RAF信号通路

目的：探究小剂量阿司匹林联合低分子肝素钙治疗早发型子痫前期(PE)对患者子宫动脉血流、脂代谢、凝血功能及妊娠结局的影响。方法：选取2021年1月-2022年1月本院确诊治疗的早发型PE患者110例，随机数字表法分为联合组(n=55)和对照组(n=55),均予常规治疗并加予小剂量阿司匹林，治疗组加用低分子肝素钙注射，治疗7d,比较两组子宫血供[子宫动脉阻力指数(RI)、搏动指数(PI)]情况，血清妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)、血清胎盘生长因子(PLGF)水平，脂代谢指标[血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、载脂蛋白AI(ApoAI)、载脂蛋白B(ApoB)]及凝血功能[凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、D-二聚体(DD)、纤维蛋白原(FIB)],随访妊娠结局，统计治疗期间不良反应。结果：治疗后两组RI和PI均较治疗前降低且联合组(0.47±0.06、0.72±0.17)低于对照组(0.51±0.07、0.81±0.15),两组血清PAPP-A、PLGF均较治疗前升高且联合组(47.29±12.37 ng/ml、25.67±8.46μg/L)高于对照组(41.73±14.57 ng/ml、22.45±VX-661小鼠8.17μg/L),两组TC、TG、ApoB均较治疗前降低，ApoAI较治疗前升高，两组血清PT、APTTpopulation precision medicine均较治疗前升高，DD、FIB降低，且联合组变化幅度大于对照组(均P<0.05);联合组终止妊娠时孕周(36.27±1.72周)、Apgar评分(8.32±0.87分)均高于对照组(35.61±1.24周、7.86±0.79分),胎儿宫内窘迫率(5.5%)、胎盘早剥率(3.6%)均小于对照组(18.2%、14.6%)(均P<0.05),两组羊水过少率、产后出血率及总不良反应无差异(P>0.05)。selleck化学结论：小剂量阿司匹林联合低分子肝素钙治疗早发型PE患者，可更好地改善患者子宫动脉血流动力学及脂代谢和凝血功能紊乱，妊娠结局获益更好。

目的:探讨破骨细胞对休眠肺腺癌(lung adenocarcinomanative immune response, LUAD)细胞H1975的激活作用及其潜在的分子机制。方法:用血清剥夺的方式建立肺腺癌细胞的休眠模型，检测休眠肺腺癌细胞的增殖与凋亡，以及衰老(β-半乳糖苷酶)和休眠相关标志物的蛋白表达；分离培养人外周血单个核细胞，用M-CSF和h-RANKL因子诱导人外周血单个核细胞分化为成熟的破骨细胞，TARP染色鉴定破骨细胞，收集破骨细胞的培养上清；破骨细胞培养上清与休眠肺腺癌细胞共培养，流式细胞术检测肺腺癌细胞周期、增殖情况，Transwell小室检测细胞迁移能力，Western blot检测休眠相关以及AMPK信号通路相关蛋白的BMN 673 IC50表达。结果:体外血清剥夺可以诱导肺腺癌细胞系H1975进入休眠状态，其细胞周期停滞在G_0-G_1期，增殖停滞，休眠相关标志物Nanog、NR2F1、p27、p21表达上调；建立体外人外周血单个核细胞诱导分化的破骨细胞培养体系；破骨细胞的培养上清具有促进休眠肺腺癌细胞周期恢复、细胞增殖以及细胞迁移的作用；GSK1349572核磁同时，休眠相关蛋白表达的下调，其作用与AMPK信号通路的AMPK去磷酸化和mTOR磷酸化有关。结论:破骨细胞具有促进休眠肺腺癌细胞激活的作用，其分子机制与AMPK信号通路有关。

背景寻找良性前列腺增生(BPH)发生的影响因素有助于对BPH进行早期预防。目的 探讨中老年男性体检人群临床指标与前列腺体积的相关性，寻找BPH发生的关联因素。方法 回顾性分析2021年6月-2023年6月某三甲医院体检中心行健康检查的中老年男性，以前列腺总体积(TPV)为分组标准，TPV>25 cm3为BPH组(3 972例)，TPV≤25cm3为健康对照组(2 760例)，采用Spearman相关性分析和多因素Logistic回归分析TPV相关的因素。结果 6 7PI3K/Akt/mTOR抑制剂32例45～89岁中老年男性，与健康对照组相比，BPH组年龄[Md[(IQRMicroarrays):56(51, 60)vs53(49, 58), P<0.001]、体质量指数(BMI)[Md[(IQR):26.41(24.64,28.36) vs 25.76(24.06,27.80),P<0.001]、空腹胰岛素(INS)[Md[(IQR):10.67(7.27,15.53) vs10.25(6.90,14.93),P=0.005]、总前列腺特异性抗原(tPSA)[Md[(IQR):1.01(0.66,1.63) vs 0.75(0.51,1.10),P<0.001]较高，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)[Md PR-171说明书[(IQR):1.18(1.00,1.37) vs 1.19(1.01,1.40),P=0.004]、fPSA/tPSA [Md [(IQR):0.31(0.23,0.41) vs0.32 (0.24,0.42),P=0.016]较低。相关性分析显示TPV与年龄(r=0.24,P<0.001)、t PSA(r=0.33,P<0.001)、fPSA(r=0.36,P<0.001)均成显著正相关。多因素Logistic回归分析结果显示，随着年龄(OR=1.051,95%CI:1.042～1.060, P<0.001)、BMI(OR=1.095,95%CI:1.076～1.116, P<0.001)及tPSA(OR=1.775,95%CI:1.647～1.913,P<0.001)的增长或升高，BPH的发病风险增高，但高HDL-C男性发生BPH的概率较低(OR=0.790,95%CI:0.665～0.945,P=0.009)。结论 t PSA及年龄、BMI和HDL-C与前列腺增生发生有关。

第一部分兔膝关节置换模型中ES-PMMA骨水泥对炎性因子表达水平的作用聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥(Polymethylmethacrylate,PMMA)是一种常用且十分重要的植入性耗材,已广泛应用于临床各类骨科手术,它由固体粉剂和液体组成,使用时再将两者混合。其在固化前有一定程度的可塑性和黏性,可填充在复杂的手术部位,固化后起到支撑和黏合作用,并承受一定载荷。骨水泥操作简便,固定可靠且不易松动,常用来治疗骨质疏松造成的椎体压缩骨折和关节置换术中的假体固定。研究表明,在人工膝关节置换术中,骨水泥植入后易产生血压下降、心率增快及氧分压降低等一系列症状,引发骨水泥植入综合征(bone cement implantation syndrome,BCIS)。生理状态下,细胞当中的抗炎因子和促炎因子处于平衡状态,但当存在手术等创伤刺激后,特别是关节置换等骨科大手术,则会诱导环氧化酶-2(COX-2)表达和前列腺素释放,并激活前列腺素受体。前列腺素能增加炎症细胞中环磷酸腺苷的浓度,从而增加促炎性因子如:白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)等分泌,抑制抗炎因子白细胞介素-10(IL-10)的合成,引发炎性反应。此外,白细胞介素-17(IL-17)主要由辅助性T细胞(Th17)分泌,也是机体重要的促炎性细胞因子,而IL-10主要由调节性T细胞(Treg)分泌,是机体重要的抗炎细胞因子,二者共同调控机体免疫反应和炎症反应的平衡。课题组前期的研究表明,依诺肝素钠-聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥(以下简称ES-PMMA骨水泥),作为一种改进的新型材料,在实验室中,将依诺肝素钠粉剂与骨水泥固态粉剂人工混合后,可较好地保持原有骨水泥的强度和刚度。同时,依诺肝素钠能够从骨水泥中有效释放出来,并发挥其应有的药物活性。众所周知,在临床上低分子肝素应用于血栓性疾病和体外抗凝治疗已有近百年的历史。然而,肝素具Medical organization有多效性,可参与调节免疫应答和炎性反应,其中的分子机制及药理学作用引起了学者们的广泛关注,而依诺肝素钠作为低分子肝素的一种也应有相同的药效。本次实验我们利用ES-PMMA骨水泥良好的释放特性,探索依诺肝素钠在兔膝关节置换模型中对炎性因子表达水平的作用。目的:通过利用ES-PMMA骨水泥良好的释放特性,探讨其在膝关节置换动物模型中对局部炎性因子的作用。方法:选取新西兰兔建立膝关节置换模型,共40只,随机分为四组:传统PMMA骨水泥组、ES-PMMA骨水泥组、假手术组及空白对照组,每组10只。在手术植入相应骨水泥后的第30、60、90分钟,传统PMMA骨水泥组、ES-PMMA骨水泥组取切口内黏有骨水泥的局部组织,假手术组和空白对照组取相同部位组织。应用免疫组化病理学方法,检测术区局部组织中炎性因子IL-17A、IL-6、IL-1β和TNF-α的表达情况。结果:免疫组化结果表明,IL-17A阳性细胞表达在传统PMMA骨水泥组、ES-PMMA骨水泥组、假手术组和空白对照组中,60分钟时ES-PMMA骨水泥组阳性细胞表达增多,但明显少于传统PMMA骨水泥组;假手术组在90分钟时视野中阳性细胞最多。IL-6阳性细胞表达集中在组织间隙内,ES-PMMA骨水泥组IL-6表达各时间点均少于传统PMMA组和假手术组。IL-1β在传统PMMA骨水泥组、假手术组30分钟时表达最多,ES-PMMA组30分钟明显少于两者。TNF-α阳性细胞表达传统PMMA骨水泥组、假手术组30分钟时两组无明显差异,ES-PMMA组阳性细胞数明显少于传统PMMA组和假手术组。小结:1.兔膝关节置换模型可作为成熟的动物模型,模拟手术局部炎性环境,进行宏观实验。2.在兔膝关节置换模型中,ES-PMMA骨水泥植入后可通过释放依诺肝素钠,降低术区局部组织中炎性因子IL-17A/IL-6/IL-1β/TNF-α的表达水平。第二部分ES-PMMA骨水泥影响脂多糖(LPS)诱导的内皮细胞凋亡机制的实验研究全膝关节置换术所导致的炎性反应可引起诸多并发症,而这与炎性因子的增加有着密切联系,在动物实验中我们已经发现ES-PMMA骨水泥对膝关节置换术中的局部炎性因子分泌有抑制作用,可调节局部炎性微环境。而在实际的膝关节置换术中,由于骨水泥植入后可在肺动脉监测到血栓形成,可能是因PMMA骨水泥聚合反应,导致大量的热量释放所致。其反应过程中,由于释放热量导致刺激局部组织,进而激活机体凝血系统,产生的微血栓可造成肺栓塞。经前期研究结果证实,因手术本身刺激激活了凝血系统引发术区存在高凝血状态。同时,当灌注骨水泥并打入假体时,髓腔内压力在短时间内迅速升高,微血栓被挤压至循环系统中,导致肺栓塞等严重并发症。但这些微血栓的形成是否与局部炎性微环境的改变存在联系目前并无报道。在对血栓及其相关疾病的研究中,内皮细胞损伤是讨论的热点问题之一。内皮细胞损伤引起内皮下胶原暴露,激活凝血系统,诱发血小板聚集、活化,这是产生血栓的必要条件之一。膝关节置换手术由于局部组织破坏及骨水泥的植入,造成血管内皮细胞损伤,激活了凝血系统,导致血栓形成。此外,内皮细胞损伤后同时释放炎性因Dibutyryl-cAMP子,产生炎性反应并改变炎性微环境。而炎性因子和血栓形成之间存在密切联系,因此我们选择了内皮细胞作为进一步研究的对象,从体外实验中继续讨论ES-PMMA骨水泥发挥抗炎作用的机制。膝关节置换手术创伤大,疼痛剧烈,机体因为应激反应导致炎性反应增加,特别是IL-6,TNF-α等炎性因子水平升高。结果可引发Ⅳ型超敏反应,其机理主要是效应T细胞、巨噬细胞和白细胞渗透到假体植入部位,并通过改变炎性微环境,诱发局部炎性反应,损伤周围组织。在细胞实验中我们发现,ES-PMMA骨水泥作为一种新型材料,通过对炎性因子的抑制作用,可显著降低内皮细胞凋亡率,而内皮细胞凋亡及坏死减少后,局部炎性环境得到改善,血管内皮下胶原暴露机会也会随之减少,可有效降低血栓性疾病的发生率,这也进一步说明了ES-PMMA骨水泥具有一定的抗炎特性。目的:通过建立LPS诱导的内皮细胞凋亡模型,探讨ES-PMMA骨水泥抑制炎性因子的表达并影响内皮细胞凋亡的机制。方法:骨水泥的制备同动物实验,将制备好的骨水泥液相混匀后放入1cm*1cm*1cm模具中固化待用,试件使用PD-0332991细胞培养前经高压蒸汽灭菌处理。预实验采用MTT法筛选出LPS最佳的诱导浓度,并进行细胞毒性检测;以最适浓度的LPS模拟内皮细胞凋亡模型。实验分为四组:空白对照组、LPS诱导组、PMMA+LPS组和ES-PMMA+LPS组。采用流式细胞学技术检测内皮细胞凋亡情况;Elisa和蛋白印迹法(Western Blot)、细胞免疫荧光法分别检测细胞培养液中IL-6、TNF-α、IL-10和细胞间黏附分子(ICAM)的含量及相关蛋白表达水平。结果:MTT法筛选LPS浓度为100mg/ml时,24小时细胞存活率最大,达80%,随着时间延长,细胞存活率显著降低,确定实验中诱导浓度为100mg/ml。流式细胞术及Elisa检测细胞上清液结果:与空白对照组比较,LPS诱导组IL-6,TNF-α和ICAM的含量增多(P<0.001),IL-10含量减少(P<0.001),凋亡率升高(P<0.001);ES-PMMA+LPS组较LPS诱导组IL-6,TNF-α和ICAM的含量减少(P<0.05),IL-10含量增多(P<0.05),凋亡率降低(P<0.001)。此外,Western blot、免疫荧光结果提示:IL-6、TNF-α和ICAM蛋白表达LPS诱导组较空白对照组上调(P<0.001),平均荧光强度升高(P<0.001),IL-10蛋白表达下调(P<0.001),平均荧光强度降低(P<0.001);ES-PMMA+LPS组较LPS诱导组和PMMA+LPS组IL-6,TNF-α和ICAM蛋白表达均下调(P<0.05、P<0.01、P<0.001),IL-10蛋白表达上调(P<0.001);ES-PMMA+LPS组较LPS诱导组IL-6,TNF-α和ICAM平均荧光强度降低(P<0.001),IL-10平均荧光强度增加(P<0.01)。小结:1.在LPS诱导的内皮细胞凋亡模型中,ES-PMMA骨水泥可抑制IL-6、TNF-α和ICAM蛋白表达,减少炎性反应。2.ES-PMMA骨水泥可通过提高抗炎因子IL-10蛋白表达水平,发挥抗炎作用。3.ES-PMMA骨水泥可降低内皮细胞凋亡率,其机制与调节促炎因子的相关蛋白表达有关。第三部分ES-PMMA骨水泥对巨噬细胞极化的影响及在内皮细胞和巨噬细胞共培养中发挥抗炎作用的实验研究巨噬细胞常用于维持体内平衡及抵抗病原体入侵。其通过抗原提呈和吞噬作用,广泛参与机体免疫反应,是体内固有的免疫细胞。巨噬细胞的极化反应是其参与炎性反应过程的显著特征之一,也是在微环境中受到不同刺激因素发挥作用的基础。巨噬细胞可根据表面标志物及细胞因子不同分为两种主要类型:包括M1型巨噬细胞(classical activated M1-type macrophages)即经典活化型,M2型巨噬细胞(alternatively activated M2-type macrophages)即替代活化型。促炎性因子主要由M1型分泌,并参与炎性反应及组织损伤;抗炎性因子主要由M2型分泌,抵抗炎性反应并进行组织修复。抗炎反应和组织修复之间的表型转变决定了炎性反应的最终结局。当机体受到有害刺激时,巨噬细胞经历M1型极化,蛋白标志物CD16/32,CD64,CD80,CD86等分子的表达增多,诱导局部炎症反应和促炎性巨噬细胞产生;M2型特征为蛋白标志物CD10,CD163,CD206及精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)等分子高表达,可促进组织修复。巨噬细胞的极化机制较多,其中包括TLR4/NF-κB、MAPK、AKT2、STAT1等与M1型有关,STAT3/6、AKT1、PPAR-γ与M2型有关。巨噬细胞在不同组织中会根据所处环境的不同而产生极化。脂多糖(LPS)是一种微生物成分,可以催动巨噬细胞向M1表型极化。如前所述,M1型巨噬细胞能够诱导产生促炎性相关因子,如白介素家族及肿瘤坏死因子(TNF)家族。相比之下,M2型巨噬细胞则具有抗炎反应及组织修复的能力。在炎症的演变过程中,巨噬细胞会先产生促炎性的M1表型,帮助宿主对抗病原体。随后,巨噬细胞逐渐向M2表型转变,形成抗炎反应,并修复受损组织。由于巨噬细胞在调节机体免疫反应、组织代谢中有着不可或缺的作用,若巨噬细胞极化紊乱可能会引发一系列疾病。有效分析巨噬细胞极化障碍的机制和过程,对疾病的诊疗大有帮助。内皮细胞和巨噬细胞密切参与炎症的病理过程。内皮细胞可触发巨噬细胞的选择性生长、分化和功能极化。在本部分实验中,我们通过检测巨噬细胞的极化趋势并建立了内皮细胞和巨噬细胞的共培养模型,对共培养中内皮细胞凋亡率和炎性因子表达水平进行分析,发现与传统PMMA骨水泥相比,ES-PMMA骨水泥可促进巨噬细胞M2极化,并通过减少共培养模型中炎性因子的表达降低内皮细胞的凋亡率。目的:通过检测细胞培养液中巨噬细胞的极化趋势和共培养模型中炎性因子表达和内皮细胞凋亡率,进一步探究ES-PMMA骨水泥的抗炎机制。方法:骨水泥试件、筛选细胞培养液浓度同第二部分。实验同样分为四组:LPS诱导组、PMMA+LPS组、ES-PMMA+LPS及空白对照组。使用流式细胞术检测巨噬细胞极化和共培养体系中内皮细胞凋亡情况。Elisa、Western Blot、细胞免疫荧光法分别检测共培养体系中IL-6、TNF-α、IL-10和细胞间黏附分子(ICAM)的含量和相关蛋白表达水平。结果:1.巨噬细胞相关蛋白CD86表达水平LPS诱导组较空白对照组上调(P<0.01),ES-PMMA+LPS组表达水平下调(P<0.05);CD206表达水平LPS诱导组较空白对照组下调(P<0.001),ES-PMMA+LPS组表达水平上调(P<0.01)。2.内皮细胞和巨噬细胞共培养体系中,LPS诱导组较空白对照组细胞凋亡率明显上升(P<0.001),ES-PMMA+LPS诱导组较LPS诱导组细胞凋亡率明显下降(P<0.001)。Elisa检测上清液中的IL-6、TNF-α和ICAM含量LPS诱导组较空白对照组增多(P<0.001),IL-10含量降低(P<0.001);ES-PMMA+LPS诱导组较LPS诱导组上述细胞因子含量降低(P<0.01或P<0.05),IL-10含量增多(P<0.05)。3.Western Blot和免疫荧光结果显示IL-6、TNF-α和ICAM蛋白表达LPS诱导组较空白对照组上调(P<0.001),平均荧光强度增加(P<0.001);IL-10表达下调(P<0.001),平均荧光强度降低(P<0.001);ES-PMMA+LPS组较LPS诱导组和PMMA+LPS组IL-6、TNF-α和ICAM蛋白表达下调(P<0.05或P<0.01),IL-10表达上调(P<0.001);ES-PMMA+LPS组较LPS诱导组IL-6、TNF-α和ICAM平均荧光强度降低(P<0.001),IL-10平均荧光强度增加(P<0.001)。小结:1.ES-PMMA骨水泥通过释放依诺肝素钠可调节巨噬细胞特异性蛋白CD86和CD206的表达,减少巨噬细胞M1极化,并促进M2极化,减少炎症反应。2.在巨噬细胞和内皮细胞的共培养体系中,ES-PMMA骨水泥可降低内皮细胞的凋亡率,其机制与减少促炎因子IL-6和TNF-α表达有关。3.ES-PMMA骨水泥可降低细胞间黏附分子ICAM蛋白表达,可抑制因内皮细胞损伤后的巨噬细胞黏附趋势,抑制炎症反应进一步加剧。4.ES-PMMA骨水泥提高了共培养体系中抗炎因子IL-10蛋白表达水平,进一步验证了第二部分的实验结果。结论:1.兔膝关节置换模型可作为成熟的动物模型,模拟手术局部炎性环境。在动物实验中,改良的ES-PMMA骨水泥植入后可通过释放依诺肝素钠,降低术区局部组织中炎性因子IL-17A/IL-6/IL-1β/TNF-α的分泌水平。2.在LPS诱导的内皮细胞凋亡模型及巨噬细胞和内皮细胞共培养体系中,ES-PMMA骨水泥可抑制促炎性因子IL-6、TNF-α和ICAM蛋白表达,提高抗炎性因子IL-10表达水平,减少炎性反应,发挥抗炎作用。3.ES-PMMA骨水泥可通过释放依诺肝素钠,干预巨噬细胞特征性蛋白CD86及CD206的表达,调节其M1/M2表型极化方向,从而减少炎性反应。4.在体外实验中,ES-PMMA骨水泥均可降低内皮细胞的凋亡率,其机制与调节炎性因子的相关蛋白表达有关。5.ES-PMMA骨水泥通过降低细胞间黏附分子ICAM蛋白表达,抑制因内皮细胞损伤后的巨噬细胞黏附趋势,防止炎性反应进一步加剧。6.改良的ES-PMMA骨水泥同样也会引起局部炎性反应,但较传统PMMA骨水泥产生的炎性反应小,说明依诺肝素钠具有一定抗炎作用。

目的 检测新生血管性青光眼(NVGBarasertib核磁)患者房确认细节水中肝细胞生长因子(HGF)、中性粒细胞激活肽-78(ENA78)及信号素3A (Sema3A)的水平，并探讨其临床意义。方法 选取2018年1月至2023年1月许昌市人民医院收治的80例NGF患者作为观察组，均采用抗血管内皮生长因子(VEGF)治疗，其中治疗有效患者66例，治疗无效患者14例。另选取单纯行白内障手术的80例患者作为对照组。比较两组患者房水中HGF、ENA78及Sema3A水平，比较观察组抗VEGF治疗有效与无效患者临床资料及房水中HGF、ENA78、Sema3A水平，采用多因素Logistic回归分析NVG患者抗VEGF疗效的影响因素，采用受试者工作特征曲线(ROC)评价房水中HGF、ENA78及Sema3A对NVG患者抗VEGF疗效的预测价值。结果 观察组患者房水中HGF、ENA78及Sema3A分别为(847.56±128.41) ng/L、(185.36±25.41) ng/m L、(2.04±0.85) ng/m L，明显高于对照组的(488.92±98.25) ng/L、(84.29±17.37) ng/m L、(0.68±0.29) ng/m L，差异均有统计学意义(P<0.05)；抗VEGF治疗有效与无效患者的一般资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)，抗VEGF治疗无效患者房水中HGF、ENA78及Sema3A分别为(974.22±154.33) ng/L、(218.83±31.22) ng/m L、(3.02±0.98) ng/m L，明显高于治疗有效患者的(820.69±118.21) ng/L、(178.26±18.33) ng/mL、(1.83±0.82) ng/mL，差异均有统计学意义(P<0.05)；经多因素Logistic回归分析结果显示，房水中HGF、ENA78及Sema3A水平升高均为影响NVG患者抗VEGF疗效的危险因素(P<0.05)；经ROC曲线分析结果显示，房水中HGF、ENA78及Sema3A联合检测预测NVG患者抗VEGF疗效的曲线下面enamel biomimetic积(AUC)值为0.921，明显高于房水中HGF、ENA78及Sema3A单独预测，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 NVG患者房水中HGF、ENA78及Sema3A水平异常升高，且其为抗VEGF疗效的独立危险因素，检测三者水平有助于预测NVG患者抗VEGF疗效，为临床医师判断疾病治疗效果提供参考。

肝素亲和层析介质因其专一性好、操作条件温和等特点，而广泛应用于蛋白分离纯化中，本文以大孔聚丙烯酸酯微球为基质，肝素为配基，利用席夫碱法制备了肝素亲和层析介质。其配基偶联经过三步完成，首先将大孔聚丙烯酸酯微球表面环氧基团通过0.5 mol/L H_2SO_4水解为邻羟基，然后将邻羟基进行氧化为醛基，最后利用醛基与肝素分子的胺基反应将肝素分子固定于微获悉更多球表面。以溶菌酶为模型蛋白，主要考察了肝素偶联反应的各因素对蛋白吸附容量的影响规律，包括肝素浓度、缓冲液pH及浓度、反应时间等，建立了最优偶联肝素配基的方法。所得亲和介质静态吸附容量可达40.3 mg/mL，比商品GP-肝素介质高约36%，经1.0 mol/L的氯化钠洗脱，Shoulder infection其蛋白回收率达到95%。通过扫描电子显微镜表征微球表面形貌，观察到偶联肝素后的微球仍能保持其大孔结构。考察了该类亲和介质在不同操作流速(31.8～318 cm/Crizotinibh)下的动态吸附容量，发现操作流速提高10倍后介质吸附容量仅下降12%。经10次重复使用后，动态吸附容量仍可保持初始容量的81%。用于混合蛋白模型中分离乳铁蛋白，结果表明具有良好的分离效果。

目的：用一种组分百日咳疫苗残留毒性的体外替代检测方法，更稳定和客观地评价疫苗成品的生产一致性。方法：验证直接定性法和间接定量法native immune response2种中华仓鼠卵巢细胞簇集试验方法，分别对6个国内外厂家的10种组分百日咳疫苗产品毒性进行定量和定性检测，并使用百日咳毒素参考品将体外法与小鼠组胺致敏试验进行桥接和初步评价。结果selleck：体外定量试验的灵敏度为0.0026±0.0003 IU·m L~(-1)，几何变异系数为13%，体外定性试验的灵敏度为0.0067±0.0016 IU·m L~(-1)，几何变异系数为24%，组胺致敏试验的灵敏度为3.3 IU·m L~(-1)；所有样品的体外定性结果均为阴性，小鼠组胺致敏试验结果均合格，体外定量结果与小鼠组胺致敏结果具有良好的相关性（r=0.737,P<0.05）。结论：本研究在国内首次使用CHO细胞簇集试验方法检测百日咳疫苗成品，并进行了初步评价。该方法灵敏度高于小鼠组胺致敏试验，可selleck化学应用于百日咳疫苗毒性及毒性逆转检测。该方法需要更广泛的推广应用和数据积累，以达到完全替代动物实验的目标。

目的 分析探讨复合溶葡萄球菌酶消毒剂联合湿润烧伤膏治疗Ⅱ度烧伤的临床疗效。方法 选取2020年5月至2021年5月河南科技大学第一附属医院收治的64例Ⅱ度烧伤患者作为研究对象,按照随机数表法将其随机分为观察组(32例)与对照组(32例),观察组患者局部创面采用复合溶葡萄球菌酶消毒剂联合湿润烧伤膏治疗,对照组患者局部创面采用复合溶葡萄球菌酶消毒剂联合凡士林水胶体敷贴治疗,对比观察两组患者创面细菌培养情况、血清炎症因子水平、创面疼痛评分、创面愈合率与愈合时间以及愈后皮肤瘢痕增生情况。结果治疗3d后,观察组患者创面铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、大肠杆菌的细菌载荷量均明显低于对照组(t=123.030、270.124、4.475,P均<0.001);治疗第14天,观察组患者肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)水平均明显低于对照组(t=5.573、2.468,P<0.001、P=0AZD6738浓度.016);治疗第7、14天,观察组患者创面视觉模拟评分法(VAS)评分均明显低于对照组(t=6.236、4.389,P均<0.001)、创面Tamoxifen体内愈合率均明显高于对照组(t=3.617、5.304,P均<0.001);观察组患者创面愈合时间明显短于对照组(t=3.545,P<0.001);观察组患者愈后皮肤温哥华瘢痕量表(VSS)中色泽、血管分布、厚度、柔软度评分均明显低于对照组(t=3.607、2.281、3.194、3.737,P <0.001、P=0.026、P=0.002、P=0.001)。结论 复合溶葡injury biomarkers萄球菌酶消毒剂联合湿润烧伤膏能够有效降低Ⅱ度烧伤患者创面细菌载荷量、炎症反应及疼痛程度,缩短创面愈合时间,减轻瘢痕增生。

目的本课题旨在通过“中医传承辅助平台V2.5”系统收集the Cochrane Library、维普数据库、中国生物医学文献数据库、万方数据库、Pubmed数据库、CNKI(China national knowledge infrastructure)数据库自建库以来至2022年06月期间所有关于治疗良性前列腺增生症(Benign prostatic hyperplasia,BPH.)的中药内服复方,进行数据分析以得到用药规律,为临床医师治疗BPH提供一定的理论参考依据。方法收集各大数据库自建库以来至2022年06月期间所有使用中药内服复方治疗BPH的相关文献,根据纳入标准、排除标准筛选得到符合本研究的中药内服复方文献,提取相关数据制作Word文件,将数据进行复AZD2281半抑制浓度核、规范、统一后逐一录入“中医传承辅助平台V2.5”系统,建立治疗BPH中药内服复方的数据库。通过使用本数据分析系统中的基本信息统计部分,得出药物出现频次、药物四气五味、药物归经;通过使用本数据分析系统中的组方分析,得出药物组方规律,主要包括用药模式、规则分析以及网络展示;通过使用本数据分析系统中的新方分析,得出药物的聚类分析并提取核心组合与新方组合。结果1.一般信息:本研究共收录处方662确认细节首,药物累计使用6568次。2.在662首处方中,药物使用四气频次依次为寒、温、平、热、凉,寒2165次、温1735次、平1520次、热226次、凉110次。3.在662首处方中,药物使用五味频次依次为甘、苦、辛、咸、酸、涩,甘3222次、苦2447次、辛1812次、咸505次、酸158次、涩154次。4.在662首处方中,肝经、肾经、脾经、心经、肺经、胃经、膀胱经、大肠经、小肠经、胆经、心包经、三焦经为药物使用归经频次的依次排序,肝经3035次、肾经2409次、脾经2203次、心经1781次、肺经1682次、胃经1298次、膀胱经931次、大肠经605次、小肠经399次、胆经305次、心包经186次、三焦经33次。5.在662首处方中,茯苓、黄芪、川牛膝、泽泻、车前子、肉桂、王不留行、甘草、熟地黄、桃仁各药物使用频次位于前十,茯苓245次、黄芪214次、川牛膝205次、泽泻185次、车前子174次、肉桂151次、王不留行144次、甘草137次、熟地黄133次、桃仁131次;药物使用频次>50次共有药物39味。6.在662首处方中,将药物组方规律设置支持度56,置信度0.8,共得到药对44对,涉及药味16味;药对关联系数>0.2共有12组,药物规则分析关联药组共有9组。7.共提取2种不同的核心组合各6组,分别为党参＿炙黄芪＿黄芪、皂角刺＿浙贝母＿土茯苓、白果＿黄精immunesuppressive drugs＿红景天、猪苓＿桂枝＿茯苓、紫苏＿炙麻黄＿款冬花、桔梗＿杏仁＿桑白皮、炙黄芪＿炒白术＿炒麦芽、苦参＿浙贝母＿土茯苓、黄精＿茯神＿蛇床子、泽泻＿牡丹皮＿茯苓＿山药、紫苏＿炙麻黄＿防风、黄芩＿紫菀＿麦冬＿桑白皮。8.聚类分析新方6首,分别为党参＿炙黄芪＿黄芪＿炒白术＿炒麦芽、皂角刺＿浙贝母＿土茯苓＿苦参、白果＿黄精＿红景天＿茯神＿蛇床子、猪苓＿桂枝＿茯苓＿泽泻＿牡丹皮＿山药、紫苏＿炙麻黄＿款冬花＿防风、桔梗＿杏仁＿桑白皮＿黄芩＿紫菀＿麦冬。结论通过数据挖掘的方法,对治疗BPH中药内服复方的用药规律进行分析总结,指导临床用药。

目的:探讨经阴道三维超声鉴别诊断子宫内膜息肉和子宫内膜增生Imidazole ketone erastin的价值。方法:选取2021年2月—2022年12月在南方医科大学第七附属医院就诊经二维超声检查提示宫腔占位或内膜不均增厚的患者112例,所有患者均行经阴道三维超声检查,并在2 d内完成宫腔镜检查,其中子宫内膜息肉50例,子宫内膜增生62例,比较两者子宫内膜体积、血流参数等。结果:子宫内膜息肉患者内膜体积小于子宫内膜增生患者,差异有统计学意义(P<0.05),内膜内的血管指数(VI)、血流指数(T-cell immunobiologyFI)、血管-血获悉更多流指数(VFI)大于子宫内膜增生(P<0.05),内膜下2 mm的VI和VFI小于子宫内膜增生患者(P<0.05),FI比较差异无统计学意义(P>0.05)。两者平均灰度值(mean grayness,MG)、内膜灰阶值和肌层灰阶值比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:经阴道三维超声检查子宫内膜息肉和子宫内膜增生内膜体积、血流情况等存在明显差异,可为二者鉴别诊断提供帮助。