RAF信号通路

目的 筛查寒证勃起功能障碍(ED)大鼠模型动脉差异表达蛋白质，并进行生物购买PF-07321332信息学分析，为研究寒证ED发病机制提供新的思路与实验依据。方法 将100只雄性性成熟SD大鼠随机分为正常对照组(N组，15只)、寒证造模组(M组，85只),分别在正常环境(22±2)℃及冷环境(4±0.5)℃饲养，干预24周并建立稳定的寒证模型后，通过APO勃起实验筛选出ED大鼠并分为寒证ED组(ED组)和寒证ED干预组(用于其它研究),剩余大鼠为寒证证候组(S组)。采用TMT技术筛查并鉴定寒证ED大鼠动脉差异表达蛋白质，并进行功能富集分析和KEGG通路富集分析。结果 (1)模型的建立：1)生物学表征结果为：与N组相比，M组大鼠反应迟钝，舌苔苍白，大便湿软，小便色淡，体重增长显著减缓(P<0.05),饮食量、饮水量显著升高(P<0.05);2)APO实验结果为：与N组相比，M组大鼠勃起潜伏期显著延长，勃起次数显著减少(P<0.05),ED成模率为47.95%;(2)蛋白质组学：通过TMT技术共鉴定出差异蛋白质364种，其中上调蛋白281种，下immunocompetence handicap调蛋白83种。GO分析显示差异蛋白质主要参与小分子代谢，氧化还原过程，在线粒体和线粒体外膜均有分布，且具有催化活性、氧化还原酶活性等。KEGG信号通路分析发现差异蛋白质涉及氧化磷酸化通路、PPAR信号通路、铁死亡通路等152条信号通路。结论 (1)长期冷刺激可成功诱导建立寒证ED证候与病证结合大鼠模型，其生物学表征符合中医临床证候特点；(2)寒证ED大鼠动脉差异表达蛋白质涉及到复杂的生物学过程、分子功能与信号通路，为进一步基于动脉病理改变层面开展寒证ED发病机制研究奠定了基购买MDV3100础。

目的 分析归纳甲状腺朗格汉complication: infectious斯细胞组织细胞增生症(LCH)的临床特点，分享诊断经验。方法 回顾性分析2015年1月至2022年1月复旦大学附属华山医院内分泌科收治的6例病理确诊甲状腺LCH患者的临床资料，分析甲状腺超声和~(18)F FDG-PEtoposide说明书ET/CT影像学特点。结果 6例(2男4女)确诊年龄18～58岁，均因尿崩症就诊于内分泌科，MRI显示垂体柄增粗。中枢性甲减2例，甲功正常4例；甲状腺抗体阳性3例。甲状腺超声提示3类结节3例，4类结节2例，结节性甲状腺肿1例。结节超声特点：均为低回声；5例边界清晰；4例回声分布不均匀；5例形态欠规则；均未见钙化。~(18)F FDG-PET/CT显示为高摄取结节(SUVmax值>10);手术切除病例确诊4例，粗针穿刺活检病理确诊2例。6例患者确诊时除垂体外，累及肝脏和胸腺各2例，累及肺和骨各1例点击此处。系统治疗后4例甲状腺结节缩小，2例伴肝脏累及者病情进展快速未行评估。结论 甲状腺LCH超声特点为分布欠均匀的低回声结节，边界清但形态欠规则，不伴钙化；~(18)F FDG-PET/CT为高摄取。垂体柄增粗患者伴甲状腺低回声欠规则结节时优选甲状腺结节粗针穿刺联合CD1a和langerin染色以助诊断。

目的 探讨血清单核细胞核因子E2相关因子(Nrf2)、Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)水平变化与糖尿病视网膜病变(DR)分期间关系。方法 选取2020年4月—2023年2月如皋市中医院DR患者147例作为观察组，并点击此处根据DR分期分为非增生型糖尿病视网膜病变(NPDR)、增生型糖尿病视网膜病变(PDR);另选取同期糖尿病无视网膜病变患者49例作为对照Ⅰ组，健康体检者49例作为对照Ⅱ组。对比3组及观察组不同DR分期患者血清Nrf2、Keap1水平，Spearman秩相关系数分析血清Nrf2、Keap1水平与DR分期间关系；多因素logistic回归分析血清Nrf2、Keap1水平对DR分期的影响；限制性立方样条图分析血清Nrf2、Keap1水平与DR分期的剂量-效应关系。结果 观察组血清Nrf2水平低于对照Ⅰ组、对照Ⅱ组，Keap1水平高于对照Ⅰ组、对照Ⅱ组，对照Ⅰ组血清Nrf2水平低于对照Ⅱ组，Keap1水平高于对照Ⅱ组(P<0.05);随DR分期增加，血清Nrf2水平呈降低趋势，血清Keap1水平呈升高趋势(P<0.05);血清Nrf2水平与DR分期呈负相关(r=-0.806,P<0.001),血清Keap1水平与DR分期呈正相关(r=0.854,P<0.001);经多因素logistic回归分析，高血压、糖尿病发病年龄、总胆固醇对DR分期无显著影响(P>0.05),血清Nrf2水平是DR分期的独立保护因素，高脂血症、糖尿病病程、空腹血糖、糖化血红蛋白、血清Keap1水平是Dbiogenic nanoparticlesR分期的独立危险因素(P<0.05);限制性立方样条图分析显示，血清Nrf2(χ~2=11.800,P<0.001)、Keap1(χ~2=8.401,P=0.015)水平与DR分期间存在非线性关系，控制其他病变PD0325901生产商为固定变量，血清Nrf2水平<1.70μg/L、血清Keap1水平>3.00μg/L时，PDR风险显著增加。结论 血清Nrf2、Keap1水平变化与DR分期关系密切，血清Nrf2水平<1.70μg/L、血清Keap1水平>3.00μg/L时提示DR进展至PDR的风险显著增加。

目的 研究结构化教育在子宫内膜非典型增生（AEH）患者保守治疗中的作用，为改善此类患者预后提供参考。方法 纳入2019年1月至2022年1月于首都医科大学附属北京妇产医院诊治的100例AEH患者作为研究对象，用随机数字表法分为对照组和研究组，各50例。对照组接受AEH常规保守治疗与干预，研究组在对照组基础上给予结构化教育模式干预，均随访或干预至入组3个月。利用成人健康自我管理能力测评量表（AHSMSRS），一般自我效能量表（GSES）、宫内膜超声参数、人体成分分析仪等对干预前后的两组患者进行评测，并记录比较干预期间不良反应发生率和总治疗有效率以判AMG510 IC50定干预效果。结果 因研究过程中有剔除或退出者，最终对照组47例、研究组48例完成本研究。干预前，两组子宫内膜厚度、人体成分指标（去脂体质量指数、脂肪率、体内水分量）、AHSMSRS评分和GSES评分比较，差异均无统计学意义（均P>0Brain infection.05）。干预后，研究组子宫内膜厚度、脂肪率、总不良反应发生率均低于对照组，而AHSMSRS评分、GSES评分、去脂体质量指数和总治疗有效率高于对照组，差异均有统计学意义（均PFUT-175抑制剂<0.05）；两组体内水分量比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 结构化健康教育有助于提高AEH患者保守治疗的疾病自我管理能力、自我效能感，促进子宫内膜恢复，减少不良反应发生率，疗效确切。

目的 明确前列消调节低氧诱导因子1-α(HIF1-α)、血管内皮生长因子(VEGF)治疗前列腺增生(BPH)模型大鼠的作用及机制。方法 将60只Wistar大鼠随机分为正常组、模型medical grade honey组、前列消高、中、低剂量组和西药组。除正常组外，其他各组以手术去势后皮下注射丙酸睾酮(5 mg·kg~(-1)·d~(-1)),连续30 d,建立前列腺增生模型。造模完成后，相应给药治疗21 d。取材大鼠前列腺组织，HE染色法观察前列腺组织增生病理变化；免疫组化、免疫荧光法检测血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)、血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)表达评估血管新生；Western blot检测低氧诱导因子1-α(HIF1-α)、VEGF caspase表达量，RT-PCR检测大鼠前列腺组织HIF1-α、VEGF caspase-9 mRNA的表达量。结果 与正常组比较，模型组前列腺体积显著性增大，CD31、VEGFR1含量增加，提示腺体内有明显血管增生；经治疗后，前列消高、中剂量组及西药组前列腺体积缩小，降低CD31、Epigenetics抑制剂VEGFR1含量，HIF1-α、VEGFR caspase-9蛋白及mRNA表达显著性降低。结论 前列消改善丙酸睾酮诱导的大鼠前列腺增生，其机制可能与PF-6463922作用HIF1-α/VEGFR通路有关。

目的 探究血小板相关参数及外周血炎症指标与老年视网膜静脉阻塞(RVO)的关系。方法 采用回顾性病例对照研究，选取青岛市中医医院2018年1月～2022年5月收治的108例老年RVO患者作为RVO组，其中视网膜分支静脉阻塞(BRVO)69例、视网膜中央静脉阻塞(CRVO)39例；选取同期就诊的108例老年白内障患者作为对照组。比较RVO组和对照组的血小板计数(PLT)LY294002 IC50、血小板Puromycin体内实验剂量平均体积(MPV)、大型血小板比率(P-LCR)、血小板压积(PCT)、血小板体积分布宽度(PDW)、外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)及系统免疫炎症指数(SII)。比较BRVO患者和CRVO患者的血小板相关参数及外周血炎症指标。利用ROC曲线判断PLT、MPV、P-LCR、PDW在RVO发生中的预测价值。结果 RVO组的PLT低于对照组，MPV、P-LCR、PDW高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05social media);RVO组和对照组间的PCT、NLR、PLR、SII比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。BRVO组和CRVO组间的PLT、MPV、P-LCR、PCT、PDW、NLR、PLR及SII比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线显示，PLT、MPV、P-LCR及PDW对RVO发生均有预测价值(P<0.05)。结论 血小板相关参数与老年人RVO的发病存在密切关系，而外周血炎症指标与RVO关系不大。

木质纤维素是自然界中最丰富的碳源,通过纤维素酶系的协同作用降解为可发酵糖而被循环利用。多数内切纤维素酶含有多个功能模块,即模块型纤维素酶。目前对不同模块的功能已经有初步了解,但是对各模块间的分子内协同作用机制还缺乏清晰的了解。因此,探究模块型纤维素酶与底物的相互作用,对阐明多模块内切纤维素酶的分子内协同机制具有重要意义。本论文以来自解纤维嗜热酸菌Acidothermus cellulolyticus 11B的两个GH9家族多模块内切纤维素酶Ac Cel9A和Ac Cel9B为研究对象,开展突变体的构建纯化及与底物的互作研究。Ac Cel9A从N端到C端包括CD,CBM3和CBM2三个结构域;而Ac Cel9B除N端的信号肽(38 a.a)外,从N到C端含有1个CGefitinib采购D,2个CBM3,1个FN3和1个CBM2等五个结构域。为了探究多模块内切纤维素酶GH9家族与不同底物的相互作用机制,本文开展以下研究:(1)对Ac Cel9B野生型及结构域缺失突变体进行了表达纯化,酶学性质表征。结果表明,与对照组相比,Ac Cel9B-(CBM3)_2+FN3以RAC+Lignin为底物反应时,酶活力下降幅度最小,仅降低7.6%,说明FN3模块受到木质素影响最小;差示扫描量热分析表明,Ac Cel9B-(CBM3)_2+FN3的T_m值最高,为66.33℃,说明FN3模块能够提高酶的热稳定性。上述结果表明FN3模块对酶活性、稳定性等具有重要作用,同时可能促使酶抵抗底物中木质素的非特异结合,从而降低木质素对酶活性的负面影响。(2)通过酶与不同底物的吸附、解吸附和吸附动力学等测定,探讨了酶与底物的相互作用。饱和吸附研究发现Ac Cel9B及其突变体以RAC为底物时最大吸附量为51.89μmol/g～54.37μmol/g;Ac Cel9B-(CBM3)_2+FN3的吸附量高于Ac Cel9B,说明CBM2模块不利于酶与底物RAC的吸附;Ac Cel9B及其突变体以Avicel为底物时最大吸附量为45.48μmol/g～51.25μmol/g,且吸附量与结构域的数量呈正相关。为了阐明产生上述结果的原因,对Ac Cel9B及其突变体进行吸附动力学测定,以RAC为底物时,可以拟合出良好的准一级、二级吸附动力学曲线,以Avicel为底物时,仅能拟合得到准一级吸附动力学曲线,说明酶与RAC以简单的化学作用力为主,与Avicel相互作用过程复杂。上述结果表明Ac Cel9B及其突变体更容易与RAC结合,并且结构域类型及数量分别影响了酶与底物的相互作用。(3)为了阐明各功能模块的分子内协同机制,以模块构成简单的Ac Cel9A为研究对象,对模块之间linker的PT-box序列进行重构,构建并表达纯化突变体Ac Cel9A-PT0和Ac Cel9A-PT1。酶学性质表征发现,与Ac Cel9A相比,PT-box缺失突变体(Ac Cel9A-PT0)的酶活力在以CMC和RAC为底物时分别降低46.4%和52.1%。70℃条件下Ac Cel9airway infectionA-PT0的半衰期比Ac Cel9A降低0.38倍。上述结果表明,PT-box序列是提高酶活力和热稳定性的重要因素。综上,为了阐明多模块内切纤维素酶与不同底物相互作用的协同机制,本文以A.cellulolyticus 11B菌株中的两个多模块纤维素酶(Ac Cel9A和Ac Cel9B)为研究对象,探究各结构域和linker在酶分子热稳定性、与底物相互作用等方面发挥的功能。本研究为深入解析多模块纤维素酶GH9与不同底物的相互作用机制奠定了基础,也为开展PT-box序列介导的模块间协同作用研究提供了依ABT-199 MW据。

目的 基于多数据库数据探索肝细胞癌（HCC）发生发展的驱动基因并挖掘HCC治疗的新生物靶点。方法 采用从TCGA、GEO和ICGC数据库中获取的858例HCC组织数据与493例癌旁组织数据（共1351例转录组和基因组数据），运用GSEA筛选HCC与癌旁的差异通路，进而筛选差异通路中显著富集的基Fine needle aspiration biopsy因，获得Hub基因3-hydroxyacyl CoA脱氢酶（EHHADH）。基于TCGA的HCC数据集分析与EHHADH转录组水平下调相关的基因突变，发现TP53突变最显著相关。利用相关性分析探究TP53突变导致EHHADH表达下调的机制。基于Metascape数据库预测EHHADH参与HCC发展的信号通路，发现与铁死亡信号通路显著相关。对30例HCC癌组织及配对的癌旁正常组织进行免疫组化染色，验证EHHADH的表达情况。结果 三个HCC数据集均显示EHHADH在癌组织中相对于癌旁组织显著低表达（P<0.05），且和肝细胞去分化程度显著相关（P<0.01）。TCGA的HCC数据集体细胞突变景观分析显示HCC患者基因组中TP53突变率比例最高。EHHADH上游基因PPARGC1A转录组水平在TP53突变的HCC患者组中较未突变组显著下调（P<0.05），并与EHHADH表达水平相关。GO和KEGG富集分析结果显示EHHADH参与到肿瘤脂肪酸代谢通路中。免疫组化结果验证HCC组织中EHHADH表达水平下调，且其表达水平与肝细胞去分化程度及铁死亡进程相关。结论 HCC组织中TP53突变可能诱导EHHTaurine小鼠ADH上游基因PPARGC1A表达异常从而下调EHHADH表达。EHHADH在HCC癌组织中低表达与HCC癌组织的去分化程度加重及出现铁死亡逃逸现象密不可分，有可https://www.selleck.cn/products/epz-6438.html能成为HCC潜在治疗靶点。

为了对发酵桑叶茶工艺条件进行优化并探究桑叶茶经发酵后抗氧化活性的变化，该试验通过响应面分析法确定发酵桑叶茶在发酵温度、发酵时间和黑曲霉接种量3种变量条件下的最佳工艺条件，并测定发酵桑叶茶生物活性物质含量及其抗氧化性。结果表明，NSC125066最佳工艺条件为发酵时间5https://www.selleck.cn/products/pf-07321332.html天16小时，发酵温度30 ℃，接种量16.55%，此条件下所制发酵桑叶茶感官评分高达90分且其总黄酮、总多糖、多酚类、游离氨基酸、芦丁、槲皮素含量比桑叶绿茶分别升高了14.39%、Biotic surfaces12.67%、2.90%、3.46%、81.13%、19.35%，还检测到了含量7.55%±0.37%的茶褐素。此外，1/1000（g/mL）浓度下发酵桑叶茶对羟自由基、DPPH自由基、超氧自由基的清除率和对二价铁离子的螯合率分别是桑叶绿茶的1.16倍、1.07倍、1.06倍和0.82倍，该研究结果为今后桑叶的进一步开发与应用提供理论基础和参考。

目的 探究咪达唑仑诱导宫颈癌细胞铁死亡的作用与机制。方法 体外培养人宫颈癌HeLa细胞，将其分为5个组，L-咪达唑仑组/M-咪达唑仑组hepatic oval cell/H-咪达唑仑组分别注入5、10、20μmol/L咪达唑仑、高剂量咪达唑仑+核因子E2相关因子2激活剂组注入20μmol/L咪达唑仑和80 nmol/L Bardoxolone、另设正常培养的HeLa细胞为Control组，继续培养24 h。采用CCK-8、克隆形成实验检测细胞增殖；PI染色检测细胞死亡率；透射电镜观察线粒体形态变化；试剂盒检测铁、活性氧（ROS）、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）水平；Western blot检测Nrf2/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路相关蛋白及GSH过氧化BMS-354825配制物酶4(GPX4Hydrotropic Agents抑制剂)蛋白表达情况。结果 与Control组比较，L-咪达唑仑组、M-咪达唑仑组、H-咪达唑仑组HeLa细胞活力下降，克隆数减少，细胞死亡率增加，线粒体呈现显著铁死亡特征，细胞中铁、ROS、MDA水平升高，GSH水平及GPX4、核Nrf2、HO-1蛋白表达下降，且H-咪达唑仑组变化更明显（P <0.05）。与H-咪达唑仑组比较，H-咪达唑仑+Nrf2激活剂组HeLa细胞活力升高，克隆数增加，细胞死亡率减少，线粒体铁死亡损伤程度减轻，细胞中铁、ROS、MDA水平下降，GSH水平及GPX4、Nrf2、HO-1蛋白表达升高（P <0.05）。结论 咪达唑仑能以剂量依赖性方式抑制HeLa细胞增殖，诱导其铁死亡，可能通过抑制Nrf2/HO-1信号通路实现。