RAF信号通路

目的：探讨腹膜透析（peritoneal dialysis,PD）患者血清氨基末端脑钠肽前体（N-terminal pro-B natriuretic peptide,NT-proBNP）水平与患者水合状态、心功能指标的关系，并进一步分析影响PD患者NT-proBNP水平的因素。方法：回顾性收集2019年5月—2022年1月在上海交通大学医学院附属瑞金医院PD中心随访的PD患者111例，根据多频生物电阻抗人体成分分析仪（body composition monitor,BCM）测定结果，按相对水合状态（relative hydration status,DHS），即超负荷水量（overhydration,OH）和细胞外水（extracellular water,ECW）比值，将其分为容量正常组（OH/ECW≤15%）与容量超负荷组（OH/ECW>15%）。比较2组患者血清NT-proBNP水平与水合状态关系，并进一步分析探讨影响NT-proBNP水平的相关因素。以BCM结果作为“金标准”，受试者操作特征曲线（receiver operator characteristic curve,ROC曲线）确定容量超负荷时NT-proBNP最佳阈值。并根据NT-proBNP进行分组，比较2组的临床资料。结果：容量超负荷组和容量正常组在收缩压、尿量、总尿素清除指数（urea clearance index,Kt/V）、总肌酐清除率（creatinine clearance rate,CCr）、4 h透析液肌酐/血肌酐比值（dialysate to plasma ratio for urea at 4 hoProteomics Toolsurs,4hD/PCr）、降压药种类、利尿剂种类、血红蛋selleckchem RP56976白、血清白蛋白、log2(NT-proBNP)、室间隔厚度（interventricular septal thickness,IVST）、左室后壁厚度（left ventricular posterior wall thickness,LVPWT）、左房内径（left atrial diameter,LAD）、OH、TBW、ECW、OH/TBW、ECW/TBW、ECW/ICW方面差异有统计学意义（均P<0.05）。logselleckchem Erdafitinib2(NT-proBNP)水平与收缩压、透析龄、超滤量、透析剂量、降压药分组、IVST、LVPWT、LAD、左心室收缩末期内径（left ventricular end-systolic dimension,LVESD）、左室舒张末期内径（left ventricular end-diastolic dimension,LVEDD）、OH、OH/ECW呈正相关（均P<0.05），与尿量、总Kt/V、总CCr、标准蛋白分解率（normalized protein catabolic rate,nPCR）、血红蛋白、血清白蛋白、左室射血分数（left ventricular ejection fraction,LVEF）呈负相关（均P<0.05）。NT-proBNP 4 896 ng/L可作为初筛容量超负荷的临界值，按此分组的2组患者收缩压、尿量、超滤量、总Kt/V、总CCr、IVST、LVPWT、OH/ECW指标差异有统计学意义（均P<0.05）。结论：PD患者NT-proBNP水平普遍升高，其大于4 896 ng/L提示容量超负荷，可作为初步判断PD患者容量超负荷的简易监测指标。

目的 比较带量集中采购（简称集采）前selleck NMR后3种质子泵抑制剂根除幽门螺杆菌（Hp）联合治疗方案的疗效和经济性Apoptosis抑制剂。方法 选取集采前2018年1—12月和集采后2021年1—12月在曲靖市第二人民医院接受Hp根除治疗的516例慢性胃炎患者作为研究对象，按治疗方案不同分为A、B、C组和集采A、集采B、集采C组。集采前后3组分别给予艾司奥美拉唑、泮托拉唑和奥美拉唑联合枸橼酸铋钾、阿莫西林、克拉霉素治疗，比较集采前和集采后3组的Hp根除DNA Sequencing率、消化不良症状消失率和有效率，并行经济学评价。结果 集采前后3种根除Hp联合治疗方案的根除率、消化不良症状消失率和有效率比较差异均无统计学意义（P>0.05）；集采后3组的CER显著优于集采前3组（P<0.05）；敏感性分析结果与成本-效果分析结果一致，集采后3组的CER显著优于集采前3组（P<0.05）。结论 集采后根除Hp的3种治疗方案的CER更优，为优选方案。

目的 基于NF-κB信号通路探讨清达颗粒（QDG）抑制血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的BI 10773溶解度内皮细胞损伤。方法 采用AngⅡ刺激人脐静脉内皮细胞（HUVEC）建立内皮细胞损伤模型，分别加入0、12.5、25、50、100、150μg/mL QDG干预24 h，发现12.5、25、50、100μg/mL的QDG对HUVEC细胞活力没有Brief Pathological Narcissism Inventory影响（P>0.05），因此后续实验选择100μg/mL的QDG作为干预浓度。将HUVEC细胞分为对照组、QDG组、AngⅡ组、AngⅡ+QDG组。对照组在实验过程中均用基础培养基培养；QDG组用含有100μLY2157299采购g/mL QDG的基础培养基干预12 h后，换成基础培养基继续培养；AngⅡ组用基础培养基培养12 h后，换成含有1μmol/L AngⅡ的基础培养基刺激，AngⅡ+QDG组用含有100μg/mL QDG的基础培养基干预12 h后，换成含有1μmol/L AngⅡ的基础培养基刺激。AngⅡ刺激30 min后，用Western blot检测4组细胞p-p65、p65蛋白表达量，计算p-p65/p65;AngⅡ刺激12 h后，用Western blot检测4组细胞iNOS蛋白表达量，用DAF-FM DA探针法检测4组细胞中NO的含量；AngⅡ刺激24 h后，用qPCR法检测4组细胞中TNF-α、IL-6 mRNA相对表达水平。结果 与对照组比较，QDG组p-p65/p65、iNOS的蛋白表达量及TNF-α mRNA相对表达水平均显著降低（P<0.05）,NO含量及IL-6 mRNA相对表达水平差异无统计学意义（P>0.05）;AngⅡ组p-p65/p65、iNOS的蛋白表达量及TNF-α、IL-6 mRNA相对表达水平均显著升高（P<0.05）,NO含量显著下降（P<0.05）；与AngⅡ组比较，AngⅡ+QDG组p-p65/p65、iNOS的蛋白表达量及TNF-α、IL-6的mRNA相对表达水平均显著降低（P<0.05）,NO含量显著升高（P<0.05）。结论QDG通过下调NF-κB信号通路，抑制AngⅡ诱导的HUVEC细胞中的炎症反应，从而减轻内皮细胞损伤。

目的 分析美多巴联合普拉克索治疗帕金森病(PD)的效果及对情绪障碍、认知功能及皮质下脑区血流代谢的影响。方法 选取2021年1月至2023年1月永煤集团总医院收治的70例PD患者，按随机数表法分为对照组(单纯美多巴治疗，35例)和联合组(美多巴联合普拉克索治疗，35例)。观察两组治疗效果，比较两组治疗前后情绪障碍[视觉模拟情绪量表(VAMS)、贝克抑郁量表(BDI)和状态-特质焦虑问卷(STAI)],认知功能[痴呆评定量表(DRS)、简明精神状INCB018424体内态评定量表(MMSE)],皮质下脑区血流代谢，记录两组不良反应发生率。结果 联合组治疗总有效率(94.29%)高于对照组(77.14%)(P<0.05);治疗后，两组VAMS、BDI和STAI评分均与治疗前比较，差异有统计学意义(P<0.05),且联合组治疗后VAMS、BDI和STLiproxstatin-1AI评分与对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05);治疗后，两组DRS和MMSE评分均升高(P<0.05)Tissue Culture,且联合组各评分高于对照组(P<0.05);治疗后，两组搏动指数和阻力指数均降低(P<0.05),平均血流速度均升高(P<0.05),且联合组治疗后参数与对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05);两组间不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 美多巴联合普拉克索治疗PD患者效果显著，能有效缓解患者情绪障碍和认知功能，改善皮质下脑区血流代谢，值得应用。

结直肠癌(ColoreBYL719小鼠ctAZD9291纯度al cancer, CRC)是一种全球性的消化道癌症，其致死率和发病率位居全球前三，给全人类的身体健康带来巨大威胁。常见的结直肠癌化疗药物具有一定副作用，因此人们正在积极寻求低副作用的天然产物对抗CRC。本研究通过体外细胞实验探究茶树菇多糖(Agrocybe cylindracea polysaccharide, ACP)抑制结直肠癌细胞增殖的作用机制。结果显示，茶树菇多糖明显抑制了结直肠癌细胞(HCT-116、CT26)增殖且呈浓度和时间依赖性，而对正常肠上皮细胞IEC-6无明显毒性。此外，RNA-seq结果指出茶树菇多糖下调了氧化磷酸化通路。进一步的实验表明茶树菇多糖导致了活性氧(Reactive oxygen species, ROS)积累、线粒体膜电位丧失和功能障碍，进而促进HCT-116细胞凋亡。值得关注的是，NAC(N-acetyl-L-cysteine)能通过清除ROS抑制茶树菇多糖诱导的细胞凋亡。综上实验结果表明，茶树菇多糖能够通过ROS-线粒体功能障碍通路诱导HCT-116细胞凋亡，最终达到抑制其Elastic stable intramedullary nailing增殖的目的，为开发治疗结直肠癌的低敏感性药物提供新线索，同时为茶树菇多糖的利用提供理论依据。

心肌能量代谢障碍是脓毒性心肌病重要的致病因素之一。中医学认为，脓毒症性心肌病所致心肌线粒体能量代谢与心阳关系密切，因此在Calbiochem Probe IV辨证论治的基础上，以温补类药物的应用为主，根据不同分型及阶段佐以清热、活血疗法。中医药治疗脓毒性心肌能量代谢障碍具有多靶点、多重调节的优势，主要通过减轻氧化应激、维持线粒体膜电位、抑制凋亡、保护线粒体结构、调节呼吸酶活性及激素分泌、调整底物代谢比例等方面改善心肌细胞能量代谢。目前，脓毒症selleck产品性心肌病病理因素的相关研究尚未完善，可进一步加强信号通路、分子信号等相关机制研究。此外，对于中医药治疗脓毒症心肌功能障碍的研究，除了单味中药或方剂有效成分的Ipatasertib半抑制浓度研究，亦可从整体观角度出发，对脓毒症心肌功能障碍的证型规律进行总结，归纳各证候相应的治法，以期达到更好的临床疗效。

糖尿病肾病是糖尿病最常见的并发症之一，是导致终末期肾病的常见原因，严重影响患者的生herpes virus infection活质量及寿命。目前临床上主要通过药物控制原发病，延缓肾脏进展，当患者进入终末期肾病时仅能依靠selleck HPLC肾脏替代治疗。而中医药在治疗糖尿病肾病时确有疗效，可延缓疾病进展，以冬虫夏草为主要活性成分的中成药在治疗糖尿病肾病的方面取得显著优势，具有补肾益肺，止血化痰的功效，其药用历史悠久及作用广泛。多项GW4869临床试验网络药理学研究表明，冬虫夏草中通过虫草多糖、核苷、麦角甾醇等活性成分治疗糖尿病肾病。本文通过查阅相关文献，归纳总结冬虫夏草治疗糖尿病肾病的作用机制，从抗氧化应激、降低血糖、抗炎、抗纤维化、调节巨噬细胞活性、调节自噬作用等方面展开综述，明确冬虫夏草治疗本病的主要成分及相关信号通路，为糖尿病肾病的相关治疗及研究提供参考。

老山芹,学名短毛独活(Heracleum moellendorffii Hance),是东北林区的主要山野菜种类之一,其幼嫩茎叶是美味蔬菜,全株既是优质Female dromedary饲料、又可入药,这种药食同源的山野菜备受大众追捧,但老山芹种子具有较强休眠特性,种子发芽率低且出苗不整齐等问题严重制约了老山芹规模化人工栽培和深度开发,且种子采收时成熟度差异较大。为突破限制老山芹深度开发和商业化生产的瓶颈,本研究以夏季采收老山芹种子为实验材料,按照种子质量将老山芹种子分为高成熟度(平均质量12.5 mg)、中成熟度(平均质量9.2 mg)和低成熟度(平均质量6.1 mg)三类,分别层积处理,系统研究层积过程中不同成熟度种子种胚发育进程差异、种子和胚形态指标变化、发芽率动态变化、主要糖代谢物质变化、糖代谢关键酶活性变化、糖代谢关键酶基因的生信分析及其表达差异变化等,为研究老山芹种子休眠与萌发调控机制、促进老山芹产业化发展从生理、分子水平提供理论依据和技术支撑。结果表明:(1)采收时不同成熟度老山芹种子可观测到的种胚发育时期主要集中在心形胚及鱼雷形胚两时期,Gefitinib使用方法心形胚所占比例随着成熟度的增加而降低。层积过程中不同成熟度种子胚发育进程存在较大差异;(2)层积过程中高成熟度种子比中和低成熟度种子在种胚发育速率、胚率等方面均表现出显著优势且发芽率高;(3)层积过程中蔗糖和淀粉含量呈先小幅度增加、后迅速降低的变化趋势;葡萄糖和果糖含量呈先缓慢降低、后小幅增加、最后急剧降低的变化趋势;(4)淀粉酶和蔗糖合成酶酶活性呈先缓慢下降、后迅速上升的变化趋势;果糖激酶活性呈先缓慢上升、后小幅下降、最后迅速上升的变化趋势;(5)层积结束时,高、中和低三类成熟度种子发芽率分别为43.70%、34.90%和28.41%;(6)关键酶基因生物信息学分析表明,Hm ACR12、Hm SUS4、Hm FRK1和Hm PGIC关键酶基因编码的蛋白氨基酸长度在301-808区间,相对分子质量范围是33241.96-93002.67 Da,理论等电点大致在5.14-6.19之间,不稳定系数在31.53-48.71间,均属于稳定、亲水性蛋白质。脂肪族系数在62.67-99.13区间。通过构建四种蛋白在不同植物中的进化树,并分析其结构域与核心基序特征,表明四种蛋白在不同物种中具有相同的结构域与核心基序,在进化中具有高度的保守性,可JNJ-42756493临床试验能行使相似功能。(7)随着层积时间的延长,不同成熟度老山芹种子Hm ACR12和Hm SUS4基因表达水平呈“降-升”、Hm FRK1基因表达水平呈“升-降-升”、Hm PGIC基因呈“降-升-降”变化趋势,其中高成熟度种子最早升、降至极值,而中、低成熟度种子分别比高成熟度种子晚20 d、40 d,且Hm SUS4、Hm FRK1表达水平与其酶活性变化相一致;

目的我国过敏性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)发病率不断升高,同时大气颗粒物污染仍非常严峻,但大气颗粒物对AR的影响及其机制仍不清楚。黑Emricasan碳(black carbon,BC)是PM2.5中的关键毒性组分之一,本研究通过体内和体外实验探讨BC颗粒暴露对AR的影响以及潜在机制,为大气污染暴露下过敏性鼻炎的健康风险研究提供理论基础。方法使用卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)作为抗原构建AR模型小鼠,依据环境监测浓度,计算出小鼠BC处理浓度。采用鼻腔滴注的方法给与AR模型小鼠和正常小鼠BC暴露,比较正常小鼠和AR模型小鼠的行为学、组织学和氧化应激生物指标,以明确PM2.5暴露是否可以加重花粉诱导的AR小鼠症状并促进鼻粘膜损伤。使用BEAS-2B细胞,评估急性BC染毒对细胞的毒性效应以及对氧化应激相关指标的影响。结果额外的BC暴露能够导致AR小鼠打喷嚏的次数显著增加,通过组织学分析发现,BC处理的AR模型小鼠的鼻粘膜上皮组织中杯状细胞的数量和粘液的分泌量显著增加;免疫染色显示,上皮组织紧密连接蛋白ZO-1表达水平下降。采集小鼠的鼻腔灌洗液,发现BC处理的AR模型小鼠鼻腔灌洗液中反映氧化应激的8-isoprostane F2α以及MDA水平显著高于未处理小鼠。体外实验同样发现,BC处理Lapatinib说明书能够引起细胞氧化应激标志物水平增加。结predictive genetic testing论 BC颗粒物能够增加小鼠和细胞的氧化应激水平,从而加重过敏性鼻炎的症状。

研究背景:胰腺癌是一种恶性程度极高、预后极差的消化系统肿瘤,被称做“癌中之王”。在全球范围内其发病率及死亡率呈逐步上升趋势。胰腺癌起病隐匿,缺乏特异的临床表现,且无敏感的早期检测方法,大多数胰腺癌患者在确诊时已处晚期丧失手术机会,只有不足20%的患者符合条件可接受根治性手术治疗,但接受根治性手术的患者术后复发率依然很高,预后很差。除了手术治疗,放、化疗也经常应用于胰腺癌各阶段的治疗,但患者常由于获得性耐药、对放疗不敏感等因素,即使行规范放、化疗,获得的疗效也相当有限,并未大幅改善患者的总体生存时间。免疫治疗、靶向治疗等一些新的治疗方法在胰腺癌中的疗效也并不理想。因此,深入探究胰腺癌发生发展的分子机制,寻找敏感的肿瘤标志物、有效的治疗靶点、耐药的解决方案对于实现胰腺癌的早期诊断、早期治疗、延缓复发以及改善预后具有至关重要的作用。CDK18最初被认为是一种神经元激酶,可磷酸化微管相关蛋白TAU。随着研究的深入,人们发现CDK18可通过多种方式影响细胞的生命活动。例如,CDK18可与细胞周期蛋白A2/E结合,发挥其细胞周期依赖性激酶的作用;CDK18可以促进复制应激信号以及基因组的稳定性;CDK18还可以通过负向调控局部LY2835219使用方法粘着斑激酶的活性进而调节细胞的迁移和粘附。此外,有研究表明CDK18在一些恶性肿瘤中异常表达并影响肿瘤的进展,提示CDK18可能是恶性肿瘤的驱动因素之一,但CDK18在胰腺癌中扮演着什么角色仍然不清楚。我们拟进一步探索CDK18对胰腺癌恶性表型以及吉西他滨化疗敏感性的影响,阐明CDK18在胰腺癌中的作用机制,为发现胰腺癌新的癌基因、寻找新的有效靶点提供理论依据。方法:1构建吉西他滨耐药的胰腺癌人源肿瘤异种移植模型(Patient-derived tumor xenograft,PDX),检测吉西他滨耐药组及对照组中的差异表达基因。通过高通量测序分析两组PDX模型中的差异表达基因情况。通过实时荧光定量聚合酶链反应(Quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western blot,WB)、免疫组化实验对两组PDX模型中CDK18的表达情况进行验证。2胰腺癌组织及癌旁组织中CDK18表达的检测。通过q RT-PCR、WB、免疫组化实验对胰腺癌组织及癌旁组织中CDK18的表达进行检测。3胰腺癌细胞和正常胰腺导管上皮细胞中CDK18表达的检测。通过q RT-PCR、WB检测胰腺癌细胞(As PC-1,Capan-1,Bx PC-3,CFPAC-1,PANC-1,MIA Paca-2,Capan-2)和正常胰腺导管上皮细胞(HPDE6-C7)中CDK18的表达差异,并筛选实验用胰腺癌细胞系。4 CDK18的表达与胰腺癌患者的临床病理特征及生存期相关性分析。通过46例胰腺癌标本评估CDK18表达水平与患者年龄、性别、饮酒史、吸烟史、CEA、CA19-9、肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移、远处转移的相关性。采用Kaplan-Meier方法分析CDK18表达水平与胰腺癌患者生存期之间的关系。5检测CDK18对胰腺癌增殖、干性及细胞周期的影响。在体外,通过CCK-8实验、成球实验、细胞周期实验分析差异表达CDK18对胰腺癌细胞增殖、干性及细胞周期的影响,进一步通过q RT-PCR、WB检测差异表达CDK18的胰腺癌细胞中干性相关基因(OCT4,NANOG,Sox2,CD133)的表达。在体内,通过裸鼠成瘤实验分析体内差异表达CDK18对胰腺癌生长情况的影响,进一步通过免疫组化检测差异表达CDK18的胰腺癌移植瘤中增殖标志物(Ki-67)和干性标志物(CD133)的表达。6检测CDK18对胰腺癌吉西他滨化疗敏感性的影响。在体外,通过克隆形成实验、CCK-8实验分析差异表达CDK18对胰腺癌细胞吉西他滨化疗敏感性的影响。在体内,通过裸鼠成瘤实验分析差异表达CDK18对胰腺癌皮下移植瘤的吉西他滨化疗敏感性的影响。7检测ALKBH5对CDK18稳定性的影响。通过RNA甲基化免疫共沉淀q PCR(Me RIP-q PCR)检测胰腺癌细胞(As PC-1,Capan-2)和正常胰腺导管上皮细胞(HPDE6-C7)中CDK18的N6-甲基腺苷(m6A)富集程度,通过q RT-PCR分析46例胰腺癌标本中ALKBH5与CDK18的相关性。通过q RT-PCR、WB、Me RIP-q PCR分析ALKBH5对胰腺癌细胞中CDK18表达及m6A富集程度的影响。通过放线菌素D实验分析ALKBH5对CDK18稳定性的影响。8检测CDK18在胰腺癌中的作用通路。通过高通量测序技术分析由CDK18调控的下游信号通路,并通过WB检测差异表达CDK18的胰腺癌细胞中靶通路相关蛋白表达的情况。结果:1吉西他滨处理组PDX模型中CDK18的表达明显高于生理盐水处理组。通过高通量测序发现CDK18在吉西他滨处理组和生理盐水处理组的PDX模型中差异表达,接着通过q RT-PCR、WB、免疫组化检测吉西他滨组和生理盐水组中CDK18的表达,发现吉西他滨处理组的CDK18表达明显高于生理盐水处理组。2胰腺癌组织中CDK18的表达明显高于癌旁组织。通过q RT-PCR、WB、免疫组化检测胰腺癌组织和癌旁组织中CDK18的表达,发现胰腺癌组织中的CDK18表达明显高于癌旁组织。3胰腺癌细胞中CDK18的表达明显高于正常胰腺导管上皮细胞。通过q RT-PCR、WB检测胰腺癌细胞系和正常胰腺导管上皮细胞系中CDK18的表达,发现胰腺癌细胞系(As PC-1,Capan-1,Bx PC-3,CFPAC-1,PANC-1,MIA Paca-2,Capan-2)中CDK18的表达明显高于正常胰腺导管上皮细胞系(HPDE6-C7)。在7株胰腺癌细胞系中,As PC-1细胞和CFPAC-1细胞的CDK18表达最低,Bx PC-3细胞和Capan-2细胞的CDK18表达最高,选此4株细胞作为实验细胞系。4 CDK18的表达与胰腺癌患者的肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移、远处转移呈正相关,与胰腺癌患者的生存期呈负相关。通过分析46例胰腺癌患者的CDK18表达和患者临床病理特征,发现CDK18表达与胰腺癌患者的肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移以及远处转移呈正相关。通过Kaplan-Meier方法分析CDK18的表达与胰腺癌患者生存期之间的关系,发现CDK18表达与胰腺癌患者的生存期呈负相关。5 CDK18可促进胰腺癌细胞增殖、干性及细胞周期进程。在体外,通过CCK-8实验、成球实验、细胞周期实验分析差异表达CDK18对胰腺癌细胞增殖、干性及细胞周期的影响,发现CDK18可促进胰腺癌细胞的增殖、干性及细胞周期进程,进一步通过q RT-PCR、WB检测差异表达CDK18对胰腺癌细胞中干性相关基因表达的影响,发现CDK18可促进胰腺癌细胞中干性相关基因(OCT4,NANOG,Sox2,CD133)的表达。在体内,通过裸鼠成瘤实验分析体内差异表达CDK18对胰腺癌生长情况的影响,发现CDK18可促进胰腺癌生长,进一步通过免疫组化检测差异表达CDK18对移植瘤中增殖标志物和干性标志物表达的影响,发现CDK18可促进增殖标志物(Ki-67)和干性标志物(CD133)的表达。6 CDK18可降低胰腺癌对吉西他滨化疗的敏感性。在体外和体内,通过克隆形成实验、CCK-8实验、裸鼠成瘤实验分析差异表达CDK18的胰腺癌细胞的吉西他滨化疗敏感性的变化,发现CDK18降低了胰腺癌对吉西他滨化疗的敏感性。7 ALKBH5可降低CDK18的稳定性。通过Me RIP-q PCR检测胰腺癌细胞和正常胰腺导管上皮细胞中CDK18的m6A富集程度,发现胰腺癌细胞(As PC-1,Capan-2)中CDK18的m6A富集程度明显高于正常胰腺导管上皮细胞(HPDE6-C7)。通过q RT-PCR分析46例胰腺癌标本中ALKBH5与CDK18的相关性,发现ALKBH5和CDK18的表达存在显著负相关。通过q RT-PCR、WB、Me RIP-q PCR分析ALKBH5对胰腺癌细胞中CDK18表达及m6A富集程度的影响,发现ALKBH5可降低CDK18的表达及m6A的富集程度。通过放线菌素D实验分析ALKBH5对Ccross-level moderated mediationDK18稳定性的影响,发现ALKBH5可降低CDK18的稳定性。8 CDK18通过Hippo通路在胰腺癌中发挥作用。通过高通量测序技术分析差异表达CDK18的胰腺癌细胞,发现二者的差异表达基因在Hippo通路明显富集。为明确CDK18是否参与调控Hippo通路,通过WB检测差异表达CDK18的胰腺癌细胞中Hippo通路相关蛋白表达情况,发现过表达CDK18使Hippo通路相关蛋白p-LATS2,p-YAP的表达明显下调,抑制CDK18则得到相反结果,进一步验证了CDK18可抑制Hippo通路活性。结论:1 CDK18在胰腺癌中高表达,并与患者肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移、远处转移呈正相关,与胰腺癌患者的生存期呈负相关。2 CDK18可促进胰腺癌细胞增殖、干性及细胞周期进程,降低胰腺癌对吉西他滨化疗的敏感性。3 m6A修饰介导的CDK18在胰腺癌中高表达受ALKBH5调控。4 CDK18通过Hippo通路在胰腺癌获悉更多中发挥作用。