RAF信号通路

为了解决屠宰场废弃血液造成的环境污染及其有效利用问题PUN30119，取样自日喀则地区屠宰场的废弃血液堆积土壤，梯度稀释涂布于血琼脂平板上进行分离，挑选有较大溶血环的菌落纯化，继而保藏菌种。对保藏菌株进行形态学、生理生化、16S rRNA基因序列鉴定并进行药敏试验、菌株生长条件的探究。用福林酚法测定保藏菌株的蛋白酶活力，初步优化血液培养基条件，提升保藏菌株血液降解效率。结果表明，得到了一株高效降解血液蛋白的菌株，编号为NWMCC0047,经过形态学鉴定folding intermediate、生理生化鉴定和16S rRNA基因序购买BYL719列鉴定，表明该菌株为乙酰微小杆菌(Exiguobacterium acetylicum)。其蛋白酶活力可达19.00 U/mL。最适生长条件：碳源为葡萄糖、氮源为牛肉膏、无机盐为磷酸氢二钠、pH值为7、温度为20℃。通过菌株对牛血液蛋白降解条件的初步优化，当血液添加量为10%(体积分数)、麦麸添加20 g/L、不添加无机盐、37℃培养85 h时，其降解率可达21.97%。实验为降解废弃血污提供了简单可参考的操作方法且为生产氨基酸肥料提供候选菌株。

采用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶分别水解玉米醇溶蛋白，对其水解产物进行抗氧化、抗菌及乳化活性分析。针对具有较好双抗活性及乳化性能的PS-341小鼠木瓜蛋白酶水解组分，进一步采用?KTAselleck MLN4924蛋白纯化系统及反相高效液相色谱分离得到纯化组分。通过基质辅助激光解析电离四极杆飞行时间质谱对纯化所得肽进行氨基酸序列分析，得出其氨基酸序列为LLAH。玉米醇溶蛋白水解所得LLAH和化学合成LLAH表现出相当的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、2,2’-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2’-azinobis-(3-ethylbenzothimedical equipmentazoline-6-sulphonic acid),ABTS）阳离子自由基清除活性以及铁离子还原能力和乳化能力。两种LLAH均能抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和单核细胞增生李斯特菌的生长。LLAH稳定的乳液平均粒径为（263.4±3.5）nm，低于吐温-80稳定的乳液平均粒径（（286.8±3.5）nm），前者的贮藏稳定性和氧化稳定性均高于吐温-80稳定的乳液，且对上述4种受试菌株均表现出抑菌效果。LLAH的抗菌和抗氧化活性对其稳定乳液的稳定性具有积极贡献。研究结果对于开发新型玉米醇溶蛋白肽基功能性食品配料具有一定的参考价值。

目的 了解引起大连市本土新型冠状病毒肺炎（COVID-19）的新型冠状病毒（SARS-CoV-2）流行株的基因组特征和变异情况，追溯SARS-CoV-2来源。方法 选取2022年8月20日—9月14日97例由境外输入引起的COVID-19关联病例的样本。采用SARS-CoV-2全基因组靶向扩增结合高通量测序技术（Ion Torrent测序平台）进行全基因组测序。分析SARS-CoV-2的基因组特征、核苷酸和氨基酸突变位点和基因分型。构建进化树，结合病例的流行病学资料，溯源SARS-CoV-2流行株。结果 共获得97例SARS-CoV-2全基因组序列，基因组全长29 735～29 741 bp，平均测序深度1 457×～50 485×，测序覆盖率范围95.9%～100.0%。同NCBI数据库中的SARS-CoV-2参考基因组（NC＿045512）序列相比，9selleck HPLC7例SARS-CoV-2全基因组序列共享75个核苷酸突变位点，22例在此基础上新增1～3个突变位点。75个共享突变位点类型包括：BMS-3548254个非编码区和7个基因编码区，其中基因编码区的70个突变位点，来自基因ORF1ab、S、ORF3a、E、M、ORF8、N。共享的氨基酸突变类型包括15个同义突变和51个非同义突变。97例SARS-CoV-2全基因组序列，Pangolin分型为BA.5.2.1.21 (BF.21进化分支)型，Nextstrain分型为22B型，GISAID分型为GRA型。经与大连SARS-CoV-2基因库的序列比对，与8月9日境外输入的编号20220809-1和20220809-2病例共享75个核苷酸突变位点，高度同源。进化分析结果显示，此次SARS-CoV-2流行株与同时期日本大阪SARS-CoV-2流行株共同处于BF.21进化分支上，与病例20220809-1和20220809-2流行Strategic feeding of probiotic病学调查中的来源国日本一致。结论 此次SARS-CoV-2流行株属于Omicron变异株（BF.21进化分支），来源于日本。

目的 以玉竹为例探讨含多糖成分中药网络药理学的研究方法。方法 采用TCMSP(https：//old.tcmsp-e.com/tcmsp.php)、Batman-TCM(http：//bionet.ncpEnasidenibsb.org.cn/batman-tcm)等数据库搜索玉竹活性成分，以OB(oral bioavailability,OB)≥30%、DL(drug likeness,DL)≥0.18为筛选阈值，构建“玉竹”成分库；在此基础上，加入玉竹多糖与肠道菌群作用的产物“短链脂肪酸”（short chain fatty acids,SCFAs），构建“玉竹+SCFAs”成分库。收集“玉竹”“玉竹+SCFAs”两成分库中的成分的对应靶点，建立成分靶点库。以“糖尿病”（diabetes）为主治病症，建立疾病靶点库。然后分别取“玉竹”成分靶点“、玉竹+SCFAs”成分靶点与疾病靶点的交集，再对两交集靶点进行PPI(protein protein interaction,PPI)、GO(gene ontolotick borne infections in pregnancygy,GO)、KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析，并比较两者的异同。以高糖高脂饮食诱导，腹腔注射链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型，造模成功后灌胃给予玉竹多糖，采用qRT-PCR方法检测肾组织中CTNNB1、RAP1B的表达。结果 “玉竹”成分库共有9个成分，在此基础上增加乙酸、丙酸、丁酸，得到“玉竹+SCFAs”成分库；“玉竹+SCFAs”成分靶点与糖尿病靶点的交集靶点为113个，而“玉竹”成分靶点与糖尿病靶点的交集靶点为94个。PPI分析显示，与“玉竹”比较，“玉竹+SCFAs”不仅增加了Sselleckchem TamoxifenRC、AKT1、PIK3CA等Hub蛋白的度值；同时，排名前10的Hub蛋白还增加了CTNNB1。GO分析显示，“玉竹+SCFAs”治疗糖尿病的细胞定位主要涉及细胞膜、细胞外，而“玉竹”的细胞定位主要涉及细胞膜、细胞核。KEGG分析显示，与“玉竹”比较，“玉竹+SCFAs”归属于RAP1信号通路的靶点数增加，同时P值减小。实验验证结果显示，与模型组比较，玉竹多糖可显著降低CTNNB1及RAP1B的表达。结论 该研究建立的网络药理学不仅关注小分子成分，同时关注大分子成分，研究结果为含有多糖中药的网络药理学研究提供了新视角。

试验旨在研究蜘蛛源碱性金属蛋白酶对妊娠母猪繁殖性能和保育仔猪生长性能的影响，分别在妊娠母猪和保育仔猪基础日粮中添加100 g/t和200 g/t的蜘蛛源碱性金属蛋白酶，对其性能进行统计与分析。结果显示：在妊娠母猪日粮中添加100 g/t的蜘蛛源碱性金属蛋白酶，母猪分娩后初生仔猪的弱仔数减少36.96%，且差异显著（P<0.05），同时死胎数和仔猪死亡数均减少，试验组母猪产程缩短11.33 min，妊娠天数缩短0.95 d，说明蜘蛛源碱性金属蛋白酶可提高妊娠母猪的繁殖性能；在保育仔猪日粮中添加200 g/t的蜘蛛源碱性金属蛋白酶，仔猪增重提高3.11%，且差异显著（P<0.05），平均日采食量提高9.23%，料重比显著提高5.71%，说明蜘蛛源碱性金属蛋白酶可改善保育仔猪的食欲，但料重比并未改善；其次，哺乳仔猪腹泻率降低44.30%，死淘率降低70.52%，且差异显著（P<0.05），保育仔猪腹泻率、死淘率也有PF-07321332分子式所下降，说明蜘蛛源碱性金属蛋白酶对仔猪腹泻情况和健康状况具有一定改善作用。由此表明，在日粮中添加适量的蜘蛛源碱性金属蛋白酶对妊娠母猪繁殖性能和保育仔猪的健康状况具有明显的改善作用，但对保育仔猪生长性能的积non-alcoholic steatohepatitis (NASH)极影响还有待selleck探索。

目的 探讨肝胆特异性MRselleck化学I增强联合CT门静脉成像预测肝静脉压力梯度（HVPG）的临床价值。方法 回顾性收集行腹部增强CT及肝胆特异性MRI增强检查并在检查1周内完成HPVG测量的36例患者。测量得到门静脉、脾静脉管径、肝脾体积及其比值、肝胆期相对寻找更多强化程度（RE）值等参数，并与HVPG行Pearson相关性分析；所有患者按照HPVG> 12 mm Hg及HVPG≤12 mmHg分成易出血及不易出血两组，比较两组各参数差异，采用ROC曲线分析各参数的临床价值。结果 延迟10 min RE10 min及延迟20 min RE20 min与HVPG呈中度负相关（均P <0.05）；门静脉管径及脾脏体积与HVPG呈中度正相关（均P<0.05）；肝脏体积/脾脏体积与HVPG呈高度负相关（均P <0.05）；肝脏体积、脾静脉管径与HVPG无相关性（均P> 0.05）。易出血及不易出血组脾脏体积、肝脏体积/脾脏体积、门静脉、RE10 min及RE20 min差异均有统计学意义（均P <0.05）。脾体积、肝脏体积/脾脏体积、门静脉管径、RE10 min及RE20 min、联合诊断模型（RE20min与肝脏体积/脾脏体积）预测易出血（HVPG> 12 mmHg）的AUC值分别为0.826、0.7Biocontrol of soil-borne pathogen91、0.848、0.759、0.721及0.880。结论 肝胆特异性增强MRI联合CTPV可间接预测门静脉压力，且RE20 min与肝脏/脾脏体积联合诊断模型可有效预测食管胃静脉曲张破裂出血，因此，在门静脉高压的无创诊断中有一定价值。

目的 探讨多模态磁核共振成像(MRI)联合超声显微手术治疗脑胶质瘤的临床效果及安全性。方法 选取收治的脑胶质瘤患者68例，按随机数字表法分为对照组(34例)与观察组(34例)。对照组予以超声显微手术治疗，观察组加用多模态MRBiocontrol of soil-borne pathogenI,术后随访1年。比较两组手术切除范围、血清肿瘤标志物[糖类抗LGK-974原153(CA153)、CA125及癌胚抗原(CEA)]、神经肽水平[精氨酸升压素(AVP)、β-内啡肽(β-EP)]、神经功能[神经功能缺损评分(NIHSS)]、日常生活能力(ADL)、生存质量[卡氏评分(KPS)]及并发症。结果 观察组与对照组相比全切除率较高，术后CA153[(28.63±3.14)U/mL]、CA125[(30.26±3.25)U/mL]、CEA水平[(4.53±0.78)U/mL]低于对照组，有统计学差异(P<0.05);观察组术后AVP[(15.23±2.14)ng/L]、β-EP水平[(80.14±6.85)ng/L]高于对照组，有统计Vorinostat浓度学差异(P<0.05);观察组术后NIHSS评分[(9.12±1.15)分]低于对照组，ADL评分[(79.86±7.42)分]、KPS评分[(82.69±7.53)分]高于对照组，并发症发生率较对照组低，有统计学差异(P<0.05)。结论 多模态MRI联合超声显微手术可提高脑胶质瘤患者全切除率，加快血清肿瘤标志物复常，减轻神经功能损害，改善日常活动能力，提高生存质量，且并发症少。

目的 对比肺段切除术与肺叶切除术治疗直径<2 cm的浸润性肺癌Mycobacterium infection的效果。方法 选择2016年2月至2020年2月在无锡市人民医院就诊的直径<2GSK1349572使用方法 cm的浸润性肺癌(n=100)患者纳入研究，随机分为两组(观察组和对照组)。对照组(n=50)接受胸腔镜下肺叶切除术治疗，观察组(n=50)接受胸腔镜下肺段切除术治疗。观察两组患者的总有效率、手术效果、并发症发生情况、远期生存率；比较术前、术后患者的用力肺活量(FVC)和第1秒用力呼气容积(FEV_1)。结果 与对照组的总有效率72.00%相比，观察组的总有效率为94.00%,组间差异有统计学意义(PDibutyryl-cAMP试剂<0.05)。两组拔管天数、24 h引流量差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比，观察组手术时间短，术中出血量少，住院时间短(P<0.05)。术后，两组FVC、FEV_1均降低，观察组FVC、FEV_1高于对照组(P<0.05)。与对照组相比，观察组并发症发生率低(P<0.05)。两组复发率相比，差异无统计学意义(P>0.05)。结论 胸腔镜下肺段切除术治疗直径<2 cm浸润性肺癌疗效确切，该术式能缩短手术时间，术中出血量少，恢复速度快，远期肺功能保存更多，且与肺叶切除术相比，肺段切除术术后并发症少，且不增加复发风险，特别适用于对肺叶切除术不耐受合并基础疾病的高龄患者。

目的 探讨ADAM17促进奥利沙铂（Oxaliplatin，L-OHP）耐药结肠癌细胞对NK细胞杀伤敏感的作用机制。方法免疫组化检测ADAM17在结肠癌组织及癌旁正常组织中的表达；qRT-PCR与蛋白质印迹技术检测ADAM17在L-OHP耐药组织及细胞中的表达；MTT法检测HCNSC125066核磁T116细胞与HCT116/L-OHP细胞的L-OHP药物敏感性；qRT-PCR与蛋白质印迹技术检测HCT116细胞与HCT116/L-OHP细胞中解整合素金属蛋白酶17(adisintegrinandmetalloproteinase17，Acancer epigeneticsDAM17)的表达。小干扰RNA内源性敲低HCT116/L-OHP细胞中的ADAM17、主要组织相容www.selleck.cn/products/q-vd-oph性复合体Ⅰ类链相关分子A(MHCclassⅠchain-relatedmoleculeA，MICA）与主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关分子B(MHCclassⅠchain-relatedmoleculeB，MICB），qRT-PCR与蛋白质印迹技术检测ADAM17、MICA与MICB的表达，流式细胞数检测MICA与MICB的表达，乳酸脱氢酶释放法检测NK92细胞对HCT116/L-OHP细胞的杀伤活性。结果 ADAM17在结肠癌组织、L-OHP耐药患者组织及细胞中高表达。与HCT116细胞相比，L-OHP处理可增加HCT116/L-OHP细胞的IC_(50)（P<0.05），促进ADAM17的表达（P<0.05）。与si-NC组相比，si-ADAM17组HCT116/L-OHP细胞ADAM17表达降低，MICA与MICB表达升高，NK92细胞的杀伤率升高。与si-ADAM7组相比，si-ADAM7+si-MICA组MICA表达降低（P<0.05），si-ADAM7+si-MICB组MICB表达降低（P<0.05），NK92细胞的杀伤率均减弱（P<0.05）。结果 下调ADAM17促进MICA与MICB 表达，进而增强NK92细胞对HCT116/L-OHP细胞的杀伤活性。

目的探讨肿瘤坏死因子-α诱导蛋白3(A20)及受体作用蛋白(RIP)沉默增加肝癌细胞HepG2对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)敏感性的分子机制。方法合成针对A20基因和RIP基因的特异性小干扰RNA(siRNA)并转染至肝癌细胞HepG2中,应用酸性磷酸酶(AP)法检测A20-siRNA或RIP-siRNA联合TRAIL对肝癌细胞HepG2生长的抑制作用以及Western blot检测对半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-8蛋白表达的影响。结果成功合成A20-siRNA和RIP-siRNA并转染入HepG2细胞中。A20-siRNA与selleck抑制剂TRAIL联合处理HepG2细胞可活化RIP、Caspase-8和Caspase-3,诱导细胞凋亡。RIP-siRNA联合TRAIL可以明显抑制HepG2细胞的增殖(P<0.05)。另外RIP-siRNA联合TRAIL作用HepG2后可活化Caspase-8。结论 A20和RIP的表达是narcissistic pathology肝癌细胞对TRAIL耐受的主要原因,A20-siRNA或RLY2835219 IC50IP-siRNA可以有效抑制肝癌HepG2细胞A20及RIP基因的表达,并增加TRAIL对肝癌HepG2细胞凋亡的诱导作用;其机制是通过”A20-RIP-Caspase-8″反应链序列调控活化下游Caspase-8,活化诱导的死亡受体传导通路来实现的。