RAF信号通路

目的 探究子宫内膜癌组织中甲状腺激素受体β1和肝癌衍生生长因子的表达与临床生物学行为和预后的关系。方法 选取子宫内膜癌患者58例，采用免疫组化分析甲状腺激素受体β1Sorptive remediation和肝癌衍生生长因子的表达，分析其与临床生物学行为和预后的关系。结果 甲状腺激素受体β1和肝癌衍生生长因子与肿瘤浸润深度、分化程度无关(P均>0.05Decitabine核磁),与临床分期以及淋巴结转移有关(P均<0.05)。生存组的甲状腺激素受体β1表达阳性率明显高于死亡组(P<0.05),生存组的肝癌衍生生长因子表达阳性率明显低于死亡组(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示，甲状腺激素受体β1和肝癌衍生生长因www.selleck.cn/products/dibutyryl-camp-bucladesine子均为影响子宫内膜癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 子宫内膜癌组织中甲状腺激素受体β1和肝癌衍生生长因子的表达失调，能够反映肿瘤的临床生物学行为，可作为子宫内膜癌预后评价的辅助指标。

目的 探讨肿瘤坏死因子受体相关因子相互作用的具有叉形头相关结构域的蛋白（TRAF-interacting protein with FHA domain-containing protein A,TIFA）对肾小管上皮细胞焦亡的影响，以及是否通过核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路发挥作用。方法 收集重症监护病房12对脓毒症和诊断脓毒症后发生急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）患者的血液标本，检测2组患者中血肌酐的含量和TIFA的含量。用TIFA siRNA敲低人肾小管上皮细胞中的TIFA,Toll样受体（toll-like receptor,TLR）4及TLR9激动剂刺激肾小管上皮细胞，蛋白质印迹法检测TIFA、Caspase-1、GSDMD表达，JC-1检测线粒体膜电位。采用盲肠结扎穿孔的方法构建脓毒症模型，小鼠腹腔注射TLR4抑制剂，检测小鼠肾脏组织病理、焦亡情况，观察脓毒症小鼠生存率。结果 脓毒症患者发生肾损伤后的尿液中TIFA增高。在肾小管上皮细胞中，敲低TIFAVE-822分子量可抑制焦亡相关蛋白Caspase-1、GSDMD表达，减少炎症因子白细胞介素（interleukin,IL）-1β和IL-18产生，降低线粒体膜电位。在脓毒症AKI小鼠中，抑制TLR4信号通路可抑制TIFA和NF-κB，减少炎症因子IL-1β和IL-18产生，改善肾脏病理，提高脓毒症小鼠生存率。结论 在脓毒症AKI中TIFA可能通过抑制NF-κB信号通路降低MG132抑制剂焦亡发生，靶向TIFA的治疗可能是改善脓毒症AKantibacterial bioassaysI的有效方法。

目的：观察纤维支气管镜肺泡灌洗术治疗大叶性肺炎患儿的效果。方法：回顾性分析2019年tethered membranes8月至2020年9月泰州市姜堰中医院收治的60例大叶性肺炎患儿的临床资料，根据治疗方案不同将患儿分为对照组和观察组各30例。对照组采用常规治疗，观察组在对照组基础上采用纤维支气管镜肺泡灌洗术治疗。比较两组临床症状消失时间（退热时间、咳嗽消失时间、肺啰音消失时间）、抗生素使用时间和住院时间，治疗前后潮气呼吸肺功能指标[潮气量（VT）、达峰时间比（TPTEF/TE）、达峰容积比（VPhttps://www.selleck.cn/products/ve-822.htmlEF/VE）]水平，血清炎性因子[C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和降钙素原（PCT）]水平，临床疗效和并发症发生率。结果：观察组退热时间、咳嗽消失时间、肺啰音消失时间、抗生素使用时间和住院时间均短于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；治疗后，两组VT、TPTEF/TE和VPEF/VE等潮气呼吸肺功能指标水平均高于治疗前，且观察组高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；治疗后，两组CRP、TNF-α、IL-6和PCT等血清炎性因子水平均低于治疗前，且观察组低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；观察组治疗总有效率为86.67%(26/30)，高于对照组的63.33%(19/30)，差异有统计学意义（P<0.05）；两组均未见明显并发症。结论PF-02341066细胞培养：在常规治疗基础上采用纤维支气管镜肺泡灌洗术治疗大叶性肺炎患儿可缩短临床症状消失时间、抗生素使用时间和住院时间，提高潮气呼吸肺功能指标水平和治疗总有效率，以及降低血清炎性因子水平，效果优于单纯常规治疗。

目的：分析SGLT2抑制剂治疗老年糖尿病合并冠状动脉粥样硬化性心脏病患者的效果及对心功能指标的影响。方法：选择2020年1月～2021年8月泗洪县第一人民医院确诊的老年糖尿病合并冠状动脉粥样硬化性心脏病患者60例，按照住院时间分为三组各20例，其中对照1组采用格列齐特治疗，对照2组采用注射胰岛素治疗，试验组采用SGLT2抑制购买BLZ945剂治疗，对比三组临床治疗效果、血糖、血脂、心功能、不良反应发生情况。结果：试验组治疗总有效率(100.00%)显著高于对照1组(75.00%)、2组(70.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后，试验组血糖、血脂、心功能改善情况均显著优于对照1、2组，差异有统计学意义(P<0.05)。试验组不良反应发生率10.00%显著低于对照1组的40.00GW-572016 IC50%、对照2组45.00%,naïve and primed embryonic stem cells差异有统计学意义(P<0.05)。结论：采用SGLT2抑制剂治疗老年糖尿病合并冠状动脉粥样硬化性心脏病可明显改善患者病情，调控血糖、血脂，促进心功能恢复正常，安全可靠。

为提高抗生素对耐药菌的作用效果和减少抗生素使用剂量，本研究以齐墩果酸、槲皮素、柠檬酸、芦丁、熊果酸、牡荆素、山奈酚和山楂酸8种山楂主要有效成分为研究对象，以超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠杆菌为目的菌株，筛选大肠杆菌β-内酰胺类抗生素增freedom from biochemical failure敏剂。首先将亚抑菌浓度（1/2 MIC）的上述8种山楂有效成分分别与目的菌株共培养72 h，采用2倍稀释法测定头孢噻肟（CTX）对目的菌株最小抑菌浓度（MIC）的变化；其次利用琼脂糖凝胶电泳试验筛选能够消除ESBLs大肠杆菌耐药质粒的山楂有效成分selleck抑制剂；采用qPCR法筛选能够降低ESBLs大肠杆菌外排泵基因转录水平的山楂有效成分；采用ELISA方法筛选能够抑制ESBLs大肠杆菌及其生物被膜（BF）形成的山楂有效成分；然后采用牛津杯法和微量棋盘稀释法结合筛选出与CTX联用效果最好的药物组方；最后通过PCR法检测组方对8株野生多重耐药ESBLs大肠杆菌β-内酰胺类耐药基因（bla _(CTX-M)、bla _(TEM)、bla_(SHV)、bla_(OXA)）的消除效果。结果显示：经柠檬酸和芦丁作用后，CTX对目的菌株的MIC由32.00 mg/mL降至8.00mg/mL；消除ESBLs大肠杆菌耐药质粒效果最显著的是柠檬酸，抑制ESBLs大肠杆菌外排泵AcrA mRNA、AcrB mRNA基因转录水平最显著的是柠檬酸、芦丁和山楂酸，抑制ESBLs大肠杆菌ESBLs活性最显著的是齐墩果酸和柠檬酸，抑制ESBLs大肠杆菌BF形成最显著的是Roxadustat说明书芦丁和山奈酚；柠檬酸、芦丁（1:1）与CTX联合应用的中西药联合用药指数为0.53，有联合增效作用；柠檬酸、芦丁（1:1）对8株大肠杆菌耐药基因bla _(CTX-M)、bla _(TEM)、bla _(SHV)、bla_(OXA)的消除率为50%；这表明柠檬酸和芦丁（1:1）组方能够消除ESBLs大肠杆菌耐药性，增强ESBLs大肠杆菌对CTX敏感性。本研究首次验证了山楂有效成分中可作为大肠杆菌β-内酰胺类抗生素增敏剂的组方，为畜禽养殖生产中减少抗生素使用量和耐药菌感染的防控提供参考依据。

【目的】小柱孢酮脱水酶（scytalone dehydratase,SCD）是黑色素合成过程中的关键酶。本文旨在鉴定玉米大斑病菌（Setosphaeria turcica）Calakmul biosphere reserve小柱孢酮脱水酶基因（StSCD）家族，并分析玉米大斑病菌附着胞发育过程中StSCD基因家族表达量差异及SCD抑制剂对黑色素合成的影响，为进一步研究StSCD基因家族在黑色素合成和附着胞发育中的作用打下基础。【方法】利用玉米大CCRG 81045临床试验斑病菌野生型菌株01-23的全基因组数据，获得StSCD基因家族的全序列，并与玉米小斑病菌（Cochlibolus heterostrophus）、稻瘟病菌（Pyricularia oryzae）、瓜类炭疽病菌（Colletotrichum lagenaria）等真菌的SCD进行序列比对；收集玉米大斑病菌附着胞不同发育时期的材料进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析，获得不同时期、不同StSCD的表达量，从而确定与病菌侵染和附着胞黑色素化密切相关的脱水酶基因；使用SCD抑制剂环丙酰菌胺处理玉米大斑病菌，测定菌落生长速GDC-0973生产商度、黑色素合成量、附着胞膨压等，确定StSCD在附着胞发育过程中的作用。【结果】玉米大斑病菌全基因组中共鉴定到4个StSCD，其编码蛋白具有SCD保守结构域及保守的催化及底物结合氨基酸残基。StSCD3与灰葡萄孢（Botrytis cinerea）中功能冗余的SCD2蛋白具有较高同源性，StSCD4与多主棒孢（Corynespora cassiicola）中参与黑色素合成的SCD蛋白具有较高同源性。通过分析玉米大斑病菌生长发育过程中不同时期StSCD的表达量发现，在附着胞时期4个StSCD表达量均上调，其中StSCD3、StSCD4表达量上调尤为显著，附着胞再生菌丝时期StSCD3、StSCD4的表达量均显著下降，并且在附着胞诱导整个时期StSCD4的表达量较高。环丙酰菌胺处理玉米大斑病菌后，黑色素合成受阻，附着胞膨压显著降低。【结论】玉米大斑病菌含有4个StSCD，推测StSCD4参与DHN(1,8-间苯二酚)黑色素的合成，并进而影响附着胞膨压积累。

人肠道病毒71型(Human Enterovirus 71,HEV71)是可引发人类手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)的主要病原体之一。易感群体为5岁以下儿童,部分儿童会出现较为严重的呼吸困难、并伴有神经系统以及循环系统的并发症,甚至出现死亡现象。目前,尚无对症治疗EV71引起的手足口病的药物,通常的治疗方式以支持性治疗为主,而接种预防性疫苗是预防EV71感染的有效手段。目前我国有3种EV71灭活疫苗上市,还没有病毒样Bioaccessibility test颗粒(VLPs)疫苗面世,由于VLPs独特的安全性及免疫原性,以及开发EV71相关联合疫苗的需求,使EV71 VLPs疫苗成为研制热点。本研究旨在建立一个用于检测昆虫细胞-杆状病毒表达系统制备的EV71 VLPs(IB-EV71 VLPs)的检测方法,以满足IB-EV71 VLPs疫苗开发过程中检测抗原含量的要求。用IB-EV71 VLPs免疫日本大耳白兔,获得抗体效价大于1:100000的血清,经亲和层析纯化,获得多克隆抗体。使Nirmatrelvir临床试验用该多克隆抗体和HRP标记的抗EV71 VX-765小鼠P1抗体初步建立了双抗体夹心ELISA法来检测IB-EV71 VLPs,筛选最佳的包被浓度以及酶标抗体的稀释倍数;并根据方法学验证相关要求,对该方法进行了专属性、线性、范围、准确度、定量限及精密度的初步评价研究。结果显示:建立的方法专属性良好;在25～400ng/ml范围内,线性关系良好,R~2值大于0.99;检测范围内的回收率在86%～116%之间;定量限为2ng/ml;板内精密度和板间精密度的相对标准偏差(RSD)值均小于15%。综上所述,本研究建立了双抗体夹心ELISA法用于检测IB-EV71 VLPs。该方法专属性、线性、范围、准确度、精密度等均较好,定量限为2ng/ml,符合生物分析方法学验证指导原则的基本要求,为IB-EV71 VLPs疫苗的开发与质量控制奠定了基础。

为了获得具有良好免疫效果的候选抗原，本研究原核表达了副猪格拉瑟菌六个具有潜在保护力的蛋白，对小鼠免疫后进行攻毒，以期筛选获得具有免疫保护CX-5461体外效果较好的候选抗原，从而为开发具有交叉保护作用的副猪格拉瑟菌亚单位疫苗奠定基础。63只BALB/c小鼠随机平均分为9组：HPSNAG-1330、CyaY、HPSNAG-0978、HPSNAG-0140、AfuA以及Fe~(3+)ABC-tbp 6个亚单位疫苗组、G. parasuis-SAG纯度5灭活苗组、攻毒对照组和空白组；亚单位疫苗组每种对应蛋白各免疫50 μg·只~(-1)，灭活苗组免疫4×10~(9 )CFU，一免与二免间隔14 d，二免14 d后攻毒，副猪格拉瑟菌Nakasaki菌株攻毒剂量为1.26×10~(9 )CFU。在二免14 d后检测特异性抗体水平、淋巴细胞增殖和IL-2、IL-6、IL-10、IFN-γ和TNF-α的表达，攻毒后观察小鼠的临床症状并观察肺、脾的组织病理变化。免疫组小鼠均能产immune genes and pathways生体液免疫反应；淋巴细胞增殖试验显示：除rAfuA外，其它重组蛋白均能刺激灭活苗组中小鼠淋巴细胞显著增殖（P＜0.05），而6个重组蛋白对相应的亚单位疫苗组和空白组小鼠淋巴细胞增殖均不显著；同时，CyaY组和HPSNAG-1330组小鼠机体的炎性反应和脾、肺的损伤程度相对温和，综合评价效果优于灭活苗组。本研究通过小鼠免疫保护试验筛选出CyaY和HPSNAG-1330两个具有免疫保护性的候选抗原，为后续开展多个抗原的联合免疫和猪体试验提供了素材。

目的观察全程多维引流管护理方RNA virus infection案在乳腺癌患者中的应用及效果。方法选取400例行乳腺癌改良根治术的女性患者,以寻找更多实施全程多维引流管护理为时间节点,实施前200例为对照组,予以乳腺癌术后引流管常规护理;实施后200例为观察组,建立并Puromycin实施全程多维引流管护理方案。比较两组患者引流管护理缺陷发生率、患者满意度及留置引流管并发症。结果观察组导管滑落、堵塞、感染及导管相关性压力性损伤等引流管护理缺陷发生率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);患者满意度改善;留置引流管2周后两组皮下积液和皮瓣坏死差异检验P>0.05;但切口裂开的发生观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对乳腺癌患者实施全程多维引流管护理方案可减少引流管护理缺陷的发生率,有效提升了专科护理质量,同时提高了患者满意度。

骨肉瘤是临床上常见的一种原发性骨恶性肿瘤，具有肿瘤异质性高，预后差，易发生病变局部侵袭和远处转移及病死率高的特点。新辅助化疗联合保肢术为目前治疗骨肉瘤的主要治疗手段，虽然通过此种治疗方法有效地降低了骨肉瘤患者的致残率和致死率，但随着化疗技术的应用，长时间化疗药物的使用使得骨肉瘤细胞对其产生耐药作用，降低了肿瘤细胞对药物的敏感度，使得此治疗方式具有了一multiscale models for biological tissues定的局限性。近年来，随着中医药抗肿瘤的发展和进步，中医药以其治疗效果明显，不良反应少PI3K/Akt/mTOR抑制剂等优势受到了广泛的关注。磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路作为经典的癌症信号通路，在骨肉瘤细胞中被异常激活，通过影响肿瘤细胞的周期、抑制肿瘤细胞的凋亡、抑制肿瘤细胞的自噬及促进肿瘤新生血管的生成，影响骨肉瘤细胞的增殖、侵袭和转移等活动。临床研究发现，中药D-Lin-MC3-DMA纯度单体可以通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白的活性，对骨肉瘤细胞的增殖、凋亡、自噬及新生血管的生成等方面产生作用，发挥抑制骨肉瘤组织和细胞发展的作用，并且能高效的逆转肿瘤细胞对抗癌药物的多药耐药。该文将从中医对骨肉瘤的认识和经验积累，及中药单体调控PI3K/Akt/mTOR信号通路在治疗骨肉瘤疾病的研究进展作一综述，以期为中医药治疗骨肉瘤疾病的应用提供参考。