RAF信号通路

目的：探讨小剂量右美托咪定对老年腹腔镜手术患者围术期心血管反应及应激情况的影响。方法：选取2020年4月～selleckchem MRTX11332022年4月至陕西省人民医院行腹腔镜手术的120例老年患者作为研究对象，根据随机数字表法将其分为观察组和对照组，各60例。麻醉诱导前，观察组予以右美托咪定0.5μg/kg静脉泵注，对照组予以等容量0.9%氯化钠注射液静脉泵注，持续时间均为10 min。术中麻醉维持，观察组予以右美托咪定0.2μg/（kgEmpagliflozin半抑制浓度·h）持续静脉泵注，对照组予以0.2μg/（kg·h）速率持续静脉泵注等量氯化钠注射液，均于手术结Bioconversion method束前30 min停止泵注。比较两组患者围术期指标、心血管反应指标、应激反应指标和炎症因子水平。结果：观察组术中舒芬太尼用量、术后24 h静脉自控镇痛（PCIA）泵按压次数明显少于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；观察组拔管时间少于对照组，但差异无统计学意义（P>0.05）。两组患者心率（HR）、平均动脉压（MAP）组间、时间及交互比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；观察组气管插管即刻（T1）、气管插管后30 min(T2)和出手术室时（T3）时点HR、MAP明显低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。观察组术后丙二醛（MDA）水平明显低于对照组，过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）水平显著高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。观察组术后C反应蛋白（CRP）、白介素（IL）-6及肿瘤坏死因子（TNF）-α水平均明显低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：在腹腔镜手术中使用小剂量右美托咪定，可有效维持老年患者围术期血流动力学稳定，降低氧化应激反应和炎症因子水平。

目的 了解中山地区淋球菌流行株对常见7种抗生素的耐药趋势，为本地区淋病临床防治提供有效实验室依据。方法 对2018-2022年中山地区东、南、西、北和中部12间医疗机构收集的淋球菌株进行复苏、分Immune trypanolysis纯和鉴定后，采用WHO推荐的琼脂稀释法，对7种抗生素（青霉素、四环素、环丙沙星、头孢曲松、头孢克肟、大观霉素、阿奇霉素）进行最MDV3100低抑菌浓度(MIC)测定，用纸片酸度法检测其β-内酰胺酶。结果 5年间共监测淋球菌943株，其对青霉素、四环素、环丙沙星、阿奇霉素（2020-2022年）、大观霉素的平均耐药率分别为84.73%、93.85%、99.79%、12.74%；头孢曲松、头孢克肟的平均中敏率分别为8.70%、11.98%,PPNG株（30.57%～64.39%）（χ~2=51.985,P<0.01）和TRNG株（30.57%～52.68%）（χ~Ceralasertib作用2=30.931,P<0.01）呈显著的上升趋势。结论 青霉素、四环素、环丙沙星均保持稳定的高耐药率，已不适用于临床治疗；头孢菌素（中敏率）、阿奇霉素、大观霉素呈较低耐药率，仍可推荐为本地区治疗淋病的首选药物。

目的 了解中山地区淋球菌流行株对常见7种抗生素的耐药趋势，为本地区淋病临床防治提供有效实验室依据。方法 对2018-2022年中山地区东、南、西、北和中部12间医疗机构收集的淋球菌株进行复苏、分Immune trypanolysis纯和鉴定后，采用WHO推荐的琼脂稀释法，对7种抗生素（青霉素、四环素、环丙沙星、头孢曲松、头孢克肟、大观霉素、阿奇霉素）进行最MDV3100低抑菌浓度(MIC)测定，用纸片酸度法检测其β-内酰胺酶。结果 5年间共监测淋球菌943株，其对青霉素、四环素、环丙沙星、阿奇霉素（2020-2022年）、大观霉素的平均耐药率分别为84.73%、93.85%、99.79%、12.74%；头孢曲松、头孢克肟的平均中敏率分别为8.70%、11.98%,PPNG株（30.57%～64.39%）（χ~2=51.985,P<0.01）和TRNG株（30.57%～52.68%）（χ~Ceralasertib作用2=30.931,P<0.01）呈显著的上升趋势。结论 青霉素、四环素、环丙沙星均保持稳定的高耐药率，已不适用于临床治疗；头孢菌素（中敏率）、阿奇霉素、大观霉素呈较低耐药率，仍可推荐为本地区治疗淋病的首选药物。

(S)-2-氨基丁醇同时具有羟基及氨基官能团，是多种重要药物分子的关键手性中间体，生物合成(S)-2-氨基丁醇尚缺少有效的酶元件。以塞格尼氏菌(Segniliparus rugosus)来源的羧酸还原酶SrCAR为研究对象，通过对实验室已有SrCAR突变文库进行筛选测试，结合活性位点共进化分析，同时利用组合活性中心饱和突变策略(Combinatorial active-site saturation test, CAST)构建新的突变体文库，经测试最终获得优势突变体XDehydrogenase抑制剂H7(G430V/E533F/A627N)。该突变体催化底物N-Boc-(S)-2-氨基丁酸到醛产物的活性(k_(cat)/K_Dolutegravirm)较野生型SrCAR提高2.1倍，热熔值(T_m)提升2.3℃。进一步通过引入荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)来源的醇脱氢酶PfADH,可还原N-Boc-(S)-2-氨基丁醛到醇产物。XH7和PfADH的双酶共表达体系反应5 h即可将20 mmol/L底物实现几乎完全转化，转化率达到99%,并经脱Boc保护与分离纯化获得终产物(S)-2-氨基丁醇，得率为60%。通过分子动力学模拟解析最优突变体活性及热稳定性提高的分子机制，为SrCAR酶设计改造提供新的研究思路，拓展酶法合成(S)-2氨基丁醇的生物酶工具箱，可为类似高附加值医药中间体的Immunochromatographic assay生物合成提供理论和实践指导。

氧化应激是疾病和衰老过程中常见的应激状态。外源性抗氧化剂能有效对抗氧化应激和缓解氧化应激相关疾病症状的发生。而抗氧化剂作为营养补充剂一直是食品营养研究关注的热点。食品中含有许多抗氧化的活性成分,其中食源性抗氧化剂来源于植物和动物提取物中的天然活性成分,包括蛋白质、多肽、多糖、酚类和类黄酮等。临床营养研究中,食源性抗氧化剂的补充已被证明可以对某些慢性疾病发挥预防及缓解Infection types症状的生理功能。因此,筛选有效的食源性物质作为抗氧化补充剂至关重要。体外抗氧化性能研究是筛选的第一步,选择合适的方法可以合理评价抗氧化物质的性质。目Adezmapimod小鼠前对于食源性物质抗氧化活性的评价方法缺乏系统性的总结和讨论。本文介绍了各种体外抗氧化性能评价方法的优缺点、适用性及作用机理,同时提供了一套筛IACS-10759分子式选食源性抗氧化补充剂的应用策略。

目的 挖掘呕吐毒素(deoxynivalenol, DON)降解酶,应用双酶体系实现呕吐毒素的高效降解。方法 利用生物信息学技术从国家生3-MA IC50物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information, NCBI)数据库筛选潜在DON降解酶AKR18A2,在大肠杆菌EscherichiacoliBL21(DE3)中进行重组和异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,经镍亲和层析纯化并鉴定AKR18A2的酶学性质,构建德沃斯氏菌(Devosiasp.)来源的DON降解酶QDDH和AKR18A2双酶作用体系,实现DON的高效降解。结果 来自鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas sp.)的呕吐毒素降解酶(AKR18A2)由343个氨基酸组成。该酶属于醛酮还原酶超家族,45℃和pH7.0为最适反应条件。AKR18A2可在24h内降解15.42%DON,而双酶(QDDH和AKR18A2)协同作用4h后对DON的降解率Pexidartinib作用可提高至98.02%。结论 本研究鉴定了一种新型DON降解酶AKR18Atethered membranes2,并首次创新建立双酶联用体系进一步实现DON的高效降解。

糖尿病,特别是Ⅱ型糖尿病,影响全球很大一部分的人口,估计有500亿成年人受到影响。糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)是糖尿病中较为常见的微血管并发症,病程进展迅速且具有不可逆性,严重威胁患者生命安全。因此寻找延缓DN进程的药物,为患者争取更多的生存时间,具有重大意义。人参为百草之王,含有人参皂苷、人参多糖(Ginseng Polysaccharides,GPS)、人参多肽和少量的甾类及萜类小分子等化合物。研究报道,GPS具有抗氧化、免疫调节、抗炎等作用。本研究通过纯合子糖尿病小鼠(B6.BKSLeprdb,db/db)模型观察GPS对DN的保护作用,并初步探讨其作用机制。实验目的:观察GPS对db/db小鼠DN的保护作用,并初步探讨其作用机制。实验方法:将12周龄db/db小鼠依据血糖水平并结合体重随机分为模型(Model)组、GPS低剂量组及GPS高剂量组,m/m小鼠为对照(Control)组。Control组和Model组均灌胃(ig)给予蒸馏水,GPS低、高剂量组分别ig给予GPS biorelevant dissolution100、200 mg/kg,1次/天,连续给药8周。每周记录小鼠体重及血糖,末次给药1 h后,取尿液,检测尿液中尿素氮(Urea Nitrogen,BUN)、尿肌酐(Urine Creatinine,UCR)、尿蛋白(Urine Protein,UP)含量;取血液,检测血清中总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(High Density Lipoprotein,HDL-c)、低密度脂蛋白(Low Density Lipoprotein,LDL-c)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)含量;取肾组织,计算肾脏指数,测定丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活性;苏木精-伊红染色法(Hematoxylin Eosin Staining,HE)检测肾组织病理学改变,过碘酸雪夫染色(Periodic Acid Schiff Stain,PAS)检测肾小球系膜基质及细胞外基质(Extracellular Matrixc,ECM)增生情况,Masson染色检测肾纤维化程度,透射电镜检测肾小球基底膜(Glomerular Basement Membrane,GBM)厚度,免疫组化技术检测肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth Muscle Actin,α-SMA)表达水平,Western Blot检测肾组织中TGF-β1、p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3蛋白表达水平。实验结果:1.体重、血糖及肾脏指数:与Control组比较,Model组小鼠体重和空腹血糖均显著升高(P<0.01),肾脏系数显著降低(P<0.01);与Model组相比,GPS 100、200 mg/kg组的小鼠肾脏指数显著提升(P<0.05),体重和血糖无明显变化,均无统计学意义(P>0.05)。2.UCR、BUN及UP含量:与Control组比较,Model组小鼠尿液中UCR、BUN及UP明显升高(P<0.01);与Model组比较,GPS 200 mg/kg可显著降低小鼠尿液中UCR、BUN、UP含量(P<0.01),GPS 100 mg/kg可显著降低小鼠尿液中UP含量(P<0.05),GPS 100 mg/kg有降低db/db小鼠尿液中UCR、BUN含量的趋势,但无统计学意义(P>0.05)。3.TC、TG、HDL-c、LDL-c含量:与Control组比较,Model组血清中TC、TG、LDL-c含量显著升高(P<0.01),HDL-c含量显著降低(P<0.01);与Model组比较,GPS 200 mg/kg可显著降低小鼠血清中TC含量(P<0.01),提高血清HDL-c含量(P<0.05),GPS 100、200 mg/kg可显著降低小鼠血清中TG(P<0.01)、LDL-c含量(P<0.05),GPS 100 mg/kg有降低小鼠血清中TC含量、升高HDL-c含量的趋势,但无统计学意义(P>0.05)。4.TNF-α、IL-1β及IL-6含量:与Control组比较,Model组小鼠血清中TNF-α、IL-1β及IL-6含量显著升高(P<0.01);与Model组比较,GPS 100、200mg/kg可显著降低血清中TNF-α及IL-6含量(P<0.01),GPS 200 mg/kg可显著降低血清中IL-1β含量(P<0.01),GPS 100 mg/kg有降低血清中IL-1β含量的趋势,但无统计学意义(P>0.05)。5.MDA含量及SOD活性:与Control组相比,Model组MDA含量显著升高(P<0.01),SOD活性显著降低(P<0.01);与Model组相比,GPS 100、200 mg/kg可显著降低MDA含量(P<0.05或P<0.01),显著升高SOD活性(P<0.05或P<0.01)。6.组织病理学观察:6.1 HE染色:Control组小鼠肾小球结构形态正常、清晰,基底膜光滑,肾小球形态规则,肾间质无异常,肾小管排列整齐,无炎性细胞浸润;Model组小鼠肾小球体积增大,基底膜增厚,周围可见炎性细胞浸润,且肾小管结构紊乱,出现扩张现象;GPS 100 mg/kg组小鼠肾脏有所改善;GPS 200 mg/kg组小鼠肾小球体积明显减小,基底膜厚度降低,仅有少量炎性细胞浸润,肾小管排列紧密。6.2 PAS染色:Control组小鼠肾脏结构完整、清晰,GBM光滑,肾小球形态规则,肾小管排列紧密整齐,无炎性细胞浸润,未见肾小囊中糖原沉积;Model组小鼠GBM增厚,ECM积聚,肾小囊内有大量紫红色糖原沉积;GPS100 mg/kg组小鼠GBM增厚、ECM积聚,肾小囊内沉积紫红色糖原减少;GPS200 mg/kg组小鼠肾小球形态正常,肾小管排列规则,GBM厚度基本正常,肾小囊有少量糖原沉积现象。6.3 Masson染色:Control组小鼠肾小管排列正常及肾小球形态正GSK1349572 MW常,未见胶原纤维增生,可见管状基底膜;Model组小鼠肾间质组织中可见大量染色胶原,间质纤维组织呈束状和网状增生;GPS 100 mg/kg组小鼠肾小球体积减小,纤维组织增生症状减轻;GPS 200 mg/kg组小鼠肾小管排列较规则,可见少量胶原纤维增生。6.4透射电镜:Control组小鼠肾组织GBM宽度正常,足突明显且呈现梳子齿状;Model组小鼠足突融合明显呈现线状且排列紊乱,ECM增生及GBM增厚;GPS 100 mg/kg组小鼠GBM厚度变薄,足突融合程度降低,ECM增生程度减轻;GPS 200 mg/kg组小鼠足突排列重现梳子齿状,足突融合现象显著减轻,GBM厚度变薄,ECM增生程度减轻。7.免疫组织化学:Control组小鼠肾小管、肾小球及肾间质均未见α-SMA表达,仅在血管平滑肌细胞少量表达;Model组小鼠α-SMA蛋白除在肾小管平滑肌肌层外,部分肾小管上皮细胞内出现棕黄色颗粒,主要在GBM侧和肾间质细胞胞浆中表达;GPS 100、200 mg/kg组小鼠GBPhospholipase (e.g. 抑制剂M侧和肾间质细胞胞浆中α-SMA蛋白表达减少。8.TGF-β1、Smad2/3蛋白表达:与Control组相比,Model组小鼠肾组织中TGF-β1、p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与Model组比较,GPS 100、200 mg/kg组的p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad蛋白表达水平均显著降低(P<0.01),GPS 100、200 mg/kg组的TGF-β1蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。实验结论:GPS可改善db/db小鼠肾功能,调节血脂代谢,抑制炎症因子释放,提高抗氧化能力,减轻DN的肾损伤,延缓肾纤维化发生发展,其作用机制可能与抑制TGF-β1/Smad2/3信号通路有关。

卵菌种类繁多,目前已知的卵菌超过1 800种,在世界范围内引起多种动植物疾病。STI sexually transmitted infection其中植物病原卵菌可对农业生产及自然生态系统构成严重的威胁。辣椒疫霉(Phytophthora capsici)属于疫霉属植物病原卵菌,是甾醇缺陷型生物,可侵染包括茄科、葫芦科等多种植物,导致根、茎及果实腐烂等多种症状,给农业生产造成巨大损失。笔者课题组前期研究发现,辣椒疫霉自身没有甾醇合成能力,但其基因组中保留了甾醇生物合成通路中的基因PcDHCR7,其在疫霉体内的生物学功能尚不明确。本研究采用CRISPR/Cas9介导的原生质体转化方法,成功获得Y-27632供应商了辣椒疫霉PcDHCR7基因纯合敲除突变体,并测定了PcDHCR7基因敲除后对辣椒疫霉不同发育阶段和致病力等的影响,结果显示突变体的菌丝生长速率和致病力均显著下降,芽管不能正常伸长并伴有顶端菌丝分支异常、畸形等现象。进一步结合酵母异源表达系统对其开展了酶活研究,发现与辣椒疫霉亲本菌株相比,PcDHCR7基因敲除突变体丧失了甾醇Δ7还原酶活性,即无法将麦角甾醇转化为菜籽甾醇。上述结果表明,辣椒疫JQ1化学结构霉虽为甾醇缺陷型生物,但其PcDHCR7仍保留了甾醇Δ7还原酶的酶活,并在病原菌的生长发育中发挥着重要功能。

目的 分析莫沙必利辅助四联疗法对功能性消化不良幽门螺杆菌阳性患者临床疗效的影响。方法 选取功能性消化不良幽门螺杆菌阳性患者100例，随机分为对照组和观察组，各50例。两组患者均予以健康指导、抗幽门螺杆菌四联疗法治疗。观察组患者再予以莫沙必利辅助治疗。两组患者均连续治疗2周。比较两组治疗情况。结果 治疗2周后，两组患者GAS级MTL水平均较治疗前上升，且观察组高于对照组(P<0.05);观察组患者临床症状缓S63845纯度解时间短于对照组，满意度高于对照组(P<0.05);观察组临床总有效率高于对照组(P<0.05);两组患者治疗期间药物不良反应率组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 莫沙必利辅助抗幽门螺杆菌四联疗法可有效恢复功能性消化不良幽门螺杆菌阳性患者胃肠激素确认细节平衡，缩短患者临床症状缓解时间，提高患者对治疗满意率，综合提升临床治疗总有效率Bio-controlling agent，且并未增加患者药物不良反应率，是治疗功能性消化不良幽门螺杆菌阳性患者的优选方案。

[摘 要]目的探讨天获悉更多然植物化合物樱黄素（PRU）对肠上皮细胞炎症和屏障结构的作用及其对小鼠克罗恩病样结肠炎的影响。方法建立脂多糖（LPS）诱导的结肠类器官炎症损伤模型和2，4，6-三硝基苯磺酸溶液(TNBhttps://www.selleck.cn/products/LBH-589.htmlS）诱导的小鼠结肠炎模型，用于评估PRU对肠上皮炎症反应和肠屏障的影响。另外，使用网络药理学结合体内外研究分析PRU调控肠上皮炎症影响肠炎的分子机制。结果PRU干预可抑制LPS诱导的结肠类器官中促炎介质肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、IL-1β的释放以及改善TNBS诱导的小鼠结肠炎症状（T immunophenotype体重下降、疾病活动指数和炎症评分升高）；同时，PRU促进LPS诱导的小鼠结肠类器官TNBS小鼠肠上皮细胞间紧密连接蛋白闭锁小带蛋白1（ZO-1），密封蛋白1（claudin-1）的表达和改善移位，同时保护肠屏障结构。PRU可靶向结合Toll样受体4（TLR4）并抑制TLR4/髓样分化因子88（MyD88）信号通路活化。结论PRU可通过靶向拮抗TLR4/MyD88信号的激活，抑制肠上皮细胞炎症和保护肠屏障损伤从而改善克罗病样肠炎。