RAF信号通路

目的:探讨hsa-miR-767调控IGF1MRTX849使用方法对人乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法:利用生信数据分析乳腺癌的差异基因，并GSK2118436细胞培养构建miRNA-mRNA网络，筛选hsa-miR-767/IGF1信号轴进行验证。建立hsa-miR-767过表达和敲除MCF7细胞株，RT-qPCR验证hsa-miR-767的表达，双荧光素酶报告基因实验检测hsa-miR-767和IGF1的结合，CCK-8实验、划痕实验、Transwell实验和流式细胞术检测乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡能力。结果:识别出26个差异miRNA(DEMs)和1 108个差异基因(DEGs)。预测获得靶基因254个，靶基因与测序DEGs取交集得到73个mRNA。鉴定出10个hub基因(IGF1、NTRK2、CEBPA、FOS、KLF4、GABRA1、NRG1、LPL、GABBR2、ANGPT1),其中IGF1所连接的基因较多，说明其在乳腺癌中较为重要。miRNA-mRNA网络图中发现hsa-miR-767/IGF1轴可能在乳腺癌中起关键作用。细胞实验证实hsa-miR-767表达水平在乳腺癌中上调(P<0.05),其能靶向结合IGF1;hsa-miR-767还可促进乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭，抑制细胞的凋亡(P<0.05)。结论:hsa-miR-767可促Breast cancer genetic counseling进乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭，抑制细胞凋亡，且可与IGF1结合。

目的 探讨肝脏脂肪变、肝纤维化与冠状动脉病变程度的关系。方法 纳入243例首次接受冠状动脉造影的患者，收集患者一般资料及入院时的实验室检查指标。根据患者的冠状动脉造影结果，将患者分为冠心病组和非冠心病组。分别用Gensini评分、血管评分评估患者的冠状动脉病变程度；使用FibroTouch检测患者的脂肪衰减参数(FAP)和肝脏硬度测定(LSM)值以评估肝脏脂肪病变、肝纤维化情况。比较冠心病组和非冠心病组的临床特征、FAP值和LSM值，并比较不同临床特征患者的Gensini评分、血管评分。采用多元线性回归模型分析患者Gensini评分、血管评分的影响因素。结果 (1)243例患者中，174例被诊断为冠心病。非冠心病组与冠心病组患者的年龄、性别、腰围、吸烟情况、合并糖尿病和高血压情况，空腹血糖水平、HbA1c水平、HDL水平、ALT水平、AST水平、谷氨酰转移酶(GGT)水平，以及FAP值、LSM值比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。(2)不同年龄、性别、腰围、吸烟情况、合并获悉更多糖尿病和高血压情况、空腹血糖水平、HbA1c水平、HDL水平、ALT水平、AST水平、GGT水平、FAP值、LSM值的selleck抑制剂患者之间，Gensini评分和血管评分差异均有统计学意义(均P<0.05)。(3)多元线性回归分析结果显示，校正相关混杂因素后，FAP值是Gensini评分的影响因素，FAP值、LSM值均是血管评分的影响因素(均P<0.05)。结论statistical analysis (medical) 肝脏脂肪变、肝纤维化与冠状动脉病变狭窄程度有关，较高的FAP值和LSM值意味着存在冠状动脉病变甚至严重的冠状动脉病变。

目的：基于PI3K/Akt信号通路探究莲甲散结方对肺腺癌H1975细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响，并探索其作用机制。方法：采用CCK-8法检测不同浓度的莲Berzosertib溶解度甲散结方对H1975细胞活力的影molecular oncology响。在CCK-8结果基础上将H1975细胞分为空白组和莲甲散结方低、中、高剂量组（3、6、9 g/L）。采用克隆形成、5-乙炔基-2′-脱氧尿苷（EDU）细胞增殖实验检测H1975细胞的增殖能力；Transwell迁移和Transwell侵袭实验检测H1975细胞迁移和侵袭能力；Hoechst 33342染色法和流式细胞术Annexin VFITC/PI双染检测H1975细胞凋亡情况。采用蛋白免疫印迹法（Western blot）测定H1975细胞上皮间质转化（EMT）相关蛋白，凋亡相关蛋白，磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路蛋白的表达水平。结果：莲甲散结方对肺腺癌H1975细胞的48 h半数抑制浓度（IC_(50)）为7.51 g/L。与空白组比较，莲甲散结方各剂量组克隆数目减少，EDU阳性数目减少（P <0.05,P <0.01）；与空白组相比，莲甲散结方各剂量组迁移能力下降，侵袭能力减弱（P <0.05,P <0.01）；与空白组相比，莲甲散结方各剂量组促进H1975细胞的凋亡率显著增加（P <0.01）。Western blot结果显示，与空白组相比，莲甲散结方中、高剂量组E-cadherin表达升高（P <0.05,P <0.01）,N-cadherin表达降低（P <0.01）。与空白组相比，莲甲散结方各剂量组Cleaved Caspase-3、Bax表达均升高（P <0.05,P <0.01）,Bcl-2表达均下降（P <0.05,P <0.01）。与空白组相比，莲甲散结方中、高剂量组p-PI3K表达下降（P <0.05,P <0.01），莲甲散结方各剂量组p-Akt表达均下Alisertib体内实验剂量降（P <0.05,P <0.01），且呈浓度依赖性。结论：莲甲散结方可以抑制肺腺癌细胞H1975的恶性表型，诱导H1975细胞的凋亡，抑制PI3K/Akt信号通路的活化，下调PI3K/Akt的蛋白磷酸化水平可能是其机制之一。

目的 比较卡托普利与牛黄降压丸在高血压治疗Gefitinib-based PROTAC 3供应商中的应用效果，为临床提供参考和借鉴。方法 随机选取2020年1月—2021年8月天津市蓟州区文昌街社区卫生服务中心接收的72例高血压患者，采用随机数字表法分为对照组和观察组各36例，对照组给予牛黄降压丸治疗，观察组给予卡托普利治疗。比较两组血压水平、治疗效果和不良反应发生情况。结果 治疗后，两组血压水平低于治疗前，且观察组低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。观察组治疗总有效率为91.67%，高于对照组的72.22%，差异有统计学意义（χ~2=4.599,P<0.05）。观察组不良反应发生率为11.11%，对照组不良反应发生率为13.89%，两组比较差异无统计学意义（χ~2=0.selleck127Temple medicine,P>0.05）。治疗后，两组内皮素-1及血管紧张素Ⅱ低于治疗前，且观察组低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 在高血压治疗过程中，卡托普利治疗效果比牛黄降压丸优，不仅能够降低血压水平，获取理想效果，而且该药物的不良反应少，值得临床推广应用。

目的：确定lncRNA RP11-490M8.1在乳腺癌中的表达情况及其在乳腺癌细胞增殖中的作用。方法：基于癌症基因图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库和Kaplan-Meier plotter数据库分析RP11-490M8.1在乳腺癌中的表达情况及与患者预后的关系；qRT-PCR检测RP11-490M8.1在乳腺癌和癌旁组织中的表达；CCK8和克隆形成实验检测过表达和敲低RP11-490M8.1对乳腺癌细胞增殖的影响。结果：与癌旁组织相比，RP11-490M8.1在乳腺癌组织中表达明显下调，且RP11-490M8.1低表达和较差的总生存期（overall survival,OS）密切相关（P=0.03更多4）;RP11-490M8.1表达水平与乳腺癌患者的临床分期呈负相关，而与雌激素受体、孕激素受体、人表皮生长因子受体-2的表达simian immunodeficiency以及年龄均无相关性；过表达RP11-490M8.1显著抑制乳腺癌细胞的增殖，敲低RP11-490selleck化学M8.1表达则促进其增殖。结论：RP11-490M8.1在乳腺癌中可能发挥抑癌基因的作用，是潜在的乳腺癌预后分子和治疗靶点。

背景:乳腺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,全球最新癌症数据显示乳腺癌位居女性恶性肿瘤发病率的第一位。在所有乳腺癌病理分型中三阴性乳腺癌的恶性程度最高,预后最差。目前临床治疗三阴性乳腺癌的传统手段主要有手术、化疗及放疗,随着三阴性乳腺癌分子亚型的细化和药物的发展,已有部分患者可以接受到靶向治疗和免疫治疗。然而,手术对女性的生理和心理带来了极大的创伤,放化疗对正常细胞存在毒副作用,而小分子药物靶向治疗的使用也具有一定局限性。因此,迫切需要开发安全有效的肿瘤治疗策略,其中,肿瘤免疫治疗通过调动机体的免疫系统Wnt-C59半抑制浓度,增强抗肿瘤免疫力,有望彻底根治肿瘤。尽管免疫治疗作为肿瘤治疗的研究热点,展示出良好的治疗前景,但免疫原性较低和免疫抑制肿瘤微环境严重限制了免疫治疗的广泛应用。有研究表明光热治疗(Photothermal therapy,PTT)具有可诱导免疫原性死亡、激活抗肿瘤免疫等特性,为肿瘤治疗提供了新的思路。因此,在本课题中我们借助PTT诱导的免疫原性死亡与免疫治疗相结合,用于治疗恶性肿瘤,探索了更有利于治愈三阴性乳腺癌的治疗策略。PTT中使用的材料具有较高光热转换效率,可高效的将光能转化为热能从而杀伤癌细胞。PTT具有治疗部位精确可控、杀伤效率高、副作用小等优点,在临床前和临床试验中显示出一定的应用前景。本课题中,我们采用具有高光热转化效率、表面官能团丰富和良好生物相容性等特点的二维过渡金属碳(氮)化物(MXene)为光热剂,以实现高效安全的光热治疗。由肿瘤特异性内源性刺激触发的纳米酶催化治疗是一种新兴的肿瘤治疗方法,在治疗肿瘤过程中展现了较好的应用前景,具有类过氧化物酶活性的纳米酶由于能够有效产生活性氧而备受关注。已有研究表明,金纳米粒子(Au NPs)具有过氧化物酶的特点,同时具有良好的光热转换效率和化学惰性,被广泛应用于肿瘤诊疗领域中。因此,在本课题中我们制备了MXene-Au纳米复合材料,使其兼具光热效应和过氧化物酶活性,建立光热协同纳米酶催化抑瘤新策略。进一步,为了充分调动机体的免疫细胞发挥出抗肿瘤效应,我们引入抗OX40抗体,进一步增加效应性T细胞的扩增和细胞因子的分泌,实现三位一体的三阴性乳腺癌光热/催化/免疫联合治疗。目的:探究光热/纳米酶催化/免疫三元治疗策略对小鼠三阴性乳腺癌的治疗效果,为三阴性乳腺癌综合疗法的开发提供坚实的理MRTX1133浓度论基础和可靠的实验依据。方法:(1)制备Ti_3C_intensive medical intervention2-MXene-Au,对其基本理化性质进行表征,检测材料的光热转换性能、化学稳定性、生物相容性及过氧化物酶样活性。(2)通过细胞摄取、细胞杀伤、活性氧检测及细胞凋亡等体外实验,考察Ti_3C_2-MXene-Au纳米复合材料通过光热联合纳米酶催化疗法对肿瘤细胞产生的杀伤作用并探究其可能的细胞死亡机制。(3)建立小鼠原位乳腺癌模型并进行体内实验,在动物水平验证Ti_3C_2-MXene-Au联合抗体OX40抑制肿瘤生长的效果、生物安全性、靶向性以及对免疫系统的激活效应。结果:(1)使用透射电镜、扫描电镜、X射线衍射、X射线光电子能谱、紫外可见分光光度计及粒径分析仪对Ti_3C_2-MXene-Au的组成、形貌、波长及电势进行表征,证明了Ti_3C_2-MXene-Au纳米复合材料的成功制备。(2)稳定性测试实验和溶血实验,结果显示Ti_3C_2-MXene-Au具有良好的化学稳定性和生物安全性。(3)Ti_3C_2-MXene-Au在808 nm红外光照射下光热转换效率高达55%,且具备浓度和功率依赖性的升温性能及良好的光热稳定性。(4)体外实验结果显示Ti_3C_2-MXene-Au具备过氧化物酶样活性可引起肿瘤细胞内活性氧水平升高以及肿瘤细胞凋亡。(5)免疫原性死亡相关分子CRT、HMGB1及ATP的水平变化提示Ti_3C_2-MXene-Au在红外光照射下可诱导4T1细胞发生免疫原性死亡。(6)小动物光声成像与热成像双成像模式显示Ti_3C_2-MXene-Au在体内肿瘤部位的蓄积,具有良好的肿瘤靶向性。(7)给予荷瘤小鼠尾静脉注射Ti_3C_2-MXene-Au联合腹腔注射抗OX40抗体,在体内展现出显著的抑瘤效果;通过流式细胞术对肿瘤细胞中的免疫细胞进行检测分析,结果显示光热、催化联合免疫治疗有效激活了树突状细胞(Dendritic Cell,DC)并刺激效应T细胞的扩增和浸润,细胞因子的分泌显著增加且髓源性抑制细胞(Myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)比例显著下降。(8)在注射Ti_3C_2-MXene-Au的荷瘤小鼠中未观察到明显的组织脏器结构和肝肾功能异常,提示Ti_3C_2-MXene-Au具有良好的生物安全性。结论:综上,Ti_3C_2-MXene-Au纳米复合材料具备光热转换性能和过氧化物酶样特点,可引起肿瘤细胞发生免疫原性死亡和细胞凋亡,在此基础上联合免疫增强剂抗OX40抗体,抑制小鼠肿瘤生长的同时进一步促进DC及T细胞的增殖、活化,并降低MDSCs的免疫抑制活性从而逆转免疫抑制微环境,显著诱导了抗肿瘤免疫应答,是一种极具潜力的三阴性乳腺癌治疗新策略。

目的 评估常规二维超声(2D)、平面波超敏感血流成像(AP)及剪切波弹性成像(SWE)GSK1349572体内实验剂量在非肿块型乳腺病变(NMLs)良性、恶性中的诊断价值。方法 纳入60例非肿块型乳腺病变，于穿刺、旋切及手术前均行2D、AP及SWE检查，以病理诊断结果为金标准，计算AP、SWE及两者串联/并联诊断非肿块型乳腺恶性病变的灵敏度、特异度、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)及准确度，并建立受试者工作特征(ROC)曲线，比较几种方法曲线下面积(AUC)。结果 60个NMLs病理结果显示恶性33个、良性27个；患者年龄恶性组较良性组小(P<0.05),良性、恶性病灶传统超声特征中，病灶后方回声、微钙化、腺体结构扭曲3个方面差异有统计学意义(P<0.05)。AP、SWE、AP+SWE(串联)及AP+SWE(并联)诊断NMLs恶性病变的灵敏度、特异度、PPV、NPV及准确度分别是87.9%、74.1%、80.Tezacaftor6%、83.3%及81.7%,75.8%、85.2%、86.2%、74.2%及80.0%,72.7%、96.3%、96.0%、74.3%及83.3%,90.9%、63.0%、75.0%、85.0%及78.3%。4种诊断方法ROC AUC分别是0.810、0Standardized infection rate.805、0.845、0.769,且AP+SWE(串联)诊断AUC大于AP或SWE单一诊断，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 AP联合SWE诊断NMLs良性、恶性，两者串联有较高的临床实用价值；两者并联可作为临床筛查恶性NMLs病变的一种有效方法。

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)同源盒基因转录反义RNA(HOTAIR)对骨髓瘤细胞H929增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响，并探讨其可能机制。方法 回顾性收集2019年1月至2021年12月临沂市肿瘤医院收治的多发性骨髓瘤(MM)患者30例作为MM组，另取同期行骨髓穿刺并最后确认无骨髓功能障碍的健康者30例作为对照组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析骨髓瘤组织和正常组织中HOTAIR和miR-520h表达水平。体外培养H929细胞，分为si-NC组(转染si-NC)、si-HOTAIR组(转染si-HOTAIR)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-520h组(转染miR-520h mimics)、si-HOTAIR+anti-miR-NC组(si-HOTAIR与anti-miR-NC共转染)、si-HOTAIR+anti-miR-520h组(si-HOTAIR与anti-miR-520h共转染)。细胞计数试剂盒(CCK-8AZD9291半抑制浓度)检测细胞活力；Transwell实验分析细胞迁移、侵袭能力；流式细胞术分析细胞凋亡情况；蛋白质印迹法检测SGLT抑制剂细胞周期素D1(CyclinD1)、p21、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl相关X蛋白(Bax)表达；双荧光素酶实验验证HOTAIR与miR-520h的靶向关系。结果 与对照组比较，MM组患者骨髓瘤组织中HOTAIR表达升高，miR-520h表达降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。与si-NC组比较，si-HOTAIR组HOTAIR、H929细胞活力、迁移和侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2、MMP-9和Bcl-2蛋白水平均降低，miR-520h、凋亡率、p21和Bax蛋白水平均升高，差异均有统计学意义(P<0.05);与miR-NC组比较，miR-520h组H929细胞活力、迁移和侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2、MMP-9和Bcl-2蛋白水平均降低，miR-520h、凋亡率、p21和Bax蛋白水平均升高，差异均有统计学意义enzyme immunoassay(P<0.05);与si-HOTAIR+anti-miR-NC组比较，si-HOTAIR+anti-miR-520h组H929细胞活力、迁移和侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2、MMP-9和Bcl-2蛋白水平均升高，miR-520h、凋亡率、p21和Bax蛋白水平均降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。HOTAIR靶向miR-520h并负调控其表达。结论 沉默lncRNA HOTAIR通过靶向miR-520h能够抑制骨髓瘤细胞H929增殖、迁移和侵袭，促进细胞凋亡。

目的 探究妊娠期高血压疾病病患选择维生素E、钙剂以及小剂量阿司匹林治疗的作用。方法 选择本院收治的妊娠期高血压疾病病患116例，随机分为常规组和试验组，各58例。将硫酸镁应用于常规组病患中，将维生素E、钙剂以及小剂量阿司匹林应用于试验组病患中。针对每组病患各时期血清尿酸、胱抑素C、血压水平Symbiotic relationship以及治疗效果、妊娠结局进行比较。结果 治疗一周时同组组内血清尿酸以及胱抑素C水平均低于治疗前，治疗一周时试验组病患血清尿酸以及胱抑素C水平均低于常规组(P<0.05)。治疗一周时同组组内收缩压以及舒张压水平均低于治疗前，治疗一周时试验组病患收缩压以及舒张压水平均低于常规组(P<0.05)。试验组病患治疗selleck产品总有效率高于常规组(P<0.05)。试验组病患胎儿生长受限、产后出血、剖宫产以及早产出现率均低于常规组(P<0.05)。结论 妊娠期高血压疾病病患选择维生素E、钙剂以及小剂量阿司匹林治疗，能够购买BMS-907351降低血清尿酸、胱抑素C以及血压水平，提升治疗效果，改善妊娠结局，发挥重要作用。

目的：基于蛋白质组学探讨麻疹减毒活疫苗191株（MV-Hu191）selleck在体内外对三阴性乳腺癌MDA-MB-231、4T1细胞的影响及作用机制。方法：采用CCK-8法分析MV-Hu191对MDA-MB-231和4T1细胞增殖的影响；4D-FastDIA定量蛋白质组学技术分析MV-Hu191处理对MDA-MB-231细胞中相关蛋白质水平的影响，多重数据库筛选差异蛋白并进行GO、KEGG、亚细胞定位功能注释；MV-Hu191瘤内注射1×106TCID50干预4T1细胞移植瘤模型小鼠后流式细胞术检测脾组织T细胞亚群，ELISA检测血清TNF-α、IL-6含量。结果：体外实验结果表明MV-Hu191具有抑制MDA-MB-231和4T1细胞增殖的作用（P<0.01）；蛋白质组学分析结果显示MV-Hu191作用MDA-MB-231后明显上调的蛋白质有38个、下调12个；差异表达的蛋白质主要参与细胞黏附、信号受体激活、细胞代谢、应激反应等生物过程；22个差异蛋白亚细胞定位位于细胞外，KEGG功能分类显示与免疫调节功能相关差异蛋白最多且均为上调蛋白，包括C4A、C8B、SERPINF2、A2M、SERPINC1、CTSB、SERPING1、C5;PPI预测发现免疫相关差异蛋白与CD4、CD8、TNF-α及IL-6相互关联。体内实验结果显示，MV-Hu191干预组小鼠脾细胞CD4+T细胞数量高于对照组，但差异无显著性（P>0.05）;MV-HuProtein biosynthesis191干预组CD4+/CD8+比值高于对照组（P<0.05），血清T购买VX-445NF-α、IL-6含量显著上升（P<0.01）。结论：MV-Hu191显著抑制MDA-MB-231、4T1细胞增殖，拮抗4T1细胞荷瘤小鼠成瘤性，可能通过激活免疫效应分子实现抗肿瘤作用。