目的 对多发性内分泌腺瘤2A型（MEN2A）1个家系进行临床调查及RET原癌基因突变位点筛查，明确疾病诊断、分型，以指导治疗、预防及改善预后。方法 对1个包括6名甲状腺髓样癌先证者在内的共36位成员的MEN2A家系进行临床资料调查，并提取28位家系成员（1位先证者未采血）外周血基因组DNA，对RET基因的第8、10、11、13、14、15、16外显子进行PCR扩增，产物直接测序。结果 RET基因各外显子PCR扩增结果显示，13名家系VP-16体外成员存在RET原intramedullary abscess癌基因10号外显子错义突变杂合错义突变c.1852T>A，导致618位半胱氨酸（TGC）变为丝氨酸（AGC）(Cys618Ser)，其中包括5名IACS-010759小鼠先证者及8名家系成员。12名RET基因Cys618Ser突变携带者家系成员均有甲状腺超声改变，并伴随降钙素水平升高。而RET基因Cys618Ser野生型携带者家系成员降钙素水平均正常。病史分析证实2名甲状腺髓样癌先证者伴甲状旁腺功能亢进症，1例RET基因Cys618Ser突变携带者家系成员合并嗜铬细胞瘤，该家系最终确诊为MEN2A。结论 RET基因检测对MEN2A家系患者治疗和随访有指导作用，对无症状携带者的诊断和治疗具有指导价值。降钙素水平与RET原癌基因突变Cys618Ser之间具有良好的临床相关性。临床上疑诊患者应及时进行筛查。
原发性玻璃体视网膜淋巴瘤：10年诊治回顾
目的探讨十年间复旦大学附属眼耳鼻喉科医院诊治的原发性玻璃体视网PUN30119 IC50膜淋巴瘤(PVRL)患者的临床特征、治疗及预后情况。MRTX1133方法回顾性临床研究。2011年至2021年于复旦大学附属眼耳鼻喉科医院检查确诊并接受治疗的PVRL患者67例126只眼纳入研究。其中, 男性23例(34.3%, 23/67 ), 女性44例(65.7%, 44/67 );平均年龄57.1岁。双眼59例(88.1%, 59/67), 单眼8例(11.9%, 8/67)。眼部初诊时, 有明确原发性中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)病史22例;头颅影像学检查发现颅内病灶5例;无中枢神经系统受累40例。因误诊葡萄膜炎给予糖皮质激素治疗20例。所有患者均接受玻璃体腔注射甲氨蝶呤(IVM)治疗, 治疗方案为诱导期每周2次, 持续2周;巩固期每周1次, 持续1个月;维持期每个月1次。伴PCNSL或双眼患者同时接受全身化学药物治疗(化疗), 部分联合脑部放射治疗(放疗)。随访时间平均39.3个月。回顾分析患者临床表现、治疗及预后情况。治疗前后视力比较采用t检验。结果眼部初诊时已有明确PCNSL病史的22例, 颅内诊断至眼部确诊时间平均为22.9个月;最初无中枢神经系统受累的40例中, 有14例在随访过程中出现中枢神经系统受累(20.9%, 14/67 ), 眼部确诊至颅内诊断的时间平均为9.9个月。126只眼中, 伴眼前节炎症42只眼(33.3%, 42/126)。玻璃体炎型、视网膜型、玻璃体视网膜型分别为58 (46.0%, 58/126)、7 (5.6%, 7/126)、61 (48.4%, 61/126)只眼, 其中同时伴视神经受累9只眼(7.1%, 9/126 )。接受IVM治疗平均12次。IVM联合全身化疗59例(88.1%, 59/67 ), 其中16例同时联合脑部放疗。所有患者完成治疗周期后, 病情均完全缓解(100.0%, 67/67 )。治疗后, 眼部复发21只眼(16.7%, 21/126);颅内复发22例(32.8%, 22/67 );死亡8例(11.9%, 8/67)。患者无进展生存期平均为23.7个月;生存时间平均为43.6个月;5年总体生urinary metabolite biomarkers存率为72.5%。结论 PVRL表现复杂多样, 多伴有中枢神经系统受累;其可分为玻璃体炎型、视网膜型和玻璃体视网膜型, 视神经可同时受累;IVM联合全身治疗, 病情可完全缓解。
敲低CDCA8基因表达对膀胱癌5637细胞吡柔比星敏感性的影响
目的 膀胱癌具有较高的耐药和复发率，研究其分子机制有助于解决临床耐药问题。文中旨在探索CDCA8在膀胱癌5637细胞中的表达与吡柔比星(THP)敏感性的相关性。方法 收集2018年1月至2020年12月中南大学湘雅医学院附属海口医ABT-199浓度院膀胱癌组织患者的临床信息。从TCGA数据库中获取CDCNS nanomedicineCA8的mRNA表达数据及患者化疗信息，同时进行免疫组化实验，分析CDCA8的表达与患者化疗敏感性的关系。针对CDCA8基因构建RNA干扰慢病毒，将膀胱癌5637细胞分为空白组(未作处理)、阴性对照组(转染不含CDCA8靶序列的慢病毒)和实验组(转染含CDCA8靶序列的慢病毒，敲CL 318952低CDCA8),检测CDCA8基因及蛋白的表达；检测敲低CDCA8对膀胱癌细胞THP敏感性的影响；Celigo检测5637细胞吡柔比星IC50。结果 膀胱癌化疗者CDCA8表达(10.369±1.131)较非化疗者(9.250±0.892)显著高表达(P=0.012)。qRT-PCT实验结果显示实验组CDCA8的mRNA表达量(0.069±0.004)较空白组(1.087±0.075)、阴性对照组(1.001±0.054)显著降低(P<0.001)。免疫印迹实验结果所示，实验组CDCA8蛋白表达量较空白组、阴性对照组明显降低(P=0.003)。实验组的IC50明显低于空白组、阴性对照组(P<0.05),细胞抑制率显著高于其他两组(P<0.05)。结论 敲低CDCA8表达后增强了膀胱癌5637细胞对THP的敏感性，为后续研究膀胱癌THP耐药机制奠定了研究基础。
人源TNF-α蛋白生物信息学分析及相关治疗思路研究
目的 应用生物信息学分析软件预测并分析人源肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白结构和功能，并结合该课题组前期实验结果提出一些新的治疗思路。方法 利用在线Uniprot蛋白数据库、Expasy在线预测网站、SignalP-5.0、TMHMM Server V2.0、Cell-PlDinaciclib配制oc、SOPMA、SWISS-MODEL、在线数据库Protscale等生物信息学预测软件对人源TNF-α蛋白理化性质、信号肽、跨膜区、亚细胞定位、空间结构及疏水性分析；登录“http：//www.cbs.dtu.dk/services/netrhos/”网站对该蛋白磷酸化位点进行预测；选取String及IEDB等在线网站分析人源TNF-αSTM2457分子式的相互作用蛋白及该蛋白优势表位预测。结果 人源TNF-α蛋白为编码233个氨基酸的蛋白质，相对分子质量为26×10~3，为不太稳定的亲水性蛋白，有跨膜区，无信号肽；预测该蛋白亚细胞定位在细胞膜中，蛋白序列中存在15个丝氨酸磷酸化位点，二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主；三级结构模型Medical practice显示该蛋白可形成同源三聚体，有多种蛋白与之相互作用。结论 生物信息学预测分析人源TNF-α含有多个磷酸化位点和B细胞优势表位，并且该表位与前期实验找到的功能性肽段序列相符，可为临床针对人源TNF-α设计多肽或药物提供新靶点。