RAF信号通路

鸡大肠杆菌病是由禽致病性大肠杆菌感染(aviCompound 3作用an pathogenic Escherichia coli,APEC)引起的一种严重威胁养禽业发展的全身性细菌传染病,APEC此网站可经呼吸道和消化道侵入体内并在体内定殖,可引起肺炎、气囊炎、肺充血以及肺出血等呼吸系统疾病和败血症、心包炎、肝周炎、输卵管炎、腹膜炎和肠炎等其他全身性感染。肺巨噬细胞作为肺脏常驻免疫细胞,在协调肺免疫,抵抗APEC感染,清除侵入的病原体中发挥重要作用。当机体受疾病或环境因素导致机体“卫气”不足,机体固有免疫巨噬细胞功能降低,APEC趁“虚”而入,引起鸡大肠杆菌病的发生。因此,调节巨噬细胞活性以抑制APEC感染的肺部炎症成为一种重要的治疗手段。盐酸小檗碱是中药黄连的主要活性成分,为探究盐酸小檗碱调节巨噬细胞抗APEC感染的作用,我们建立了APEC感染鸡巨噬细胞的体外模型,探究了不同温度、不同感染复数以及不同感染时间下APEC对鸡巨噬细胞的感染作用;其次分析盐酸小檗碱调控鸡巨噬细胞应对APEC感染的能力及机制;最后通过盐酸小檗碱预处理鸡肺巨噬细胞,探究盐酸小檗碱对APEC诱导鸡肺巨噬细胞产生胞外诱捕网的调节作用及机理,以揭示盐酸小檗碱调节巨噬细胞抵抗APEC感染的作用及其机制,为鸡大肠杆菌病的防治和抗感染药物的开发提供研究基础。首先,我们为建立APEC感染鸡巨噬细胞的体外模型,通过荧光定量PCR检测了不同感染复数、不同感染时间以及不同感染温度下禽致病性大肠杆菌感染HD11细胞后i NOS、IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10基因相对表达量的变化;使用Gress法和DCFH-DA法分别检测41℃时不同感染时间和不同感染复数下HD11细胞生成NO和ROS的变化。结果显示:i NOS、IL-1β、IL-6、TNF-α的基因相对表达量在0.5～4 h呈时间依赖性,并在4 h达到峰值(P<0.01);4 h时,随着感染复数升高,i NOS、IL-1β、IL-6、TNF-α基因相对表达量呈降低趋势。当培养温度为41℃时,IL-10基因表达水平随着感染程度的增加而升高,感染时间为4 h,当MOI=5~3时IL-10基因表达水平达到最大值;NO及ROS水平在感染早期显著升高(P<0.05),随着感染程度的增加而有所降低;4种促炎基因相对表达量显著高于37℃(P<0.05),当MOI=5~1时,其基因相对表达量达到最大值(P<0.01)。因此,选择感染复数为MOI=5~1,感染时间为4 h,感染温度为41℃作为禽致病性大肠杆菌体外感染鸡巨噬细胞模型的感染条件。然后为探究盐酸小檗碱调节鸡巨噬细胞应对APEC感染的抗炎机制,我们通过检测药物细胞毒性以及最小抑菌浓度(MIC),确定了对APEC生长无影响且对HD11无细胞毒性的盐酸小檗碱浓度为0～30μM;然后检测盐酸小檗碱7.5μM、15μM、30μM对APEC感染鸡巨噬细胞引起的炎症及MAPK、NF-κB信号通路的影响。结果表明,7.5μM、15μM、30μM盐酸小檗碱可以显著降低促炎基因IL-1β、IL-6、TNF-α基因的相对表达,并抑制MAPK(JNK、ERK1/2、p38)以及NF-κB(p65、IκB)信号通路的磷酸化。这些结果表明,盐酸小檗碱可以通过调节APEC感染引起的M1极化,从而通过MAPK以及NF-κB降低APEC感染鸡巨噬细胞HD11后炎症基因表达水平。最后为探究盐酸小檗碱对APEC诱导鸡肺巨噬细胞产生胞外诱捕网的影响,我们通过肺部灌洗获取鸡肺巨噬细胞后,以APEC诱导鸡肺巨噬细胞产生胞外诱捕网,通过检测小檗碱处理后鸡肺巨噬细胞产生胞外诱捕网的能力及MAPK表达情况。结果表明APEC可诱导鸡肺巨噬细胞产生胞外诱捕网结构,盐酸小檗碱可通过ERK1/2、p38 MAPK信号通路减轻肺巨噬细胞诱捕网的产生。综上所述,感染复数为MOI=5Novel coronavirus-infected pneumonia~1,感染时间为4 h,感染温度为41℃为APEC体外感染鸡巨噬细胞模型的感染条件;盐酸小檗碱在不影响APEC生长的情况下,可以通过改变M1型巨噬细胞,从而抑制APEC感染引起的炎症反应,并调节APEC诱导鸡肺巨噬细胞诱捕网的生成发挥抗感染的作用。

目的 探讨GTP结合蛋白(GTPBP)2对CD133阳性结直肠癌干细胞增殖、细胞周期、迁移、侵袭和凋亡的影响及其分子机制。方法 选取30例结直肠癌患者的结直肠癌组织及相应癌旁组织Empagliflozin说明书；利用免疫磁珠法分选出人结直肠癌SW480细胞的CD133阳性肿瘤干细胞，将其分为Con组、si-NC组、si-GTPBP2组；实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测GTPBP2 mRNA表达水平；Western印迹检测GTPBP2表达、干细胞表面标志物表达及增殖、细胞周期、迁移、侵袭、凋亡和Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达；四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖；Transwell实验检测细胞迁移和侵袭；流式细胞术检测细胞凋亡和周期。结果 与癌旁组织相比，结直肠癌组织中GTPBP2表达水平明显升高(P<0.05);沉默GTPBP2可明显抑制结直肠癌干细胞增殖、迁移和侵袭，明显阻滞细胞周期进程，并明显促进凋亡，结直肠癌干细胞存活率、S期HNF3 hepatocyte nuclear factor 3细胞比例、迁移、侵袭细胞数及细胞周期蛋白(Cyclin)D1、细胞核增殖抗原(Ki)-67、基质MK-4827说明书金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2表达水平明显降低，G0-G1细胞比例、细胞凋亡率及p21、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平明显升高(P<0.05);沉默GTPBP2可明显降低Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白磷酸化-糖原合成酶激酶(p-GSK)3β和β-catenin表达水平(P<0.05)。结论 沉默GTPBP2可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路导致结直肠癌干细胞增殖、迁移、侵袭能力下降，细胞周期阻滞和凋亡增强。

目的：分析社会性康复计划对重症烧伤后自闭症患儿情绪障碍和身心康复的影响。方法：选取2016年5月-2019年9月笔者医院收治的重症烧伤后自闭症患儿97例，随机分为观察组、对照组，分别49例、48例，对照组予以常规护理干预，观察组在此基础上采用社会性康复计划干预，以孤独症行为量表（Autism behavior checklist,ABC）、能力低下儿童评定量表（Pediatricevaluationofdisabilityinventory,PEDI）、Gesell婴幼儿发展量表（Geselldevelopmentdiagnosis scale,GDDS）、儿童孤独症评定量表（Child autism rating scale,CARS）评估两组患儿症状、社交与自理能力、中枢神经系predictors of infection统发育情况、依赖程度，同时记录患儿负面情绪[儿童焦虑性情绪障碍自评量表（Screenforchildanxietyrelated emotionaldisorders,SCARED）、儿童抑郁性情绪障碍自评量表（Depressionself-ratingscaleforchildren,DSRSC）]、情绪[焦虑自评量表（Self-ratinganxietyscale,SAS）、抑郁自评量表（Self-ratingdepressionscale,SDS）]变化，采用比里奇家庭生活质量量表（theBeachcentrefamilyqualityoflifescale,BCFQOLS）评估家庭生活质量。结果：观察组干预后ABC量表评分（35.86±4.34）分，低于对照组（38.31±3.86）分，而PEDI评分（67.10±6.93）分、Gesell评分（104.90±9.67）分高于对照组（62.69±7.58）分、（94.48±9.64）分，差异均有统计学意义BLZ945配制（P<0.05）。观察组干selleck HPLC预后CARS依赖程度48.98%低于对照组75.00%，差异有统计学意义（P<0.05）。干预后观察组患儿SCARED评分（16.69±1.71）分、DSRSC评分（12.67±1.25）分，较对照组（19.79±1.81）分、（18.10±2.21）分低，差异有统计学意义（P<0.05）。观察组家长SAS评分（31.92±3.98）分、SDS评分（33.12±3.36）分也低于对照组（34.21±3.36）分、（38.94±3.77）分，差异有统计学意义（P<0.05）。观察组干预后BCFQOLS总分及家人互动、情绪需求、生活需求维度得分均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：社会性康复计划应用于重症烧伤后自闭症患儿中，可明显改善其症状，提高社交与自理能力，促进患儿中枢神经系统发育，减少其依赖程度及负性情绪，降低家长情绪障碍，提高家庭生活质量，值得在临床推广实践。

目的 探究自体动静脉内瘘与中心静脉置管在慢性肾炎患者维持性血液透析中的应用效果。方法 选取2018年5月至2020年5月于医院接受维持性血液透析的200例慢性肾炎患者，根据治疗方式不同分为自体动静脉内瘘组与中心静脉置管组，各100例。两组均应用非热康谱血管内瘘治疗仪治疗，自体动静脉内瘘组行自体动LEE011化学结构静脉内瘘术，中心静脉置管组行中心静脉置管处理。对比两组血生化指数[血清白蛋白（ALB）、血红蛋白（Hb）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、Navitoclax浓度低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、白细胞介素6mediator effect(IL-6)、前白蛋白（PA）、促红细胞生成素（EPO）、C-反应蛋白（CRP）、血钙、血磷]水平及并发症发生情况。结果 自体动静脉内瘘组TC、TG、LDL-C、IL-6、EPO、血钙、血磷水平低于中心静脉置管组，ALB、Hb、HDL-C、CRP、PA水平高于中心静脉置管组，差异有统计学意义（P<0.05）。自体动静脉内瘘组并发症发生率低于中心静脉置管组相，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 慢性肾炎维持性血液透析患者应用自体动静脉内瘘联合非热康谱血管内瘘治疗仪治疗，可提高ALB、Hb水平，改善血脂水平，减轻炎症反应，减少并发症发生。

目的:探讨基于彩色多普勒感兴趣区(region of interest,ROI)定量技术,结合Qlab软件测得的肾脏末梢循环血流灌注指标:血管指数(vascular index,VI)、血流指数(flow index,FI)、血管血流指数(vascularizatio购买MC3n-flow index,VFI)在评价慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者肾血流灌注的临床价值。方法:将我院经肾穿刺活检病理证实的CKD患者180例依据慢性化病变程度分成三组:轻微病变组、轻度慢性病MLN8237 NMR变组、中重度慢性病变组,另纳入同期性别、年龄相匹配的120例健康体检者为对照组。从电子病例中收集受检者的年龄、合并症等基线资料及血清肌酐(serum creatinine,Scr)、24小时尿蛋白定量(24 h uric total protein,24h TP)等实验室生化指标;肾穿刺活检术前对同侧肾脏行常规超声检查并测量肾脏实质厚度、小叶间动脉阻力指数(resistance index,RI)等参数,同时采集彩色血流动态图像并结合Qlab软件自动计算VI、FI和VFI。分析并筛选出有统计学差异的变量纳入多因素Logistic回归分析以预测CKD的独立影响因素,受试者工作曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)评价ROI血流灌注指标的诊断性能,Bland-Altman一致性分析ROI血流灌注指标的一致性。结果:原发性肾小球肾炎(primary glomerulonephritis,PGN)是CKD最常见的病理类型,轻微病变组与轻度慢性病变组以膜性肾病(membranous nephropathy,MN)为主,中重度慢性病变组以Ig A肾病(Ig A nephropathy,Ig AN)为主;合并高危疾病、白蛋白、尿素氮、Scr、尿酸、尿红细胞计数的组间差异具有统计学意义(P<0.01);年龄、性别、甘油三酯、总胆固醇等基线资料以及肾Fracture-related infection脏实质厚度、RI等常规超声指标的组间差异不具有统计学意义(P>0.05);CKD组肾脏血流信号减少,血流束稀疏纤细,VI、FI、VFI随着慢性化病变进展而逐渐降低,以中重度慢性病变组和VFI为著(P<0.05);Logistic回归分析联合ROC曲线示白蛋白(OR=0.747,95%CI 0.664-0.841)、VFI(OR=0.342,95%CI 0.199-0.590)、尿红细胞计数(OR=1.641,95%CI 1.304-2.064)为CKD的独立影响因素(P<0.01),且VFI在预测CKD慢性化病变进展程度中均具有较好的敏感度和特异度;Bland-Altman结果分析示VI、FI、VFI在不同观察者及不同勾画部位之间的差值超出95%一致性界限范围的点均小于5.00%(P<0.05),一致性较好。结论:彩色多普勒感兴趣区定量技术能够无创便捷、早期灵敏地评估CKD患者肾脏血流灌注的改变,其中VFI是CKD的保护因素,且在预测CKD慢性化病变进展程度中均具有较好的敏感度和特异度,对于临床上CKD患者的早期筛查及慢性化进展的动态监测具有一定的参考价值。

目的 探讨人参皂苷Rg3通过抑制磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路抑制肺癌细胞增殖与侵袭的机制。方法 体外培养人肺癌细胞(A549),分为对照组(正常培养),低剂量实验组(30μmol·L~(-1)人参皂苷Rg3),高剂量实验组(60μmol·L~(-1)人参Captisol作用皂苷Rg3)。用细胞计数试剂盒8(CCK-8)评估人参皂苷Rg3对肺癌细胞存活率的影响，用流式细胞术检测肺癌细胞经处理之后的凋亡率，用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测重要凋亡基因的表达，用Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力，同时检测细胞内的氧化应激状况，用蛋白质印迹法检测PI3K和Akt磷酸化的水平。结果 对照组和低、高剂量实验组细胞活力分别为(98.67±0.88)%、(82.67±2.40)%和(74.77±3.09)%,B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)mRNA相对表达水平分别为0.96±0.04、0.87±0.02和0.71±0.01,caspase-3 mRNA相对表达水平分别为0.96±0.04、1.22±0.07和1.36±0.04,活性氧(ROS)水平分别为(99.70±3.45)%、(134.58±6.68)%和(145.72±8.96)%,细胞相对侵袭率分别为(95.33±2.72)%、(87.33±2.18)%和(78.00±1.73)%, p-Akt蛋白相对表达水平分别为1.08±0.11、 0.34Olfactomedin 4±0.19和0.29±0.17,p-PI3K蛋白相对表达水平分别为1.09±0.09、 0.55±0.16和0.42±0.19。低、高剂量实验组上述指标与对照组比较，差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论 人参皂苷Rg3对人肺癌细胞具有抵抗作用，可能与PIAY-22989临床试验3K/Akt信号通路相关。

目的 探究基于跨理论模型的干预对支气管肺炎患儿推拿辅助治疗中的应用效果。方法 选择2019年12月—2021年12月于本院接受推拿辅助治疗的70例支气管肺炎患儿为本次研究对象，采用随机数字表法将其分为对照组(35例)、观察组(35例)。对照组实施常规健康教育，观察组实施基于跨理论模型的干预。比较两组患儿的情绪障碍、依从性、行为变化情况及家长满意度。结果 干预前，观察组与对照组的社交恐惧、广泛性恐惧、学校恐惧、分离性恐惧、躯体性惊恐评分比较，差异无统计学意义(P>0.05);干预后7 d、12 d、17 d,观察组及对照组的社交恐惧、广泛获悉更多性恐惧、学校恐惧、分离性恐惧、躯体性惊恐评分均较干预前降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05)。干预前，观察组与对照组的言语拒绝、情绪焦虑、哭闹不止、面部挣扎、行为抗mediolateral episiotomy拒评分比较，差异无统计学意义(P>0.05);干预后7 d、12 d、17 d,观察组及对照组的言语拒绝、情绪焦虑、哭闹不止、面部挣扎、行为抗拒评分均较干预前降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05)。干预前，观察组及对照组患儿前意向、意向、准备、行动及维持阶段人数占比的差异无统计学意义(P>0.05);干预后17 d,观察组行动阶段的人数占比高于干预前和同期对照组(P<0.05)。干预前，两组患儿家长的护理满意度评分比较，差异无统计学意义(P>0.05);干预后，观察组患儿家长的护理满意度评分高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 对进行推拿辅助治疗的支气管肺炎患儿实施跨理论模型的干预，可进一步减轻患儿的情绪障碍，提高其治Compound C体内实验剂量疗依从性，改善患儿的推拿治疗行为，促进患儿家长满意度的有效提高。

目的：探讨精准脉冲光联合羟氯喹治疗红斑毛细血管扩张型玫瑰痤疮的疗效。方法：选取2017年2月-2022年2月笔者医院收治的62例红斑毛细血管扩张型Microscopes玫瑰痤疮患者，根据随机数字表法分为对照组（n=31）和研究组（n=31）。对照组予以羟氯喹治疗，研究组在对照组基础上予以精准脉冲光治疗，比较两组治疗后临床疗效、皮损积分、皮肤屏障功能相关指标（皮肤含水量、经皮水分流失量）及不良反应发生率。结果：研究组治疗总有效率93.55%，高于对照组的74.19%，差异有统计学意义（P<0.05）；治疗后，研究组面部红斑、毛细血管扩张、丘疹、结节、脓疱、瘙痒评分均低于对照组，研究组皮肤含水量高EPZ-6438抑制剂于对照组，经皮水分流失量低于对照组，差异均具有统计学意义（P<0.05）；研究组不良反应发生率（12.90%）与对照组（6.45%）比较，差异无统NSC 119875浓度计学意义（P>0.05）。结论：精准脉冲光联合羟氯喹治疗红斑毛细血管扩张型玫瑰痤疮疗效显著，可修复患者皮肤屏障，促进皮损症状缓解，且安全性良好。

目的 评价自噬在富氢液治疗神经病理性疼痛中的作用。方法 将鞘内置管成功的40只成年雄性SD大鼠随机分为5组：假手术组（S组）、神经病理Proteases抑制剂性疼痛组（C组）、富氢液组（H组）、自噬抑制剂组（M组）和富氢液+自噬抑制剂组（HM组），各8只。采用坐骨神经慢性压迫法（CCI）制备大鼠神经病理性疼痛模型。M组和HM组于术后鞘内注射自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA)30μg/kg,H组和HM组于术后腹腔注射AZD9291富氢液(0.6 mmol/L)10 mL/kg，其他组鞘内/腹腔给予等量生理盐水，2次/d，连续7 d。于造模前1 d和造模后1、3、5、7和14 d(T_0—T_5）测定大鼠机械刺激缩足阈值（MWT）和热刺激缩足潜伏期（TWL）。取脊髓L4—L6节段，采用Western blot法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3(LC3）Ⅱ、Beclin-1和p62蛋白的表达；并测定脊髓组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量。结果 与S组比较，C组T_2—T_5时MWT和TWL均降低，T_5时脊髓LC3Ⅱ、Beclin-1和p62蛋白表达水平升高，SOD活性降低，MDA含量增加（P<0.05）。与C组比较，H组T_2—T_5时MWT和TWL均升高，T_5时脊髓LC3Ⅱ和Beclin-1蛋白表达水平升高，p62蛋白表达水平减少，SOD活性增强，MDA含量减少（P<0.05);M组T_2—T_5时MWT和TWL均降低，TPolymer-biopolymer interactions_5时脊髓LC3Ⅱ和Beclin-1蛋白表达水平减少，p62蛋白表达水平升高，SOD活性降低，MDA含量增加（P<0.05）。与M组比较，HM组T_2—T_5时MWT和TWL均升高，T_5时脊髓LC3Ⅱ和Beclin-1蛋白表达水平升高，p62蛋白表达水平减少，SOD活性增高，MDA含量减少（P<0.05）。结论 富氢液可减轻大鼠神经病理性痛，抑制脊髓氧化应激，其机制可能与增加自噬有关。

目的：探究黄芪益肾方联合西医常规疗法对慢性肾脏病(CKD)2～4期患者临床疗效及血管内皮生长因子(VEGF)及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达及肾功能的影响。方法：选取80例CKD 2～4期中医证型为脾肾气虚、浊毒瘀selleck Dolutegravir阻型患者作为研究对象，随机分为对照组和治疗组，每组40例。对genetic manipulation照组给予西医常规治疗，治疗组在常规治疗基础上采用黄芪益肾方治疗，两组患者均治疗28 d。比较两组患者治疗前后中医证候积分变化情况，治疗前、治疗14 d、治疗28 d时促血管生长因子VEGF和HIF-1α水平，以及血肌酐(ScrPLX5622分子式)、血尿素氮(BUN)、肾小球滤过率(eGFR)的变化。结果：治疗组治疗28 d后中医证候积分较治疗前显著下降(P<0.01),且低于同期对照组(P<0.05)。两组患者治疗14 d后与治疗28 d后比较，治疗组较对照组Scr、BUN显著降低(P<0.05),eGFR显著升高(P<0.05),HIF-1α、VEGF显著升高(P<0.05);与治疗前比较，治疗组治疗后Scr、BUN显著降低(P<0.05),eGFR显著升高(P<0.05),同时HIF-1α、VEGF显著升高(P<0.05);对照组治疗后HIF-1α、VEGF无显著改变(P>0.05),治疗28 d后，Scr、BUN、eGFR较治疗前及治疗14 d后改善明显(P<0.05)。结论：黄芪益肾方可通过上调CKD 2～4期患者HIF-1α、VEGF水平，改善肾小管间质血供，抑制肾小管间质纤维化，从而改善患者肾功能，疗效显著。