,与全长DHX9蛋白相比,被切割后的产物能够抑制IFN-β的产生,上述研究结果揭示了ASFV pS273R蛋白酶可以作用于DHX9并阻断其介导产生IFN-I的信号通路。2.ASFV pS273R拮抗IFN-I信号转导的机制在证实ASFV pS273R抑制IFN-I产生的基础上,为进一步探究其是否可拮抗IFN-I激活ISGs的产生从而干扰宿主抗病毒状态的建立。通过实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,RT-q PCR)进一步验证,结果显示pS273R蛋白酶可以剂量依赖性降低IFN-α激活干扰素刺激基因(Interferon-stimulated genes,ISGs)的m RNA转录水平,相较于野生型pS273R,丧失了蛋白酶活性的pS273RC232A蛋白对IFN-α激活的抑制效果有所减弱,表明pS273R的蛋白酶活性参与其拮抗IFN-I信号转导。在深入探究其作用机制的过程中,通过Western blot筛选靶蛋白,结果发现pS273R对TYK2蛋白具有特异性切割作用并依赖其蛋白酶活性,此外pS273R还可降解STAT2蛋白,WB试验的灰度分析结果表明,pS273R的蛋白酶活性同样参与调控对STAT2的降解作用。在鉴定TYK2切割位点的试验中,证实pS273R可识别两处连续的P1位点,分别是610与611位的甘氨酸(Glycine,G)残基,且均位于TYK2的假激酶结构域中。与全长TYK2相比,TYK2被切割后的N端产物TYK2-(1-610aa)诱导ISRE启动子活性的能力明显selleck抑制剂减弱,然而C端产物TYK2-(612-1185aa)无明显变化,提示TYK2并非效应靶点。综合以上试验结果表明,ASFV pS273R蛋白酶可通过下调STAT2的表达来负调控IFN-I信号转导通路。综上我们的研究结果表明,ASFV pS273R蛋白酶通过靶向DHX9的RGGDomain进行多点切割,抑制I型IFN的产生;同时,pS273R还能通过降解STAT2蛋白来抑制IFN-I的信号转导;此外,pS273R的蛋白酶活性对抑制IFN-I的产生及信号转导至关重要,揭示了ASFV免疫抑制的一种新策略。