RAF信号通路

为提高丁香酚的亲水性和抑菌效果，以吐温为表面活性剂，乳酸为助表面活性剂，构建可无限稀释的丁香酚微乳液Baricitinib体内，并探究微乳化前后丁香酚抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的效果。拟三元相图的分析结果表明，与吐温-40和吐温-60相比，吐温-80更能有效增加微Quality us of medicines乳单相区面积；乳酸的增溶效果随着乳酸添加量的增加而提高，当丁香酚与乳酸质量比为1：3时，丁香酚微乳单相区面积扩LGK-974小鼠大至78.8%。抑菌特性研究结果显示，在一定范围内，随着吐温-80比例的降低，乳酸比例的增加，丁香酚微乳液的抑菌效果增强；当微乳液组分中丁香酚、乳酸与吐温-80的质量比为1：3：6时，质量分数0.05%的丁香酚可完全抑制2种受试细菌的生长，同时，该复合微乳体系的抑菌活性显著高于不含乳酸的单一丁香酚微乳。研究开发的微乳液旨在为实现丁香酚的增溶增效提供可行的剂型，并有望用于食品防腐保鲜领域。

【目的】本研究旨在通过光学相干断层扫描(Optical Coherence Tomography,OCT)和光学相干断层扫描血管成像(Optical Coherence Tomography Angiography,OCTA)评估阿尔兹海默病(Alzheimer’s Disease,AD)和轻度认知障碍(Mild Cognitive Impairment,MCI)患者视网膜结构和微血管改变,探讨各量化指标与认知功能之间的相关性,评价OCT、OCTA对MCI、AD的诊断价值,分析ApoEε4基因型携带与否对视网NSC125066纯度膜的影响,探索MCI和AD潜在的视网膜生物标志物。【方法】采用观察性横断面研究,共纳入232例受试者作为研究对象,包括MCI组78例、AD组74例和健康对照组(Healthy Control,HC)80例,HC组为各方面相匹配的认知功能正常老年人。应用简易智力状态检查量表(Mini-mental State Examination,MMSE)和蒙特利尔认知评估量表(Montreal Cognitive Assessment,Mo CA)评估受试者认知功能,使用OCT和OCTA行眼底检查获取受试者视网膜厚度和血管密度量化数据,每位受试者首先选择右眼数据进行分析,右眼图像质量欠佳或合并眼底病变时用左眼替代,其中部分愿意接受静脉采血的病例组受试者进一步开展ApoE基因型检测。使用SPSS 26.0软件对数据进行统计分析,当p<0.05时认为差异具有统计学意义。采用单因素方差分析研究MCI、AD和HC组间各量化指标的差异,Pearson相关性分析研究各量化参数和MMSE、Mo CA得分之间的相关性,绘制ROC曲线评估有差异性的量化指标在MCI、AD诊断中的应用价值,使用t检验或Mann-Whitney U检验分析不同ApoEε4基因型携带状态是否存在OCT、OCTA量化指标差异。【结果】本研究共纳入232例受试者,包括MCI组78例、AD组74例和HC组80例。三组间在性别、年龄、视力、眼压、受教育水平等方面无统计学差异(p>0.05)。所有受试者均完成OCT检查,其中40例MCI受试者、47例AD受试者和40例HC受试者完成了OCTA检查,50例病例组受试者(其中MCI 21例,AD 29例)接受了ApoE基因型检测。1.MCI组、AD组和HC组间OCT量化参数差异黄斑厚度与容积:与HC组相比,MCI组和AD组神经节细胞-内丛状层(Ganglion Cell Layer and Inner Plexiform Layer,GC-IPL)厚度显著Phycosphere microbiota变薄(p<0.001),黄斑容积(Macular Volume,MV)显著减小(p<0.001),黄斑平均(p<0.001)和内外环各象限(p<0.05)厚度均显著变薄,三组间黄斑中心凹厚度(CMT)无统计学差异(p>0.05)。视网膜神经纤维层(Retinal Nerve Fiber Layer,RNFL):与HC组相比,MCI组和AD组平均、下象限、上象限及颞象限的RNFL厚度均显著降低(p<0.05),鼻象限的RNFL厚度无统计学差异(p>0.05)。2.MCI组、AD组和HC组间OCTA量化参数差异黄斑浅层毛细血管网(Superficial Capillary Plexus,SCP):与HC组相比,MCI组和AD组Whole image,Parafovea和Perifovea区域的血管密度均显著降低(p<0.05),三组Fovea区域的血管密度无统计学差异(p>0.05)。黄斑深层毛细血管网(Deep Capillary Plexus,DCP):与HC组和MCI组相比,AD组Fovea区域的血管密度显著降低(p<0.05),在Parafovea的Inferior象限,与HC组相比,AD组的血管密度显著降低(p<0.05),三组间在其余区域无统计学差异(p>0.05)。黄斑中心凹无血管区域(Foveal Avascular Zone,FAZ)参数:与HC组相比,MCI组和AD组的非圆度指数(AI)显著升高(p<0.001),黄斑中心凹旁300μm区域内的血管密度(Fovea Density 300μm,FD-300)显著降低(p<0.001),三组间的FAZ面积、周长无统计学差异(p>0.05)。视盘区域血管密度参数:与HC组相比,MCI组和AD组Whole Image的血管密度显著降低(p<0.001),Inside D购买PF-07321332isc的血管密度显著降低(p<0.05),平均、IN象限、IT象限、TI象限、TS象限和ST象限视乳头周围放射状毛细血管(Radial Peripapillary Capillary,RPC)的血管密度均显著降低(p<0.05)。3.AD和MCI患者的OCT、OCTA量化参数与认知功能的相关性视网膜厚度、血管密度与MMSE得分的相关性:FD-300、视盘区域Whole Image的血管密度、平均、IT象限、TI象限、TS象限和ST象限RPC的血管密度与MMSE得分均存在显著正相关(p<0.05)。视网膜厚度、血管密度与Mo CA得分的相关性:平均和颞象限的RNFL厚度、平均和内鼻象限的黄斑厚度、黄斑区SCP Parafovea的总体、Tempo和Superior象限的血管密度、FD-300、视盘区域Whole Image和Inside Disc的血管密度、TI象限、TS象限及ST象限RPC的血管密度与Mo CA得分均存在显著正相关(p<0.05),AI与Mo CA得分存在显著负相关(p<0.05)。4.OCT、OCTA量化参数对MCI、AD的诊断效能绘制ROC曲线显示:平均RNFL厚度、GC-IPL厚度、MV、黄斑平均厚度、视盘Whole Image、Inside Disc和RPC的血管密度、黄斑区SCP Whole Image、Parafovea和Perifovea的血管密度、FD-300和AI对MCI、AD的诊断均有一定价值,其中FD-300具有最大曲线下面积(AUC:MCI=0.753,AD=0.797)。5.携带ApoEε4基因型对MCI、AD患者视网膜的影响与未携带ApoEε4基因型的受试者相比,ApoEε4基因型携带者的GC-IPL厚度、黄斑区SCP Parafovea的Superior、Nasal象限的血管密度、FD-300均显著降低(p<0.05)。【结论】1.与正常人相比,MCI和AD患者的视网膜厚度变薄、微血管密度降低,与认知功能水平存在正相关,视网膜神经退行性改变和微血管损伤可在一定程度上反映出患者认知功能的下降情况。2.OCT、OCTA视网膜成像技术对MCI和AD均有一定的诊断价值,可能为疾病的诊断和随访提供潜在的生物标志物。3.携带ApoEε4基因型可能会加重视网膜神经退行性改变和微血管损伤。

目的:研究外源茉莉酸甲酯(methyl Jasmonate,MeJA)对牛大力有效成分含量的影响,探究其对异黄酮生物合成以及茉莉酸(jasmonate,JA)信号通路关键酶基因的调控模式。方法:以牛大力幼苗为材料,采用HPLC法分析MeJA对有效成分含量的影响,利用Illumina Hi Seq平台进行转录组测序,并利用q RT-PCR技术验证相关基因的表达量。结果:外源MeJA诱导提高了牛大力有效成分芒柄花素与高丽槐素的含量。基于牛大力参考基因组数据库,鉴定出20 727个差异基因(DEGs),其中9 091个为上调基因,主要富集在植物激素信号转导、淀粉和蔗糖代谢、异黄酮生物合成等代谢通路,qRT-PCR结果验证了转录组测序结果准确可testicular biopsy靠。外源MeJA激活了部分异黄酮生物合成和JA信号通路关键酶基因的表达,其中异黄酮生物合成途径基因CHS、HIDs、I3′Hs、VR、PTR、CYP81E7、7IOMT、PTS等呈上调表达;JA信号通路基因LOXs、AOSs、OPR、ACXselleck NSC 127716s、JAZs和MYCs等呈上调表达。结论:牛大力在响应外源MeSTM2457溶解度JA诱导的过程中可激活CHS、HID-1、VR等异黄酮生物合成途径和LOX、MYC等JA信号通路关键酶基因,从而正向调控其有效成分芒柄花素与高丽槐素含量。

目的观察地红方对阴虚血瘀型老年2型糖尿病肾脏病患者中医证候积分、血糖、血清IGF-1、血清VEGF、血清Cys-C、e GFR的影响,探讨地红方治疗老年2型糖尿病肾脏病的疗效、安全性及作用机制。方法从2022年04月至2023年03月,在福建中医药大学附属人民医院老年病科收集的76例符合老年2型糖尿病肾脏病诊断标准及阴虚血瘀证型标准的患者,随机分为试验组和对照组,每组各3VE-8228例。对照组给予单纯西医治疗,试验组在对照组治疗的基础上加用地红方口服,疗程均为4周。观察两组治疗前后中医证候积分、FBG、2h-PG、GA、IGF-1、VEGF、Cys-C、尿素氮、肌酐、尿酸、e GFR、UACR水平的变化;设置健康组20BYL719小鼠例,观察其与糖尿病肾脏病组(试验组、对照组)治疗前上述指标的差异,并对实验结果进行统计学分析。结果1.糖尿病肾脏病组与健康组比较:两组性别、年龄、尿素氮、肌酐均无统计学差异(P>0.05),具有可比性;两组BMI、IGF-1、VEGF、Cys-C、FBG、2h-PG、GA、尿酸、e GFR比较,均有统计学差异(P<0.05)。2.治疗前试验组与对照组资料比较:两组在性别、BMISpectroscopy、年龄、病程、合并疾病分布、治疗前中医证候积分、IGF-1、VEGF、Cys-C、糖化血红蛋白、FBG、2h-PG、GA、UACR、尿素氮、肌酐、尿酸、e GFR方面无统计学差异,具有可比性(P>0.05)。3.试验组与对照组疗效比较:治疗后,两组中医证候积分均较治疗前降低(P<0.01);试验组中医证候积分差值高于对照组(P<0.01)。试验组的中医证候积分总有效率为97.37%,对照组为71.05%,差异有统计学意义(P<0.01)。试验组的总体疗效为31.58%,对照组为5.26%,差异有统计学意义(P<0.05)。4.试验组与对照组血糖比较:治疗后,试验组FBG、2h-PG、GA水平均较治疗前降低(P<0.01);对照组FBG、2h-PG、GA水平较治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05);试验组FBG、2h-PG、GA的差值高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。5.试验组与对照组IGF-1、VEGF、Cys-C比较:治疗后两组血清IGF-1、VEGF、Cys-C均较治疗前降低(P<0.01);试验组IGF-1、VEGF、Cys-C的差值高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。6.试验组与对照组肾功能比较:治疗后,两组患者尿素氮、肌酐、尿酸、e GFR较治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05),两组患者UACR较治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.01),试验组尿素氮、肌酐、尿酸、e GFR、UACR差值略大于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。7.安全性指标比较:治疗前后两组患者AST、ALT、PT、APTT、K、Na及ECG均无异常,两组组间比较无差异,治疗干预过程中未见不良反应,安全性良好。结论1、地红方能改善阴虚血瘀型老年2型糖尿病肾脏病患者的中医证候,地红方联合西医治疗阴虚血瘀型老年2型糖尿病肾脏病患者中医证候疗效优于单纯西医治疗。2、地红方可降低老年2型糖尿病肾脏病患者血清FBG、2h-PG、GA水平。3、地红方可降低阴虚血瘀型老年2型糖尿病肾脏病患者血清IGF-1、VEGF、Cys-C水平。4、地红方治疗阴虚血瘀型老年2型糖尿病肾脏病患者的临床安全性良好。

试验旨在研究葛根素对肉牛生长性能、屠宰性能和血清抗氧化指标的影响。选取西门塔尔杂交肉牛80头，随机均分为4组，对照组采用基础饲粮（不添加GSK126葛根素），试验1、2、3组分别在基础饲粮中添加300、600、900 mg/kg葛根素，试验期为60 d。结果表明：与对照组相比，试验2组和试验3组肉牛末重和平均日增重显著提高（P<0.05），料重比显著spleen pathology降低（P<0.05）；肉牛屠宰前活体重、胴体重和眼肌面积显著提高（P<0.05）；各试验组肉牛血清谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性均显著提高（P<0.05），总抗氧化能力显著提高（P<0.05），丙二醛含量显著降低（P<0.05）；试验2组和试验3组Alpelisib临床试验肉牛血清中过氧化氢酶活性显著提高（P<0.05）。综上所述，在饲粮中添加葛根素可以提高肉牛生长性能、屠宰性能及血清抗氧化酶活性；综合考虑养殖的经济效益，肉牛饲粮中葛根素的推荐添加量为600 mg/kg。

【目的】本研究旨在探究环指蛋白41(Ring Finger Protein 41,RNF41)在胆管癌发生发展中的作用,并阐明RNF41调控胆管癌进展的分子机制,为丰富胆管癌的治疗提供策略。【方法】通过生物信息学、Western blotting及免疫组织化学分析RNF41在胆管癌患者的肿瘤组织及癌旁正常组织中m RNA和蛋白的表达;利用临床数据分析RNF41对胆管癌患者预后生存的影响,以及RNF41与肿瘤临床特征的关系;构建RNF41 si RNA转染HCC9810、RBE和HUCCT1细胞后,利用CCK-8、Ed U、克隆形成实验及Western blotting实验分析RNF41对胆管癌细胞的增殖作用;进一步采用Transwell实验、划痕实验及标志蛋白检测分析RNF41对胆管癌细胞的迁移和侵袭作用,Western blotting实验检测RNF41对胆管癌细胞上皮间质转化的作用;裸鼠成瘤实验、Western blotting实验及免疫组织化学染色分析RNF41在动物体内肿瘤生长中的作用;随后质谱分析和免selleckchem Blebbistatin疫沉淀技术检测与RNF41相互作用的因子;体外泛素化实验、Western blotting实验、免疫沉淀、免疫荧光共定位等实验用于深入探究RNF41在胆管癌中的潜在分子调控机制。【结果】RNF41 m RNA及蛋白在胆管癌肿瘤组织中的表达水平显著高于相应的癌旁组织,RNF41的表达增加与CHOL组织学分级和肿瘤淋巴结转移阶段密切相关,且RNF41的高表达与CHOL患者的不良预后密切相关。RNF41能促进肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭及细胞EMT。而通过在裸鼠体内进行异体肿瘤移植实验及检测标志蛋白发现,RNF41敲低抑制了胆管癌细胞在裸鼠体内的皮下成瘤能力,EMT相关蛋白检测结果与体外细胞实验分析一致。免疫沉淀结合质谱分析发现RNF41与四肽重复结构域1(TetratricDocetaxel供应商opeptide repeat domain1,TTC1)结合。免疫沉淀-Western blotting实验结果显示RNF41通过促进其K6连接的多泛素化来稳定TTC1蛋白。通过Western blotting实验发现,磷酸化的RAF、ERK或MEK水平在RNF41 OE的HCC9810/RBE/HUCCT1细胞明显上调,使用TTC1 si RNA处理后,磷酸化RAF、ERK或MEK的蛋白水平则降低,并且TTC1沉默部分逆转了RNF41过表达对增殖和迁移的影响。【结论】RNF41能促进胆管癌的发生发展并且与肿瘤分期、淋巴结转移等临床病理特征及患者的不良预后密切相关;下调RNF41可以抑制胆管癌细胞的增殖、迁移、侵袭、EMT和肿瘤形成能力;RNF41通过介导TTC1的泛素化调控Ras/Orthopedic infectionERK信号通路参与了CHOL的发生发展。

阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease,AD)是由神经细胞死亡或退化引起的疾病,会导致记忆力、认知能力、运动功能等方面的逐渐恶化,给患者和家庭带来了巨大的负担和压力。而神经轻链蛋白(Neurofilament light chain,Nf L)是一种在神经元轴突中高度表达的蛋白质,其主要功能是维护和支持轴突的结构和稳定性。一些研究表明,当轴突受损或死亡时,Nf L蛋白会释放到周围环境,因此血液和脑脊液中白Nf L水平可以用于反映大脑中神经元损伤和死亡的程度,用于预测和鉴定AD。近年来,Nf L蛋白的测定技术迅速发展并不断完善,开发了包括Simoa技术在内的可以检测到更低水平Nf L蛋白的一系列高灵敏度免疫检测技术。尽管测定技术不断进步,但Nf L蛋白高准确度绝对定量方法仍然是个难题。由于Nf L蛋白没有准确定量标准,导致不同国家、实验室间对Nf L测量的selleck激酶抑制剂结果没购买Trichostatin A有可比性。因此本研究建立了一套基于同位素稀释质谱法(IDMS)的Nf L高准确度绝对定量方法。(1)建立基于氨基酸同位素稀释质谱法(AA-based IDMS)的Nf L绝对定量方法。本方法采用液相色谱串联质谱(LC-MS)测量Nf L蛋白酸水解产生的脯氨酸(Pro)、苯丙氨酸(Phe)、亮氨酸(Leu)和缬氨酸(Val)以及对应的同位素标记氨基酸内标,得到Nf L的准确量值。测量过程中对酸水解的实验条件如水解时长、盐酸添加量以及LC-MS仪器参数进行优化,得到Nf Biogenic Mn oxidesL定量结果为218.00±4.73μg/g。(2)建立基于肽段的同位素稀释质谱法(Signature peptide-based ID-LCMS)的Nf L绝对定量方法。本方法筛选并验证三条肽段FR-7(FASFIER)、AR-8(ALYEQEIR)和FK-10(FTVLTESAAK)为Nf L的特征肽段,然后使用氨基酸同位素稀释质谱法对该三条肽段进行定量得到准确量值。接着对Nf L进行酶解并与三条肽段对应的同位素标记肽段使用液相质谱(LC-MS)的多反应监测模式(MRM)进行测量,优化酶解实验条件、肽段离子对和LC-MS的仪器参数。最终经三条肽段对Nf L的定量结果平均为217.49±5.56μg/g。(3)建立基于硫元素同位素稀释质谱法(Sulfur-based ID-ICP-MS)的Nf L绝对定量方法。本方法采用高效液相色谱(HPLC)和高分辨等离子体质谱(HR-ICP-MS)串联,使用尺寸排阻色谱柱(SEC)对Nf L样品进行分离,之后经柱后添加~(34)S同位素稀释剂并同时监测~(32)S和~(34)S信号比,通过计算S元素的含量,计算得到Nf L的定量结果为215.58±1.00μg/g。通过三种独立方法对简单基质中Nf L的含量进行准确测定,三种定值方法的总平均值为217.06±4.08μg/g。三种方法的结果较为一致,进一步验证了基于IDMS方法进行蛋白质绝对定量的准确性和可靠性。该研究为后续Nf L的标准物质研制奠定了基础,对NDD生物标志物的准确定量方法开发提供了重要的参考和指导。

【目的】观察强直一方（四妙散加味）联合安健宁治疗湿热痹阻型强直性脊柱炎的临床疗效。【方法】将90例湿热痹阻型强直性脊柱炎患者随机分为治疗组和对照组，每组各45例。对照组给予安健宁皮下注射治疗，治疗组在对照组的基础上加用强直一方治疗，疗程为4周。观察2组患者治疗前后脊柱痛视觉模拟量表（VAS）评分、患者总体评估（PGA）评分、巴斯强直性脊柱炎疾病活动指数（BASDAI）评分、巴斯强直性脊柱炎功能指数（BASFI）评分、指地距、胸廓活动度、枕墙距、Schober试验及血沉（ESR）、C反应蛋白（CRP）水平的变eggshell microbiota化情况，并评价2组患者的中医证候疗效及安全性。【结果】（1）治疗4周后，治疗组的总有效率为95.6%(43/45)，对照组为77.8%(35/45)，组间比较，治疗组的中医证候疗效明显优于对照组（P<0.05）。（2）治疗后，2组患者的脊柱痛VAS评分、PGA评分、BASFI评分、BASDAI评分均较治疗前明显降低（P<0.05），且治疗组的降低作用均明显优于对照组（P<Ceralasertib供应商0.05）。（3）治疗后，2组患者的指地距、胸廓活动度、枕墙距和Schober试验均较治疗前明显改善（P<0.05），且治疗组的改selleck抑制剂善作用均明显优于对照组（P<0.05）。（4）治疗后，2组患者的ESR、CRP水平均较治疗前明显降低（P<0.05），且治疗组的降低作用均明显优于对照组（P<0.05）。（5）治疗过程中，2组患者均未发生明显不良反应，且2组患者的血、尿、大便常规和肝肾功能等安全性指标均未见异常。【结论】强直一方联合安健宁治疗湿热痹阻型强直性脊柱炎疗效确切，可有效改善患者临床症状和炎症指标，降低疾病活动度，提高患者生活质量，而且安全性高，不良反应少。

特发性肺纤维化（IPF）作为一种肺部进行性疾病，预后不佳，目前尚无可靠手段Autoimmune Addison’s disease进行根治。当下治疗IPF以器官移植和给予化学药为主，但效果欠佳且副作用颇多，无法满足目前的临床需求www.selleck.cn/products/Etopophos。因此，开发更安全、有效的药物已成为亟需解决的问题，而研究IPF的发病机制将有助于新药的开发。现阶段关于IPF发病机制的研究主要集中在巨噬细胞极化、上皮-间质转化（EMT）、氧化应激和自噬作用等方面，但对于系统说明各发病机制原理及揭示各机制存在的联系尚未有研究报道。中医理论认为“气虚血瘀”、“气阳虚弱”是IPF的关键病机，故临床常采用益气活血、温阳补气和祛瘀化痰类等中药或复方治疗IPF。现代药理学研究表明，此类中药在抑制巨噬细胞极化、改善氧化MC3还原平衡、抑制EMT和调节细胞自噬等方面可发挥积极作用，但针对中药如何调节相关通路而治疗IPF，目前尚无系统的报道。本研究通过总结国内外最新文献，将逐一并系统的阐述IPF的发病机制，同时更全面的概述中药中有效成分或复方调节IPF的作用机制。针对IPF的发病机制，结合中药的调节作用，着重挖掘系统治疗IPF的方案，以期为IPF的深入研究及相关药物研发提供新的思路。

自噬是一种保守的溶酶体降解途径，能够降解和回收长寿蛋白或错误折叠的蛋白质和受损的细胞器，以维持细胞的能量和功能。脑血管内皮细胞是神经血管单元（NVU）的重要组成部分，其紧密连接结构是血脑屏障（BBB）的主要结构，而BBB完整性是维持中枢神经系统（CNS）稳态的保障。缺血性脑卒中（CIS）发生时，多种脑内细胞自噬可被激活，包括脑血管内皮细胞、神经元、小胶质细胞和星形胶质细胞等，其中脑血管内皮细胞自噬可影响BBB完整性、细胞凋亡和炎症反应。研究发现，脑血管内皮细胞自噬的激活或抑制可能与沉默信息调节因子1(SIRT-1)/叉头蛋白O3a(FOXO3a)、磷酸肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B(Telaglenastat核磁Akt)/雷帕霉素机械靶蛋白（mMS-275分子量TOR）、核因子κB(NF-κB)等信号通路有关，且调控脑血管内皮细胞自噬可降低细胞凋亡率、减轻炎症反应和保护BBB的完整性，从而减轻脑缺血缺氧和再灌注损伤。本文从CIS病理过程、脑血管Designer medecines内皮细胞自噬及其发生机制、脑血管内皮细胞自噬在CIS病理过程中的作用进行了综述，认为调控脑血管内皮细胞自噬可能是治疗CIS的一种潜在有效方法。