RAF信号通路

【目的】探究蚯蚓提取物对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的影响，为蚯蚓用于UC潜在治疗药物提供试验依据。【方法】C57BL/6小鼠自由饮用3.5%DSS溶液7 d并灌胃不同浓度的蚯蚓提取物，每日监测小鼠精神状态、体质量和大便性状；于第10天解剖，取脾脏和结肠，制作结肠组织石蜡切片并进行苏木精—伊红染色；以荧光定量PCR检测结肠组织中肿瘤坏死因子α (TNF-α)、白细胞介素6 (IL-6)、白细胞介素1β (IL-1β)和白细胞介素10 (IL-10)的m RNA表达量；以ELISA检测结肠组织中闭锁小带蛋白1 (ZO-1)、黏蛋白2 (Muc2)和咬合蛋白(occludinFG-4592)的表达量。【结果】蚯蚓提取物组能减轻小鼠体质量下降程度，降低小鼠疾病活动指数评分，减少炎性细胞浸润程度，下调Iselleck合成L-6、IL-1β和TNF-α的mRNA表达，上调IL-10的mRNA表达以及ZO-1、occludin和Muc2的蛋白表达量。【结论】Gel Imaging Systems蚯蚓提取物对DSS诱导的小鼠UC具有缓解作用，小鼠结肠组织炎性损伤和UC症状减轻。蚯蚓提取物可保护结肠黏膜的完整性和改善肠黏膜屏障功能。

高丝氨酸脱氢酶（homoserine dehydrogPLX5622化学结构enase， HSD）是L-高丝氨酸和L-苏氨酸等天冬氨酸家族氨基酸生物合成的关键酶，然而由于其活性较低且受到L-苏氨酸等的反馈抑制作用，严重制约了L-高丝氨酸和L-苏氨酸等氨基酸的生物合成水平。该研究通过数据库检索，挖掘了8个不同来源的高丝氨酸脱氢酶。通过酶活测定分析法发现，来源于二穗短柄草（Brachypodium distacantibiotic-bacteriophage combinationhyon）的高丝氨酸脱氢酶BdHSD具有最高的催化活性，达到7.6 U/mg，且不受L-苏氨酸的反馈抑制，其催化最适pH为10.5，最适催化温度为38 ℃。随后本研究进一步对BdHSD进行定向进化，提高BdHSD的催化活Ipatasertib半抑制浓度性。通过多轮筛选获得了3个具有更高催化活性的BdHSD突变体T186A，N283K，A137T/I188V，其中突变体T186A酶活性达到10.3 U/mg，比野生型提高了35.6%。通过L-高丝氨酸发酵分析发现，BdHSD突变体能有效提升L-高丝氨酸的合成水平。综上所述，该研究挖掘和改造了一个具有高效催化特性的高丝氨酸脱氢酶BdHSD，为L-高丝氨酸、L-苏氨酸和L-蛋氨酸等天冬氨酸家族氨基酸的高效生物合成提供了有力的催化元件。

高丝氨酸脱氢酶（homoserine dehydrogPLX5622化学结构enase， HSD）是L-高丝氨酸和L-苏氨酸等天冬氨酸家族氨基酸生物合成的关键酶，然而由于其活性较低且受到L-苏氨酸等的反馈抑制作用，严重制约了L-高丝氨酸和L-苏氨酸等氨基酸的生物合成水平。该研究通过数据库检索，挖掘了8个不同来源的高丝氨酸脱氢酶。通过酶活测定分析法发现，来源于二穗短柄草（Brachypodium distacantibiotic-bacteriophage combinationhyon）的高丝氨酸脱氢酶BdHSD具有最高的催化活性，达到7.6 U/mg，且不受L-苏氨酸的反馈抑制，其催化最适pH为10.5，最适催化温度为38 ℃。随后本研究进一步对BdHSD进行定向进化，提高BdHSD的催化活Ipatasertib半抑制浓度性。通过多轮筛选获得了3个具有更高催化活性的BdHSD突变体T186A，N283K，A137T/I188V，其中突变体T186A酶活性达到10.3 U/mg，比野生型提高了35.6%。通过L-高丝氨酸发酵分析发现，BdHSD突变体能有效提升L-高丝氨酸的合成水平。综上所述，该研究挖掘和改造了一个具有高效催化特性的高丝氨酸脱氢酶BdHSD，为L-高丝氨酸、L-苏氨酸和L-蛋氨酸等天冬氨酸家族氨基酸的高效生物合成提供了有力的催化元件。

盐碱、干旱等非生物胁迫会降低作物产量，影响作物品质。葡糖磷酸变位酶(phosphoglucomutase, PGM)在植物中主要参与蔗糖代谢与淀粉合成，对植bone biology物的生长发育起重要调控作用。现有研究表明，PGM基因可能在植物非生物胁迫应答中发挥特定的作用，但目前对于PGM基因如何响应逆境胁迫尚无报道。本研究通过农杆菌介导的遗传转化方法获得了超量表达拟南芥(Arabidopsis thaliana)PGM(AtPGM)的转基因拟南芥，将其与pgm突变体和野生型(Col-0)的表型进行比较，研究了AtPGM调控植株耐盐性方面的作用。结果表明：(1)在拟南芥中超量表达AtPGM显著降低了植株对盐胁迫的抗性，过表达株系在盐胁迫下的存活率显著降低，而pgm突变体的耐盐性显著增强；(2)在盐胁迫下，pgm突变体中花青素苷合成基因的表达水平高于过表达和野生型植株的，同时，叶片中表现出花青素显著积累的表型；(3)盐胁迫下，过表达株系叶片中的丙二醛和过氧化氢含量显著升高，pgm突变体中的则显著降低；(4)与野生型相比RSL3试剂，盐胁迫下pgm突变体株系的种子萌发速率显著上R428采购升，而过表达株系的种子萌发则显著被盐抑制；(5)进一步研究盐胁迫下ABA合成、代谢及信号转导相关基因表达变化后发现，pgm突变体中ABA合成基因ABA1、 ABA信号转导基因ABI5的表达有明显的升高趋势，表明pgm突变体耐盐性的提高可能部分是由于ABA的累积。以上结果说明，pgm突变体具有较高的耐盐性，而AtPGM转基因拟南芥对盐胁迫的敏感性明显提高，AtPGM可能通过调控植物的氧化还原稳态来参与拟南芥对非生物胁迫的响应。该研究为后续PGM基因功能研究奠定基础，同时也为植物抗逆基因工程改良提供候选基因。

目的调查血液病患者弓形虫感染血清学阳性率，为改善血液Dolutegravir生产商病患者预后、提高患者生活质量提供借鉴。方法以2021年1月1日—2023年10月10日在莆田学院附属医院就诊的240例血液病患者（血液系统肿瘤性疾病患者170例、血液系统非肿瘤性疾病患者70例）和同期在该院体检的500例健康体检者为研究对象。收集研究对象人口学特征和血清样本，采用化学发光法检测血清抗弓形虫IgG和IgM抗体，以IgG或IgM抗体任一阳性视为抗体阳性，对血液病患者和健康体检者血清抗弓形虫IgG和IgM抗体阳性率进行比较。结果血液系统肿瘤性疾病患者、血液系统非肿瘤性疾病患者和健康体检者平均年龄（F=2.034NN2211分子式,P>0.05）和性别构成差异均无统计学意义（χ~2=0.462,P>0.05），血液病患者与健康体检者有猫或犬接触史比例差异无统计学意义（χ~2=0.00,P>0.05）。血液病患者血清抗弓形虫抗体阳性率显著高于健康体检者（15.8%vs.0.6%；χ~2=71.902,P<0.01），血液系统肿瘤性疾病（18.2%）、血液系统非肿瘤性疾病患者（10.0%）及健康体检者血清抗弓形虫抗体阳性率差异有统计学意义（χ~2=78.327,P<0.01）；两两比较发现，血液系统肿瘤性疾病、血液系统非肿瘤性疾病Bioethanol production患者血清抗弓形虫抗体阳性率均显著高于健康体检者（P均<0.05），而血液系统肿瘤性疾病与非肿瘤性疾病患者血清抗弓形虫抗体阳性率差异无统计意义（P>0.05）。血清抗弓形虫抗体阳性的血液病患者有猫或犬接触史比例显著高于血清抗弓形虫抗体阴性的血液病患者（21.1%vs.5.4%；χ~2=8.653,P<0.05）。结论血液病患者弓形虫感染血清学阳性率较高，且显著高于健康体检者。

目的:(1)探究复方甜地丁对乳腺增生动物模型干预效果;(2)初步阐明复方甜地丁干预乳腺增生的作用机制。方法:(1)通过网络药理学研究分析并预测复方的有效化学成分、乳腺增生疾病模型的蛋白靶点以及关键代谢通路的关联,初步预测、评估药物组方的可能生物学效应;(2)采用雌激素、孕激素联合诱导建立乳腺增生模型,通过HE染色技术结合检测脏器指数变化等对疾病模型建立是否成功进行评估;(3)分别将不同剂量的通过水煎、微生物发酵等处理后复方甜地丁产物,作用于乳腺增生模型小鼠获悉更多,通过检测小鼠脏器指数变化、利用HE染色技术检测乳腺组织病理变化,明确此复方药物对乳腺增生小鼠的干预效果;(4)利用ELISA检测雌激素(E2)、孕激素(P)、催乳素(PRL)、卵泡刺激素(FSH)等相关激素变化水平,分析药物对乳腺增生相关激素的影响;(5)收集小鼠粪便,检测乳腺增生小鼠用药前后其短链脂肪酸(Oral immunotherapySCFAs)和肠道菌群水平变化,分析药物是否通过肠-乳腺轴发挥作用。结果:(1)网络药理学结果表明复方甜地丁中含有46个药物活性成分,其活性成分相关靶点1213个,匹配588个乳腺增生病的靶点后,得到50个可能是复方干预乳腺增生的直接作用靶点。(2)乳腺组织切片HE染色结果表明,MODEL组小鼠乳腺腺泡数量、小叶数量增多,导管扩张,乳腺组织呈现增生状态;脏器指数结果表明MODEL组小鼠子宫、肝脏指数相比CONTROL组明显增加,且具有统计学意义(P<0.05),可证明激素造模法可以有效建立乳腺增生模型;(3)小鼠经药物干预后,除了TDDH组无变化外,与空白组相比,其他各干预组肝脏指数均降低,具有统计学意义(P<0.05);对于肾脏指数而言,与CONTROL组相比,TDDZ组子宫指数降低,具有统计学意义(P<0.05);对于子宫指数而言,与CONTROL组相比,MODEL组子宫指数升高,具有统计学意义(P<0.01);乳腺增生小鼠经过一个月药物干预后,与MODEL相比,XZW、TDDD、TDDZ、TDDH、WSWD、WSWZ、WSWH组小鼠乳腺小叶数量、腺泡数量减少,导管口缩小,随着用药剂量的增加,乳腺组织弥漫性增生情况改善增加;(4)ELISA检测激素变化结果表明,小鼠经药物干预后,WSWZ组与MODEL组相比,E_2降低,具有统计学意义(P<0.05);TDDD组与MODEL组相比,FSH降低,具有统计学意义(P<0.05);Dorsomorphin体内(5)模型小鼠经干预后,各组小鼠的短链脂肪酸、肠道菌群丰度发生变化。结论:复方甜地丁可以明显改善小鼠乳腺弥漫性增生,作用机制可能涉及肠-乳腺轴,即药物可增加小鼠肠道内有益菌群的丰度和多样性,进而增强调节机体免疫应答而发挥干预乳腺增生作用。

目的：探讨骨骼肌细胞铁死亡的发生及sirtuin 6 (Sirt6）对其调控的分子机制。方法：将C2C12小鼠成肌细胞分为对照组、erastin(Era；铁死亡诱导剂）组、Era+ferrostatin-1（铁死亡拮抗剂）组、Era+MDL-800(Sirt6激动剂）组和Era+OSS-128167(Sirt6抑制剂）组；通过细胞活力和C2C12成肌细胞肌源性分化情况观察铁死亡诱导剂及拮抗剂的影响；RT-qPCR和Western blot测定成肌细胞及肌管中Sirt6、肌萎缩标志物、铁死亡标志物的mRNA及蛋白表达水平；进一步检测P53蛋白乙酰化水平、胞内亚铁离子（Fe~(2+)）、活性氧（ROS）、谷胱甘肽（GSH）及脂质过氧化指标Liperfluo；免疫荧光法检测肌管分化标志物肌球蛋白重链（MHC）荧光信号。结果：Era降低成肌细胞活力和肌管分化质量，伴有Sirt6的mRNA和蛋白水平下降（P<0.05），肌萎缩标志物肌肉环指蛋白1(MuRF1）和肌萎缩F盒蛋白（MAFbx）表达增加（P<0.05）。激活Sirt6可抑制P53蛋白第381位赖氨酸乙酰化，降低P53表GDC-0068小鼠达水平，提高溶质载体家族7成员11(SLC7A11）和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4）水平，改善ROS、GSH、Fe~(2+)和脂质过氧化等铁死亡特异性指标（P<0.05），逆转铁死亡导致的肌肉负性变化。反之，抑制Sirt6将进一步加重铁死亡。结论：Sirt6可抑制PBucladesine53蛋白epigenomics and epigenetics乙酰化使其活性降低，通过调控P53/SLC7A11/GPX4信号通路抑制成肌细胞铁死亡，进而改善肌肉质量。

目的 评估湖南省社区人群中既往心血管疾病（cardiovascular disease,CVD）患者的二级预防抗血小板药或更多他汀类药物的用药情况，并明确其与个体特征的相关性。方法 利用2016—2019年湖南省CVD高危人群早期筛查与综合干预项目（简称“高危筛查项目”）采集的数据，选取湖南省12个县/区的137 818例35～75岁的常住居民，通过问卷调查的方式，收集调查对象自报缺血性心脏病和/或缺血性脑卒中患病情况以及相关药物使用情况。使用多变量混合效应模型，以社区水平作为随机截距效应，评估个体特征与二级预防用药Aurora Kinase抑制剂治疗的相关性。结果 在137 818例调查对象中，患有缺血性心脏病和/或缺血性脑卒中2 779例（2.02%），自报使用抗血小板药物或他汀类药物360例（12.95%），仅使用抗血小板药物155例（5.58%），仅使用他汀类药物85例（3.06%）,2种药物均使用120例（4.32%）。抗血小板药物使用率高于他汀类药物使用率，差异有统计学意义（χ~2=21.34,P<0.01）。抗血小板药物和他汀类药物的使用率中，男性、城市、非农民、高教育程度、高收入人群的药物使用率高于女性、农村、农民、低教育程度和低收入人群，差异有统计学意义（χ~2=16.82、5.30、60.14、7.42、3.08,P<0.05）。多因素分析结果显示，女性（OR=0.68,95%CI:0.49～0.95,P=0.02）和已婚人群（OR=0.62,95%CI:0.40～0.94,P=0.03）服用抗血小板药或他汀类药物的可能性更低，而高教育水平（初中：OR=1.60, 95%CI:1.13～2.27,P=0.01；高中：OR=2.01,95%CI:1.25～3.22,P<0.infection (gastroenterology)01）和高血压患者（OR=1.53,95%CI:1.14～2.07,P=0.01）的药物使用率更高。结论 湖南省CVD患者二级预防药物使用率较低，且不同人口学特征人群的差异较大。应针对女性、低学历、低收入等弱势群体量身定制有针对性的CVD二级预防干预措施，并加强基层社区医生对二级预防用药指南的认识和理解，以提升CVD患者二级预防药物治疗依从性，改善二级预防现状，降低疾病负担。

目的 探究壳寡糖(COS)延缓db/db小鼠自发性糖尿病进程的可能机制，研究不同剂量COS对其糖脂异常的影响及抗氧化作用。方法 自发性糖尿病db/db小鼠随机分为4组，每组10只，其中对照(Control)组按体重每日灌胃生理盐水(10 ml/kg);COS低、中、高剂量(COS-L、COS-M、COSBrazillian biodiversity-H)组每日称重后按250、500、1 000 mg/kg体重剂量灌胃COS溶液。连续灌胃16 w后，测定小鼠血糖、糖原、血脂和抗氧化等指标，并对各脏器进行组织学检查。结果 与Control组比较，COS各组进入糖尿病前期和糖尿病阶段的时间均有一定的延后；COS各组肝糖原和肌糖原含量显著提CP-456773试剂高(P<0.01);COS各组血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、Entinostat临床试验低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)明显降低(P<0.01,P<0.05);COS各组肝组织内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)比活力有所提高，尤其是COS-M组和COS-H组明显提高，丙二醛(MDA)含量显著降低(均P<0.01);组织学检查显示，COS对胰腺和肾脏组织具有一定的保护作用。结论 COS可通过控制db/db小鼠血糖升高、减少糖原分解、调节血脂异常、抵抗体内氧化应激、保护组织等途径延缓糖尿病发生发展的进程。

目的 探究牡荆素对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜损伤的保护作用及其调控机制。方法 将SD大鼠随机分为对照组、模型组、牡荆素（3MG132采购、6、12 mg/kg），及牡荆素（12 mg/kg）+EX527(5 mg/kg)组，每组各10只。除对照组外，其余各组大鼠均采用卵清白蛋白诱导建立变应性鼻炎大鼠模型，模型构建成功后，各组大鼠ip相应剂量药物，对照组和模型组大鼠ip等量的生理盐水，1次/d，连续14 d。末次给药结束后30 min，记录各组大鼠行为学评分，观察鼻黏膜组织病理https://www.selleck.cn/products/jq1.html形态学变化；检测鼻黏膜组织超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH）、丙二醛（MDA）、活性氧气簇（ROS）、铁离子（Fe~(2+)）水平，铁死亡相关蛋白溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)以及沉默信息调节因子1(Sirt1)、叉头框蛋白O1(FoxO1)、p-FoxO1、Ac-FoxO1蛋白表达。结果 与模型组相比，牡荆素各剂量组大鼠行为学评分均显著降低，鼻黏膜损伤显著改善（P<0.05）；大鼠鼻黏膜组织匀浆SOD、GSH活性显著升高，MDA、ROS、Fe~(2+)含量均显著降低（P<0.05）；大鼠鼻黏膜组织SLC7A11、GPX4、Sirt1、FoxO1蛋白表persistent infection达显著升高，p-FoxO1、Ac-FoxO1、ACSL4蛋白表达显著降低（P<0.05），且呈剂量相关性。结论 牡荆素能够改善变应性鼻炎大鼠鼻黏膜损伤，其机制与激活鼻黏膜组织Sirt1/FoxO1通路，抑制细胞铁死亡有关。