RAF信号通路

目的:胸腺是T细胞分化发育的重要场所,其中胸腺上皮细胞(thymic epithelial cells,TECs)是胸腺重要的组织细胞。在机体发生严重感染、肿瘤的放化疗、应激和器官移植排斥反应发生时常伴有胸腺的急性萎缩和退化,严重影响机体的免疫功能。其中有关胸腺萎缩的免疫机制,尤其是TECs的自然衰老与退化的机制还没有一个明确的解释。当严重感染、肿瘤发生与放化疗、基因突变等内质网应激因素存在时,可导致大量新生的蛋白无法进行正确的折叠。有文献表明,由内质网接头蛋白Sel1L(suppressor/Enhancer of Lin-12-like,Sel1L)构成的内质网相关降解复合体(endoplasmic reticulum associated degradation,ERAD)对于胞内未正确折叠或错误折叠的蛋白具有重要的清除功能。而有关胸腺上皮细胞中ERAD在维护胸腺组织结构及功能中的作用尚不清楚。本课题通过构建胸腺上皮细胞特异性敲除Sel1L基因小鼠模型,初步探讨了ERAD缺失对胸腺上皮细胞调控胸腺T细胞分化发育的影响,此结果对阐明因继发因素引起胸腺退化所致T细胞免疫缺陷的重建具有重要的理论意义和潜在的临床应用价值。方法:1.TECs中特异性敲除Sel1L基因小鼠模型构建利用Cre-Loxp条件敲除,将Foxn1-cre~(+/-)小鼠和Sel1L ~(f/f)小鼠配种繁殖,并采用聚合酶链式反应和琼脂糖凝胶电泳技术检测,基因型为Foxn1Cre~(+/-)Se1l L~(f/f)的小鼠为胸腺上皮细胞内Sel1L基因特异性敲除的模型小鼠(Knockout mouse,KO),同窝基因型为Foxn1Cre~(-/-)Se1l L~(f/f)作为对照组的野生型小鼠(Wildtype mouse,WT)。2.TECs特异性敲除Sel1L基因小鼠胸腺的组织学取6-8周龄的WTselleckchem LY294002和KO小鼠,称量体重。取胸腺,称量胸腺重量,评估胸腺大体形态,并将胸腺组织包埋切片,进行H&E与荧光染色,进一步分析其组织结构。3.Sel1L分子缺失对胸腺上皮细胞亚群的影响采用流式细胞术对Sel1L分子缺失的TECs进行初步分析,评估其细胞及亚群比例的变化。4.TECs中Sel1L基因缺失对小鼠胸腺T细胞发育及亚群的影响运用荧光染色流式分析TECs特异性敲除Sel1L基因小鼠胸腺T细胞发育不同阶段及各亚群的影响。5.胸腺上皮细胞Sel1L基因缺失对小鼠外周T细胞亚群的影响运用流式细胞术分析WT和KO小鼠外周T细胞各亚群比例的影响。6.免疫组学测序磁珠分选WT和KO小鼠脾脏CD4~+T细胞,利用二代测序技术,对其TCR进行测序分析,评估T细胞TCR克隆多样性。结果:(1)TECs中Sel1L基因特异性敲除小鼠模型构建成功,聚合酶链式反应及琼脂糖凝胶电泳鉴定小鼠基因型。自然繁殖到第二代小鼠为纯合Sel1L~(f/f)子代;基因型为Foxn1-cre~(+/-PF-07321332采购)Se11L~(f/f)是Sel1L KO小鼠,基因型为Foxn1-cre~(-/-)Se11L~(f/f)是WT小鼠。(2)KO小鼠与WT小鼠相比,胸腺重量、胸腺指标和胸腺细胞总数发生了明显的降低。(3)Sel1L基因敲除后小鼠胸腺发生了严重的萎缩,H&E切片染色及流式细胞术分析表明,胸腺上皮细胞绝对值降低,髓质胸腺上皮细胞比例降低更为严重。(4)胸腺上皮细胞中特异性敲除Sel1L基因后,胸腺细胞总数显著降低,胸腺中CD8~+T细胞比例降低。胸腺细胞其余各亚群比例变化不明显,但细胞数降低。(5)WT和KO小鼠脾脏、外周血中T淋巴细胞的比例无明显变化,但CD4~+T和CD8~+细胞的TCR多态性降低,克隆性增加。结论:内质网接头蛋白Sel1L在胸腺上皮细胞中特异性缺失,导致小鼠在其生长的早期即发生胸腺的严重萎缩和退化,胸腺上皮细胞及胸腺细胞数总数及比例明显降低。外周的T细胞亚群比例无明显改变,但外周中CD4~+T以及CD8~+Tvery important pharmacogenetic细胞TCR多样性降低,导致机体免疫功能的降低。

目的探讨三氧化二砷(As_2O_3)通过早幼粒细胞白血病(PML)基因对三阴性乳腺癌细胞增殖、侵袭迁移的影响。方法采用慢病毒介导的短发夹核糖核酸干扰技术,观察PML对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、克隆形成和侵袭迁移的影响,进一步观察As_2O_3联合沉默PML表达对MD点击此处A-MB-231细胞增殖、克隆形成和侵袭迁移的影响。结果沉默PML的表达可以降低MDA-MB-231细胞的增殖活性,减少细胞的克隆数量,抑制细胞的侵袭转移能力。As_2O_3联合PML沉默可以显著抑制细胞增殖。As_2O_3联合PML沉默组的细胞克隆数最少,细胞迁移数最少。结论沉默PML的GSK2118436作用表达可以降低三阴性乳腺癌细胞的增殖、侵袭迁移能力,As_2O_3可以增强PML对细胞增殖和侵袭迁移能力的抑制作用,可能作为乳腺癌新的治疗靶点,对三阴性乳腺癌具有潜在maladies auto-immunes的治疗价值。

[目的]探讨郭勇教授治疗肝癌的处方用药规律，传承名中医治疗肝癌的指导思想并推广应用。[方法]收集郭师治疗肝癌的处方，基于信息管理系统软件AZD6738使用方法建立数据库，统计药物使用频次，并对药物的药性、药味、归经等进行描述性分析。[结果]药性频率最高的是寒（34.46%），其次是温（29.94%）、平（27.12%），累计频率达91.52%；药味频率最高的是甘（37.09%），其次是苦（23.64%）、辛（17.45%），累计频率达78.18%；药物归经频率最高的是肝（19.61%）、其次Colforsin试剂是脾（15.50%）、肺（15.25%）、胃（14.29%），累计频率达64.65%。采用关联法则、复杂网络分析、聚类分析等数据挖掘方法，确定处方中各种药物的使用频次和药物之间的关联规则，前6位中药依次为：白芍、郁金、预知子、猫爪草、猫人参、太子参。从核心处方总结出，郭师治疗肝癌多用猫人参、猫爪草、郁金、预知子、白芍等药物。[结论]郭师治疗肝癌，重视辨病与辨证相结合，应用灵活，配伍严谨。数Hepatocelluar carcinoma据挖掘应用对于挖掘名老中医临床经验具有重要的价值。

目的：基于肝气虚理论和线粒体自噬探讨衰老机制，观察补肝散对衰老大鼠肝脏损伤的影响。方法：SPF级雄性SD大鼠32只，随机分为空白组、模型组、补肝散组、雷帕霉素组，每组8只。除空白组腹腔注射0.9%氯化钠溶液（10 mL/kg）外，其余各组均腹腔注射D-半乳糖溶液（D-gal,400 mg/kg），复制衰老大鼠模型。造模同时，补肝散组灌服补肝散煎液（14.06 g/kg），雷帕霉素组灌服雷帕霉素溶液（1 mg/kg），空白组和模型组灌服等量0.9%氯化钠溶液，连续56 d。测定各组大鼠体质量、抓力，血清丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）含量。HE染色观察各组大鼠肝组织病理学变化；RT-qPCR检selleck化学测线粒体融合蛋白（Mfn）1、Mfn2、自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、p62 mRNA表达水平；免疫组化染色（ABC法）检测Beclin1、p62蛋白表达；Western Blot测定Mfn1、Mfn2、LC3蛋白表达。结果：与空白组比较，模型组大鼠出现肝细胞水肿oncolytic Herpes Simplex Virus (oHSV)，肝血窦受挤压变窄，轻度脂肪变性及少量肝细胞坏死，另可见肝细胞嗜酸性病变及凋亡的肝细胞；体质量和抓力显著降低（E-616452 IC50P<0.05）；血清MDA含量升高（P<0.05）,SOD活性降低（P<0.05）,ALT、AST、ALP含量升高（P<0.05）；肝组织中Mfn1、Mfn2、p62 mRNA及蛋白表达水平升高（P<0.05）,Beclin1、LC3 mRNA及蛋白表达水平降低（P<0.05）。与模型组比较，补肝散组大鼠肝细胞水肿减轻，脂肪变性减少，嗜酸性病变及凋亡的肝细胞明显减少；体质量和抓力显著升高（P<0.05）；血清MDA含量降低（P<0.05）,SOD活性升高（P<0.05）,ALT、AST、ALP含量降低（P<0.05）；肝组织中Mfn1、Mfn2、p62mRNA及蛋白表达水平降低（P<0.05）,Beclin1、LC3 mRNA及蛋白表达水平升高（P<0.05）。结论：衰老大鼠肝脏损伤与线粒体自噬功能下降关系密切，可作为肝虚致衰的重要机制；补肝散可通过提高肝脏线粒体自噬水平，减缓衰老大鼠肝脏损伤程度。

【目的】为了筛选能抑制鼠类柠檬酸杆菌(Citrobacter rodentium)诱发的小鼠结肠炎的益生菌，并研究其干预机制。【方法】对4株筛选的菌株进行人工模拟胃肠液耐受试验，并体外测试它们对鼠类柠檬酸杆菌的抑制能力，最终筛选出粪肠球菌(Enterococcus faecalis) MG 2108。72只雄性7周龄ICR小鼠经过适应性饲养7 d后，被随机分为2组：正常对照组(MC组，24只，生理盐水)和炎症对照MK-4827小鼠组(IC组，48只，1×10~(10) CFU/mL灌胃鼠类柠檬酸杆菌)，7 d后各采12只小鼠，通过结肠组织HE染色和炎症因子检测实验，判断炎症模型建成。原MC组(剩下12只小鼠)更名为NC组selleck产品，用以区别建模前后的正常对照组，IC组随机分成3组：自然恢复组(IR组，12只，生理盐水)、环丙沙星组(CF组，12只，4 mg/mL环丙沙星)和粪肠球菌MG 2108组(EF组，12只，1×10~8 CFU/mL粪肠球菌MG 2108)。18 d后结束灌胃，所有小鼠麻醉后眼球取血，解剖。【结果】粪肠球菌MG 2108可以缓解和修复鼠类柠檬酸杆菌引发的小鼠结肠和肝脏损伤，并且通过降低炎症细胞因子的表达水平和增加紧密连接蛋白的表达水平，促进了结肠炎症组织的修复。它改变了肠道微生物菌群结构，EF组的肠杆菌属(Enterorhabdus)和阿克曼菌属(Akkeartificial bio synapsesrmansia)等有益菌群的丰度增加，同时短链脂肪酸也显著增加(P<0.05)，并且优于CF组和IR组。【结论】粪肠球菌MG2108是一株有利于肠道健康的益生菌，治疗鼠类柠檬酸杆菌诱导的小鼠结肠炎效果优于环丙沙星，自然恢复组效果明显差于EF组。

鳞状细胞癌是一类常见的恶性肿瘤,发生于皮肤、黏膜和附属器上,如有鳞状细胞覆盖的食管、口腔、皮肤、阴道和子宫颈等;也可见于没有鳞状上皮覆盖的膀胱、肾盂和支气管。我国食管鳞癌发病率较高,占据食管癌发病率的90%以上,且食管鳞状细胞癌在恶性肿瘤中有较高的致死率,然而导致恶性肿瘤发生发展的分子机制尚不完全清楚。OTUB2属于去泛素化酶家族OTU家族成员,通过去除底物的泛素化修饰,从而影响底物稳定性、功能、互作和定位,在细胞生命活动进程中发挥重要功能。已有研究发现OTUB2在乳腺癌和非小细胞肺癌中发挥促癌功能,而我们的研究发现OTUB2在食管鳞癌中发挥抑癌功能。本研究通过构建4NQO诱导Otub2全身敲除鼠的肿瘤发生模型,发现OTUB2缺失促进食管鳞癌和口腔鳞癌发生,且OTUB2在人源的食管鳞癌组织中表达缺失,预示OTUB2潜在的抑癌功能。为进一步研究OTUB2在人源恶性肿瘤中的作用,我们在正常上皮细胞中敲降OTUB2,并皮下移植到NPI鼠体内,结果显示OTUB2缺失显著促进肿瘤发生。接下来,体内外功能实验也验证OTUB2促进舌和食管鳞癌的发生和耐药;分子机制实验也证实启动子甲基化导致OTUB2在舌和食管鳞癌细胞系中表达缺失。随后,我们通过联合组学分析找到下游介导OTUB2抑癌功能的效应分子CALML3,并通过质谱分析找到OTUB2的特异性底物STAT1。通过分子机制研究发现,OTUB2去除STAT1泛素化修饰,而后促进STAT1磷酸化进而激活CALML3转录,并通过CALML3介导的线粒体钙离子通路进一步激活线粒体氧化磷酸化和甘油磷脂合成,尤其是磷脂酰丝氨酸(PS)合成。此外,我们构建了8例病人组织来源的小鼠肿瘤模型(PDX),用于研究磷脂酰丝氨酸对肿瘤发生和耐药的作用。实验结果显示,口服大豆来源的磷脂酰丝氨酸可以有效抑制OTUB2低表达的舌和食管鳞癌发生并促进化疗敏感性。妇科肿瘤是另一种致死率较高的恶性肿瘤,包括卵巢癌、子宫内膜癌、宫颈癌、阴道癌和外阴癌,其中卵巢癌和宫颈癌最为常见,且致死率较高。卵巢癌患者由于早期症状不明显导致早期诊断困难,以及晚期化疗耐药导致患者预后差,使得卵巢癌成为患有妇科恶性肿瘤病人死亡的主要原因,严重危害到我国女性的生命健康,揭示卵巢癌发生和耐药的分子机制有利于寻找潜在治疗靶点,从而降低卵巢癌的发生率,并改善患者预后差的问题。近年来,表观遗传学调控成为继基因突变后,揭示肿瘤发生机制的热点方向;去泛素化酶通过调控特异性底物的翻译后修饰,在恶性肿瘤中发挥重要功能。因此,研究去泛素化酶的表观遗传学调控,可从转录和翻译后两个层面,揭示卵巢癌发生和获得耐药过程中的异常调控。本研究中,我们使用5-aza处理卵巢癌细胞系,并通过RT-qPCR检测45个去泛素化酶甲基化程度的改变,发现OTUB2在卵巢癌中甲基化程度较高,且OTUB2在卵巢癌细胞系中表达普遍较低,暗示启动子甲基化导致OTUB2在卵巢癌中表达缺失。通过构建DMBA诱导Otub2全身敲除鼠的肿瘤发生模型,我们发现,OTUB2缺失促进小鼠卵巢癌发生,暗示OTUB2在卵巢癌中发挥抑癌功能。经过研究,我们发现OTUB2启动子甲基化导致OTUB2在卵巢癌中低表达,且OTUB2表达缺失与卵巢癌病人预后差相关。通过体内外功能实验研究发现,OTUB2缺失促进卵巢癌发生和获得性耐药。机制上,我们通过联合组学分析,找到OTUB2在卵巢癌中的特异性底物SNX29P2,并通过研究发现OTUB2通过去除SNX29P2泛素化修饰促进SNX29P2蛋白稳定性,SNX29P2通过激活PIK3IP1转录发挥抑癌功能;同时我们通过质谱分析找到与SNX29P2以及OTUB结合的加帽酶——HCE,又名RNGTT,并通过研究发现,HCE通过加帽促进PIK3IP1的mRNA稳定性。综上所述,在食管鳞癌中,本研究发现OTUB2-STAT1-CALML3-PS调控轴在食管鳞状细胞癌中发挥着关键的抑癌功能,同时揭示西方国家鳞状细胞癌发生率较低可能与高脂饮食方式有关,且日常食用富含磷脂酰丝氨酸的食物(大豆、www.selleck.cn/products/jnj-42756493-erdafitinib动物大脑等)或可endocrine immune-related adverse events有效预防口腔和食管鳞癌发生;在卵巢癌中,本研究通过体内外实验揭示,OTUB2/SNX29P2/HCE作为一个复合体,通过促进PIK3IP1转录和mRNA稳E7080使用方法定性,从而在转录水平促进PIK3IP1表达,进而抑制下游PI3K/Akt通路活性,来发挥抑制卵巢癌发生和获得性耐药的作用,本研究为卵巢癌治疗提供新的潜在治疗靶点。

鸽血是肉鸽屠宰加工过程中的主要副产物之一,含有大量蛋白质,却一直未被有效利用。大量的血液被排放于环境中,不仅会造成环境的污染,还会浪费大量的蛋白资源。本试验以鸽血为原料,通过冷冻离心分离血浆和血红蛋白。采用酶解技术,通过单因素及响应面试验,对鸽血浆抗氧化肽的酶法制备工艺进行了优选研究;通过传统酶解与计算机模拟酶解相结合的方法制备鸽血红蛋白抗氧化肽。通过超滤的方法进行分离纯化,对体外抗氧化能力强的组分进行结构鉴定。通过生物信息学工具(In silico tools)进行虚拟筛选。主要研究结果如下:(1)响应面法优化酶解法制备鸽血浆抗氧化肽以鸽血血浆为原材料,选用碱性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和蛋白酶K四种蛋白酶,分别在其最佳条件下对鸽血血浆进行酶解,采用邻苯二甲醛法(O-phthaldialdehyde,OPA)测定水解度(Degree of hydrolysis,DH),通过还原力来评价抗氧化活性,以选取最优的蛋白酶。分析酶解时间、p H、酶添加量及酶解温度对酶解产物水解度和还原力的影响,基于单因素试验设计响应面试验,探究鸽血浆抗氧化肽酶法制备的最优工艺。结果表明,选择碱性蛋白酶,鸽血浆浓度为1 g/100m L,酶添加量为6224 U/g,时间为点击此处3 h,CCRG 81045试剂p H 8,温度为55℃。以此条件制备鸽血浆抗氧化肽的还原力为0.140±0.023 A,与预测值相差较小,故而此条件为制备鸽血浆抗氧化肽的最优工艺。(2)计算机模拟酶解优化鸽血红蛋白抗氧化肽酶法制备以鸽血红蛋白为原材料,采用在线数据库Ex PASy Peptide Cutter中的蛋白酶模拟酶解,通过生物信息学工具筛选多肽潜在的生物活性、溶解性、毒性和致敏性,由此预测最适宜的制备鸽血红蛋白源抗氧化肽的酶。通过设置不同的酶解时间、酶添加量和酶解温度为单因素,探究不同酶解条件对酶解产物水解度和DPPH自由基清除率的影响。基于单因素试验,通过响应面试验探究酶解法制备鸽血红蛋白抗氧化肽的最优工艺条件。结果表明,蛋白酶K是最优的蛋白酶,最佳的酶解法制备鸽血红蛋白抗氧化肽的条件是:鸽血红蛋白浓度为1 g/100 m L、p H 8、时间为3 h、酶添加量为415.54U/g、温度为65℃。选用此条件通过验证试验得heme d1 biosynthesis出响应值DPPH自由基清除率为33.21%±0.68%,与预测值相差不大,故而此条件为最优工艺。采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳试验(Sodium laurylsulfonate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE),对比最优工艺条件下鸽血红蛋白酶解前后的情况,进一步验证该方法为酶解鸽血红蛋白源抗氧化肽的最优工艺。(3)鸽血抗氧化肽的分离纯化及结构鉴定采用超滤法分别对鸽血浆酶解液和鸽血红蛋白酶解液进行分离纯化,以DPPH自由基、ABTS自由基、超氧阴离子和羟自由基清除能力为指标,考察不同超滤组分的体外抗氧化活性。分别选取鸽血浆、血红蛋白酶解液体外抗氧化活性最强的组分,通过液相色谱-质谱联用技术(Liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)对结构进行鉴定。采用生物信息学工具,预测多肽潜在的生物活性、溶解性、致敏性,以及吸收、分布、代谢、排泄和毒性(Absorption,distribution,metabolism,excretion,toxicity,ADMET)性质,通过分子对接研究鸽血抗氧化肽的作用机制。结果表明:分子量(Molecular weight,Mw)小于1 k Da的组分体外抗氧化活性较强,发现多肽IDGPRFPF和TRPDLPVGF为新的生物活性肽,具有良好的生物活性、水溶性,非致敏原且ADMET性质良好,有改善抗氧化防御系统的潜在能力。

目的 探讨叉头盒蛋白M1(FOXM1)对人宫颈癌细胞株Hela/DDP顺铂化疗敏感性的作用。方法 将含有正义FOXM1互补的脱氧核糖核酸(cDNA)的真核表达载体、空质粒的真核表达载体采用脂质体转染法转染至人宫颈癌细胞株Hela/DDP,分别记为过表达组、过表达对照组；另构建干扰FOXM1基因表达的重组载体、空载载体，利用脂质体介导将其转染至人宫颈癌细胞株Hela/DDP,分别记为沉默组、沉默对照组；并设置空白组、抑制剂组。上述每组5个复孔，均加入顺铂，抑制剂组另加入硫链丝菌肽，培VX-765小鼠养48 h。实时逆转录荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测各组FOXM1信使核糖核酸(mRNA)及蛋白表达；倒置显微镜观察细胞形态学改变；噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖抑制率；流式细胞仪双染法检测各组细胞凋亡率；RT-qEmpagliflozin说明书PCR、Western Blot检测各组细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)、细胞分裂周期因子25B(CDC25B)、存活蛋白(Survivin)、p21 mRNA及蛋白表达。结果 与空白组比较，沉默组和抑制剂组FOXM1、Cyclin B1、CDC25B、Survivin mRNA及蛋白表达均下降(P<0.05),过表达组上述指标均升高(P<0.05);与空白组比较，沉默组和抑制剂组增殖抑制率、凋亡率、p21 mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05),过表达组上述指标均下降(P<0.05);空白组、沉默对照组、过表达对照组细胞连接紧密、形态均匀、轮廓清楚，过表达组细胞连接致密，沉默组和抑制剂组细胞减少，轮廓不清、形态不均、大小HIV-related medical mistrust and PrEP不一，且可见细胞皱缩及细胞碎片。结论 FOXM1表达下调可增加人宫颈癌细胞株Hela/DDP顺铂化疗敏感性，FOXM1表达上调则可降低其化疗敏感性，推测与正反馈调节Cyclin B1、CDC25B、Survivin表达，负反馈调节p21表达有关。

胆管癌（CCA）是起源于胆道系统的恶性肿瘤，虽然手术治疗是CCA公认的根治手段，但由于胆道系统的特殊解剖特点HPV infection及CCA的高侵袭性使得治疗效果并不理想。药Belnacasan化学结构物治疗成为晚期CCA患者获得较好预后的选择，主要分为化学治疗、靶向治疗及免疫治疗。目前研究发现了成纤维细胞生长因子受体（FGFR）及异柠檬酸脱氢酶1 (IDH-1)两个重要的治疗靶点，由此衍生出的靶向治疗药物在临床试验中普遍展现了良好的效果。虽然CCA普遍表达PD-1/PD-L1，但对于免疫检查点抑制剂不敏感，通过联合使用其他免疫治疗药物可以提高治疗效果。与新兴的靶向治疗和免疫治疗相比，传https://www.selleck.cn/products/jq1.html统化学治疗在CCA治疗效果最为稳定，美国国立综合癌症网络指南建议顺铂+吉西他滨为晚期不可切除或有转移症状的CCA患者的一线化疗方案。这些药物的最新进展将会显著改善CCA患者的生存获益。

近年来,可见光诱导的光反应是将光能转化为化学能的热门研究领域之一,而可见光诱导的C-H键选择性官能化反应,避免了反应底物的预活化,直接实现化合物的官能化,从而减少了废弃物的排放,并且提高了原子经济性。由于用到了可见光这一清洁能源,因此,比传统的过渡金属催化的C-H键官能化反应更加符合绿色化学和可持续发展的理念。本论文主要基于可见光诱导的C-H键官能化的最新研究进展,并围绕可见光诱导的3-酯基-2-氧化吲哚的氧化羟基化和醚类氧α-位C(sp~3)-H选择性官能化开展研究工作,具体研究内容如下:(1)由简单的底物出发,设计并合成了一系列3-酯基-2-氧化MLN8237半抑制浓度吲哚衍生物,在光催化的条件下成功实现了3-酯基-2-氧化吲哚的3-位C(sp~3)-H选择性官能化,以高达89%的收率构建了3-羟基-3-酯基-2-氧化吲哚衍生物。在以空气作为氧源时,反应的效率不受影响CB-839体外。此外,3-苯基-2-氧化吲哚也同样兼容于优化的光反应条件,在不添加碱和化学计量的氧化剂的情况下,反应还可以成功扩展到对氮上保护基分别为烯丙基和H的3-酯基-2-氧化吲哚衍生物的氧化羟基化。另外,将反应放大到克级规模后,该策略依然具有较高的反应效率。最后,基于之前可见光诱导吲哚衍生物的合成相关研究工作,提出了可能的反应机理。(2)可见光诱导的光反应和过渡金属催化相结合的相关研究,逐渐受到国内外科研工作者的广泛关注。在此大背景下,以重氮酸酯衍生物作为底物出发,通过可见光催化和过渡金属铜催化相结合,成功实现了分子间醚类化合物氧α-位和重氮化合物的C(sp~3)-H选择性官能化。该策略反应条件温和,收率中等,光催化剂和铜催化剂缺一不可,对大部分重氮酸酯都能很Heparin Biosynthesis好的兼容,除了四氢呋喃氧α-位可以很好的适用于优化的反应条件外,1,4-二氧六环也能够以40%的收率得到官能化的目标化合物。