RAF信号通路

目的 探讨香豆素通过调节Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白(Keap)1/核因子E2相关因子(Nrf)2/抗氧化反应元件(ARE)信号通路减轻脑缺血-再灌注大鼠神经损伤。方法 大鼠随机分为假手术(Sham)组、脑缺血-再灌注损伤模型(CIRI)组，低(2.5 mg/kg)、中(5 mg/kg)、高剂量(10 mg/kg)香豆素组，Keap1/Nrf2/ARE信号通路抑制剂组(ML385)组及ML385+高剂量香豆素组，脑缺血2 h、再灌注24 h后采用Longa5分制法评估Y-27632使用方法大鼠神经行为评分；2,3,5氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测量大鼠脑梗死体积；苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠脑皮质组织病理学变化；Western印迹检测大鼠脑皮质组织中Keap1/Nrf2immune sensing of nucleic acids/ARE信号通路相关因子[Keap1、Nrf2、血红素氧合酶(HO)-1、醌氧化还原酶(NQO)1]蛋白水平。结果 与Sham组比较，CIRI组神经行为评分、脑梗死体积，脑皮质组织中胞核Nrf2/Nrf2及HO-1、NQO1蛋白增加，Keap1蛋白减少，差异有统计学意义(P<0.05),且神经细胞可见明显病理学改变。与CIRI组比较，低、中、高剂量香豆素组神经行为评分、脑梗死体积及脑皮质组织中Keap1蛋白减少，脑皮质组织中胞核Nrf2/Nrf2及HO-1、NQO1蛋白增加，呈剂量依赖性，差异有统计学意义(P<0.05),且神经细胞损伤程度显著减轻；ML385组神经行为评分、脑梗死体积增加，脑皮质组织中胞核Nrf2/Nrf2及HO-1、NQO1蛋白减少，差异有统计学意义(P<0.05),且神经细胞损伤程度加重。与高剂量香豆素组比较，ML385+高剂量香豆素组神经行为评分、脑梗死体积增加，脑皮质组织中胞核Nrf2/Nrf2及HO-1、NQO1蛋白减少，差异有统计学意义(P<0.05),且神经细胞损伤程度有所加重。结论 香豆素可减轻脑缺血-再灌注大鼠神经损伤，可能通KPT-330过激活Keap1/Nrf2/ARE信号通路而实现。

分析接受体外放射治疗(EBRT)的非手术胆管癌(CCA)患者预后因素,建立有效的Nomogram预测模型,对患者的预后进行个体化预测评估。本研究从检测、流行病和最终结果(SEER)数据库总共18个登记中心提取合适的患者病例,按照7:3的随机分配比例,13个登记中心的患者资料被纳入模型建立的训练队列,另外5个中心的患者登记资料被纳入到模型的内部验证队列,对患者的信息资料进行筛选并分析。用Kaplan-Meier方法计算中位生存时间及总生存率,log-rank方法检验差异。为确保筛选出的独立预后变量以及预测模型更加科学化,分别建立以下三种不同模型,在训练队列中进行预后变量筛选:(1)利用单、多因素Cox回归分析后的显著意义变量(P<0.05CL13900作用)建立变量模型一;(2)逐步回归后基于最小Akaike信息准则(AIC)选择的变量建立变量模型二;(3)通过10倍的交叉验证后调整参数的Lasso回归分析,筛选出的独立预后因子建立变量模型三。最终根据筛选结果,选择三种模型共同筛选出的变量作为最终的预后变量建立Nomogram,预测6个月和12个月的总生存率。同时,回顾性收集2010年1月-2020年12月空军特色医学中心放射治疗科所收治的非手术CCA患者资料,记录年龄、性别、个人史等患者基本信息以及患者肿瘤相关信息,包括入院时的EGCO评分、确诊方式、肿瘤的原发部位、肿瘤分期和分化等级、有无接受化疗等。基于本院的单中心随访数据,建立外部验证集,对建立的预测模型进行外部验证。为了确保内部验证的有效性,使用了Bootstraps算法,并且对内部验证队列进行了1000次的自我检查和重新抽取,利用一致性指数(C-index)、受试者工作特征曲线(ROC)以及ROC的曲线下面积(AUC)评估模型的敏感度,校准曲线对比模型的预测概率和实际概率的一致性。决策曲线分析(DCA)评估预测模型临床决策的适用性。结果显示,肿瘤大小、M分期和化疗为影响CCA患者总生存率的独立预后因素,基于上述三个变量构建的预测模型为最佳。中位总生存(OS)时间为12.00个月(95%CI:9.12-14.88)。训练队列6个月、12个月的总生存率分别为(68.0±4.7)%、(48.0±5.0)%。Nomogram的校正曲线接近于45°对角线,证明实际和预测的总生存率保持了较大程度的一致。训练队列C-index为更多0.681(95%CI,0.611～0.751),Cindex大于0.6,说明预测模型的预测能力较好。Nomogram预测模型在6个月和12个月的AUC值分别为0.749(95%CI:0.648～0.849)、0.734(95%CI:0.635～0.831),均分别高于AJCC分期系统的AUC值:0.687(95%CI:0.579～0.794)和0.659(95%CI:0.556～0.762),差异均有统计学意义(P<0.05)。校Infection rate准曲线显示出模型的预测性能良好,预测情况与实际发生情况较为一致。DCA显示,与AJCC分期系统相比,当预测6个月的死亡率超过20%、12个月的死亡率超过40%时,使用Nomogram来预测总生存率可以得到更好的临床决策。基于临床预后特征的Nomogram具有良好的预测效果,可用于为已接受EBRT的非手术CCA患者提供临床预后评估的参考。

目的 探讨激光周边虹膜切除术在治疗原发性房角关闭中的疗效。方法 前瞻性选取2020年1月至2021年12月于首都医科大学附属北京友谊医院眼科经激光周边虹膜切除术治疗21例42眼原发性房角关闭患者，其中6例伴眼压升高，均无视神经损伤。在局部麻醉下3-Methyladenine试剂以YAG激光进行周边虹膜打孔，平均能量8 mJ。于术前，术后1 h、1 d、1周及1个月监测眼压、最佳矫正视力(BCVA)和前房深度的变化。结果 术后1 d、1周和1个月眼压为(19.80±1.23)、biocide susceptibility(18.20±1.55)、(18.45±2.21) mmHg,较术前眼压[(25.80±7.45) mmHg]有明显降低，差异均有统计学diABZI STING agonist作用意义(P<0.05)。观察患者治疗前和治疗后1 d、1周及1个月的BCVA比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。术后1周和术后1个月前房深度为(2.26±0.09)、(2.28±0.08)、(2.27±0.11)mm,较术前[(2.12±0.12)mm]明显加深，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 LPI在临床治疗原发性房角关闭患者中疗效确切，值得进行推广和应用。

目的:观察茵栀凉血汤联合火针治疗血热型掌跖脓疱病的临床疗效。方法:本次临床实验时间为2021年12月-2022年11月,研究对象来源于黑龙江中医药大学附属第一医院皮肤科门诊。选择符合入选标准的72位患者。随机分为治疗组和对照组,每组各36例,实际有效观察例数两组各35例。治疗组给予口服中药汤剂茵栀凉血selleck合成汤联合火针治疗,对照组口服西药阿维A胶囊。治疗周期为8周,IDN-6556小鼠分别于治疗前及治疗后参照患者掌跖红斑、鳞屑、脓疱、皮损面积、瘙痒等情况判定药物疗效。并且统计分析治疗期间两组患者不良反应。采用SPSS26.0统计软件进行分析。结果:1.比较两组患者的一般资料(年龄、性别、病程、甲损害、皮损分布),差异均无统计学意义(均p>0.05)。2.总体疗效分析:治疗8周后,治疗组患者的总有效率为85.71%,对照组患者的总有效率为71.43%,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.经治疗后,两组患者的瘙痒均有改善,差异均具有统计学意义(P<0.05)。4.经治疗后,Biopsia pulmonar transbronquial两组患者皮损面积及严重程度指数评分均下降,差异具有统计学意义(均P<0.05),治疗组优于对照组。5.经治疗后,两组患者的PPPASI评分均降低,差异具有统计学意义(P<0.001),治疗组优于对照组。结论:1.茵栀凉血汤联合火针治疗可有效改善血热型掌跖脓疱病红斑、脓疱、瘙痒、鳞屑、皮损面积,提升患者生活质量,且疗效优于阿维A胶囊。2.茵栀凉血汤联合火针治疗掌跖脓疱病(血热型)有明显的中医优势,疗效突出,治疗安全,适合在临床进行进一步研究与运用。

目的 开发一种预测肝外胆管癌淋巴结状态的机器学习模型。方法 纳入101例接受根治性手术切除的肝外胆管癌病例，采用MaZda软件对多序列MRI图像病灶进行勾画，并且提取影像特征。利用最大-最小算法对影像特征blood biochemical进行归一化，并通过合成少数过采样算法进行分类数据平衡，生成新样本。采用Spearman相关性分析与最大相关最小冗余特征选择法进一步筛选影像特征，最终得到20个最具代表的特征。从新样本数据中任意选择80%样本作为训练集，剩余20%作为测试集，建立支持向量机（support vector machine,SVM）预测模型，并利用受试者工作特征曲线（ROC）评价模型性能。结果 预测模型训练集的AUC为0.98，准确率为89.2%，灵www.selleck.cn/products/kd025-(slx-2119)敏度为92.9%，特异性为89.4%。测试集的AUC为0.83，准确率为82.2%，灵敏度为82.1%，特异性为80.9%。结论 基于MRI影像的SVM预测模型具有良好的预测性能，可为临床医生提供对肝外胆管癌患者个性化的术E7080抑制剂前预测，辅助评估手术价值并做出适当的临床决策。

研究目的:幽门螺杆菌(Helicobacter pylor寻找更多i,H.pylori,Hp)是一种独特的,可以持续定值于人类胃黏膜并能引起胃感染的细菌,被世界卫生组织归类为“Ⅰ类”致癌因子,是胃癌发生的重要危险因素之一,约与75%的胃癌病例密切相关。因此,对幽门螺杆菌感染相关胃癌的蛋白质组的全面了解将为胃癌的深入研究提供基础的认识。研究方法:本研究收集了 Hp阳性和Hp阴性胃癌患者的肿瘤组织和癌旁组织样本各1例,每个样本分别取3个不同部位进行分析。将蛋白质从组织内提取,经过膜辅助溶液内蛋白酶切(FASP)方法得到肽段分子,采用非同位素标记的高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS/MS),进行蛋白质组分析,差异蛋白(DEPs)的筛选通过统计学数据分析方法进行,并对差异表达蛋白进行功能分析和通路富集富集分析,以寻找关键信号通路。研究结果:基于HPLC-MS/MS方法,本研究在所有样本中共鉴定到5232个蛋白。统计学分析表明:Hp 阳性与阴性肿瘤不同部位的蛋白质表达具有明显差异,表现出肿瘤异质性,且这些蛋白主要与selleck产品能量代谢、细胞增殖侵袭、细胞生存死亡、免疫反应、病毒感染等功能有关;在胃癌肿瘤组织与癌旁组织中,分别有1630和1843个蛋白质的表达量发生显著变化(|Foldchange|≥2),在Hp 阳性与阴性两种胃癌肿瘤组织中发现了 764个差异表达蛋白(Cryptosporidium infection|Foldchange|≥2),这些蛋白质均与免疫反应、细胞迁移、细胞增殖侵袭、细胞生存与死亡等功能相关。特别的,在这两种肿瘤中发现与细菌生长有关蛋白质的表达变化。结论:胃癌肿瘤表现出肿瘤内异质性。胃癌肿瘤与癌旁组织蛋白质组特征差异明显,表现出肿瘤特征。Hp阳性和Hp阴性两种胃癌肿瘤也具有显著的蛋白质组特征差异,影响机体能量代谢、免疫应答、细胞增殖侵袭、生存死亡等功能。本研究为胃癌肿瘤的深入研究提供了新的线索和思路。

研究目的:MAP3K5(也称为ASK1)是一种广泛表达的丝氨酸酪氨酸激酶,其活性增加与多种病理相关。有研究表明,抑制MAP3K5活性是一种安全治疗疾病的策略,因此MAP3K5抑制剂的开发具有重大意义。本论文基于K812和临床期候选药GS-4997为先导化合物,设计合成了一系列结构新颖的2-取代喹啉类化合物,以期找到高活性和选择性的MAP3K5抑制剂,为后来的研究工作打下基础,提供一些新思路。研究方法:本论文根据GS-4997与MAP3K5的共晶结构,并结合之前己报道的K812的构效关系,对GS-4997咪唑基取代的氟苯环位点、吡啶环位点、三唑基位点进行改造,合成了一系列含苯并含氮六元环类化合物并初步研究了合成化合物的构效关系,以期指导化合物进一步的结构优化。本论文使用ADP-GLO发光法激酶检方式测试了所合成的化合物体外MAP3K5抑制活和选择性。最后选择一个酶抑制活性最佳的优选化合物,使用Discovery Studio(2.5版本)进行分子对接,研究其结合模式。后续对优选化合物进行一系列体外实验,包括应用CCK-8检测法细胞毒性评价、流式细胞术法测定细胞周期阻滞,NAFLD模型检验治疗效果。研究结果:本论文对咪唑基取代的氟苯环位点进行了稠合环设计策略,合成了一系列苯并六元杂环类化合物,旨在筛选合适的苯并六元杂环骨架。测试结果显示喹啉环骨架2-1d(IC_(50)=25 n M)具有较好的抑制活性。接下来我们合成和评价了喹啉环上不同位置的取代物,确定了喹啉环最佳取代位置。从得到的MAP3K5抑制活性数据来看,喹啉环8位溴取代的化合物JT21-25活性最佳。但是喹啉环8位1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶取代的化合物2-2d活性与JT21-25相比降低近500倍。在MAP3K5激酶选择性实验中,化合物JT21-25对在MAP3K5激酶具有高达2000倍的选择性。在JT21-25和MAP3K5蛋白进行分子对接试验中,结果表明,化合物JT21-25与MAP3K5蛋白的关键残基VAL575,GLN567形成较强的氢键,增强了化合物与靶点的结合力。在体外细胞毒性实验中,用CCHIV- infectedK-8法测得JT21-25的五个不同浓度,在人正常肝细selleck产品胞LO2中存活率高达80%,说明了JT21-25的生物安全性。其次,在流式细胞术周期阻滞实验ICI 46474细胞培养中,JT21-25对Hep G2细胞的G1期有明显的阻滞作用。最后,本论文还验证了在NAFLD细胞模型中JT21-25具有一定的治疗效果。研究结论:本论文主要针对正处于临床期药物GS-4997,设计合成一系列2-取代喹啉类化合物,并对它们进行体外激酶活性实验、激酶选择性实验、分子对接实验、细胞毒性实验、细胞周期阻滞实验、油红O染色实验及CHOL、LDL和TG含量测试实验。在一系列的实验研究中筛选出了活性和选择性最佳的喹啉环8位溴取代的化合物JT21-25,它对MAP3K5激酶具有强的抑制作用,能阻滞Hep G2细胞的G1期,具有一定的NAFLD治疗效果且对人正常肝细胞不会造成显著损伤。在本论文中,发现了一种高选择性和高抑制活性的MAP3K5抑制剂,且在体外评价中细胞毒性较小,为后期的进一步体内评价提供了先决条件。到目前为止,还未有MAP3K5小分子抑制剂的上市,本论文的研究可能为MAP3K5小分子抑制剂的研发提供一种新的研究思路。

目的：探究绿豆汁炙黄药子的炮制减毒作用，并基于主要毒性靶器官肝铁死亡探究其减毒机制。方法：60只雄性ICR小鼠随机分为空白组、生黄药子组、水炙黄药子组，绿豆汁炙黄药子1组（黄药子:绿豆=10:1，闷润40 min，130 ℃炒18 min）、绿豆汁炙黄药子2组（黄药子:绿豆=10:1，闷润80 min，100 ℃炒14 min）、绿豆汁炙黄药子3组（黄药子:绿豆=20:3，闷润40 min，160 ℃炒14 min）。生黄药子及各炮制品组均以3 g·kg~(-1)·d~(-1)的剂量分别灌胃对应的95%乙醇提取物药液，空白组灌胃等体积的0.5%羧甲基纤维素钠，1次/d，连续14 d。苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠肝脏组织病理变化；生化检测小鼠血清谷氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平，以及肝组织丙二醛（MDA）、亚铁离子（Fe~(2+)）、还原型谷胱甘肽（GSH）和超氧化物歧化酶（SOD）的水平；蛋白免疫印迹法检测铁关键蛋白铁蛋白重链1（FTH1）、谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）的表达。结果：HE染色结果显示，空白组小鼠肝组织结构清晰，肝细胞形态正常；生黄药子组与水炙黄药子组小鼠肝细胞胞质疏松、空泡，病理性损伤明显；绿豆汁炙黄药子1、2、3组小鼠病理性损伤明显改善。与空白组比较，生黄药子组小鼠血清ALT、AST水平显著升高（P<0.01），肝组织MDA及Fe~(2+)水平显著升高（P<0.01），GSH、SOD水平显著降LY294002低（P<0.01），FTH1、GPX4蛋白表达显著下调（P<0.01）；与生黄药子组比较，绿豆汁炙黄药子1、2、3组小鼠血清ALT、AST水平显著降低（P<0.01），肝组织MDA的水平明显降低（P<0.05，P<0.01），Fe~(2+)水平显著降低（P<0.01），GSH、SOD水平显著升高（P<0.01），FTH1、GPX4蛋白表达显著上调（P<0.01）；与水炙黄药子组比较，绿豆汁炙黄药子1、2、3组小鼠血清AST水平明显降低（P<0.05，P<0.01），肝组织MDA水平显著降低（P<0.01），SODhigh-biomass economic plants水平明显升高（P<0.05，P<0.01），FTH1蛋白表达显著上调（P<0.01），绿豆汁炙黄药子2、3组小鼠血清ALT水平显著降低（P<0.01），肝组织Fe~(2+)水平显著降低（P<0.01），GSH水平明显升高（P<0.05，P<0.01），GPX4蛋白表达明显上调（P<0.05，P<0.01）；与绿豆汁炙黄药子1组比较，绿豆汁炙黄药子2、3组小鼠血清ALT水平显著降低（P<0.01），肝组织SOD水平显著升高（P<0.01），FTH1、GPX4蛋白表达显著上调（P<0.01），绿豆汁炙黄药子3组小鼠血清AST水平明显降低（P<0.05），肝组织MDA、Fe~(2+)水平明显降低（P<0Transmembrane Transporters抑制剂.05）；与绿豆汁炙黄药子2组比较，绿豆汁炙黄药子3组FTH1蛋白表达显著上调（P<0.01）。结论：绿豆汁炙法能够缓解黄药子导致的肝损伤，其减毒机制可能与抑制其靶器官肝脏的铁死亡有关。

衰老是一个自然过程，伴随着认知功能的逐渐恶化。随着人口老龄化，越来越多老年人患有认知障碍。以往的研究更多关注炎症和氧化应next steps in adoptive immunotherapy激等在衰老中对认知功能的影响。最近人们发现，神经血管耦合(neurovascular coupling, NVC)——一种脑血流量的调节机制，可能在衰老相关的认知障碍中起到重要作用。NVC反应可保证大脑活动时有充足的能量物质和氧气供应，进而提升认知功能。然而随着年龄的增长，PR-171作用NVC反应会逐渐减弱，这可能是衰老诱导认点击此处知障碍的机制之一。鉴于NVC反应在大脑中的重要作用，有必要去寻找能改善NVC反应、促进认知功能的干预方法。运动是一种延缓衰老和改善认知功能的有效手段，且运动对NVC反应也有一定的促进作用。本文综述了NVC反应的调节机制、NVC反应与认知功能的关系，并探讨了衰老和运动干预对NVC反应的影响，以期为运动干预改善老年人NVC反应、促进认知功能提供新的研究思路。

目的 探究西维来司他对小鼠急性肺损伤诱导的线粒体功能障碍及炎症反应的影响及可能机制。方法 30只C57BL/6小鼠随机分为对照组、急性肺损伤组和西维来司他组，每组10只。HE染色观察各组小鼠肺组织病理学改变；试剂盒及荧光显微镜观察各组小鼠ROS水平和线粒体膜电位；ELISA检测各组小鼠支气管肺泡灌洗液TLiver immune enzymesNF-α、PS-341研究购买IL-1β和IL-6水平；Western blot检测各组小鼠肺组织线粒体和细胞质Drp1蛋白以及Mfn2、PPARγ、PGC1α和NRF2蛋白表达水平。结果 西维Imidazole ketone erastin来司他处理改善急性肺损伤小鼠肺组织病理损伤，降低肺组织ROS水平，增加肺组织线粒体膜电位，下调肺组织线粒体Drp1蛋白表达并上调肺组织细胞质Drp1蛋白和细胞中Mfn2、PPARγ、PGC1α和NRF2蛋白表达水平，降低支气管肺泡灌洗液TNF-α、IL-1β和IL-6水平。结论 西维来司他改善急性肺损伤诱导的线粒体功能障碍，降低炎症反应并改善肺损伤，其机制可能与激活PPARγ/PGC1α/NRF2信号通路有关。